乙型肝炎病毒(HBV)感染是全世界最为普遍的慢性病毒感染疾病。全世界有约20亿人曾经感染过乙肝病毒，其中约有3.5亿人是乙肝病毒的慢性携带者。乙型肝炎病毒感染分为急性感染和慢性感染，其中大部分情况下为急性HBV感染，并且绝大多数的成年人在急性HBV感染后可以自愈或治愈，但是慢性HBV感染却难以根治并有严重的后遗症，包括肝纤维化、肝硬化、肝代谢失调和肝癌的发生，因而成为一个全球性的公共卫生事件。目前关于预防乙肝病毒感染的安全有效的疫苗在上世纪90年代已经开发出来了并在全球预防乙肝病毒感染中做出了重大贡献。而应用于临床治疗乙肝病毒感染的药物只有两种干扰素和五种核苷类似物的病毒聚合酶抑制剂药物，但是干扰素仅对不到40％的病人有效，并且还有较强副作用;而聚合酶抑制剂不能清除共价闭合环状DNA(covalently closedcircular DNA，cccDNA)，停药后会病毒复制会迅速反弹，并且长期服用还会使病毒发生变异而产生抗药性。因此，筛选更多新的抗乙肝病毒的药物来用于临床治疗的药物联用和换用就非常有必要了。尽管现在已经有HBV的组装抑制剂，侵入抑制剂，分泌抑制剂，cccDNA抑制剂以及一些免疫调节类抗HBV药物正在研究之中，甚至有些还进入了临床试验阶段，但是距离应用于临床治疗HBV感染还有很长的一段路要走。把一个药推向市场是一个异常困难又曲折的过程。大约一个药从发现到药监局批准上市大约需要10到14年，并需要花费7.5亿美元的科研经费。因此，找到能节省开发新药的成本和时间的新策略将是一件非常受欢迎的事。近年来发展起来的最流行的一种策略就是发掘在药监局批准上市的成药的新功能，这一策略将大大降低新药研发投入的经费和时间。在成药中寻找具有抗HBV活性的药物将是一件很有意义的事情。　　本研究挑选了一个由1280个成药组成的药库，并筛选其中有抗HBV活性的药物。我们使用的细胞模型HepAD38细胞系是一个可诱导的细胞系，并被广泛用于抗HBV药物高通量筛选研究。我们使用ELISA的方法检测了药物处理HepAD38细胞后细胞上清中的HBeAg和HBsAg，10μM的药物对细胞上清中HBeAg和/或HBsAg的水平的抑制率在达到30％以上被挑选出来用于下一步筛选，共有65个这样的药物被筛选出来。随后用real-time PCR的方法检测了以上65个药物处理HepAD38细胞后细胞上清中的HBV DNA的水平，并挑选出对上清中的HBV DNA的水平有剂量依赖的抑制的效果的药物，并挑选其中效果较好的药物进行深入的抗病毒机理研究。奥昔卡因就是这次筛选出来的一个具有抗乙肝病毒活性的药物，它处理HepAD38细胞三天可以剂量依赖地抑制e抗原的分泌、胞外病毒DNA的水平（EC50，1.25μM）和胞内病毒DNA的水平。奥昔卡因处理三天在HepAD38细胞上的细胞毒性的CC50为54.7μM，抑制病毒粒子的分泌的选择指数约为40左右。随后，我们进一步的研究结果发现奥昔卡因对HBV的cccDNA，病毒的启动子的转录以及病毒的RNA的水平的影响都不显著，但是我们惊讶地发现奥昔卡因可以明显剂量依赖地抑制HBV核衣壳的形成。此外我们还检测到奥昔卡因可以下调胞质内钙离子的水平，并进而影响到核农壳的形成，而上调钙离子的水平可以回复奥昔卡因的抗病毒作用和对核衣壳的形成的抑制，并且奥昔卡因对于HBV核衣壳组装的影响是通过影响核心蛋白的相互作用和自我组装引起的。因此基本可以推断奥昔卡因的抗乙肝病毒作用是作用在病毒的组装阶段，并且这一过程是通过下调胞质内的钙离子水平而实现的。此外，我们还发现奥昔卡因可以很好地抑制拉米夫定和恩替卡韦双抗药性突变株和阿德福韦抗药性突变株病毒的复制，是未来临床治疗乙肝病毒感染中的一个很有前途的药物。