虾青素对大气PM2.5暴露人群血清代谢组学影响的研究

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目的:应用液相色谱-质谱联用技术(Liquid Chromatography-Mass Spectrometer,LC-MS)对大气细颗粒物(Fine Particulate Matter,PM2.5)暴露人群的血清以及虾青素干预的PM2.5暴露人群的血清进行检测,找出差异代谢物,从而探究虾青素对PM2.5暴露人群的保护作用,为膳食补充虾青素保护易感人群免受PM2.5损害提供科学依据。方法:采用随机、双盲、安慰剂对照实验,共招募60名受试者,均为河北医科大学在校学生。按照年龄、性别、体重指数(Body Mass Index,BMI)匹配的原则将其随机分为干预组和对照组,每组30名,男女各半。实验于2018年12月1日开始至2019年1月13日结束。在2018年12月1日、12月23日和2019年1月13日分别进行3次血压、心率的测量。在2018年12月23日进行实验中期血液样本采集,在2019年1月13日进行实验末期血液样本采集。采用液相色谱-质谱仪对血清样本进行检测,得到血清代谢图谱和原始数据。采用Analyst TF1.7.1(AB Sciex)软件进行数据采集,采用Progenesis QI软件进行色谱峰对齐、峰提取和峰面积标准化等预处理。用SIMCA-P13.0对预处理的数据进行无监督模式下的主成分分析(Principal components analysis,PCA)、偏最小二乘判别分析(Partial least squares discrimination analysis,PLS-DA)、正交偏最小二乘判别分析(Orthogonal partial least squares discrimination analysis,OPLS-DA)结合重复测量方差分析等方法,筛选出两组间的差异代谢物。将最终筛选获得的差异代谢物的核质比导入人类代谢组数据库(Human Metabolome Database,HMDB)进行结构鉴定,并利用Metabo Analyst平台结合Homo sapiens(KEGG)代谢通路数据库对筛选出的差异代谢物进行代谢通路分析。结果:1.实验中期干预组与对照组相比,共鉴定出31种差异代谢物,有15种差异代谢物上调,包括鞘氨醇、溶血磷脂等;16种差异代谢物下调,包括白三烯F4、磷脂酰乙醇胺等。代谢通路分析表明,甘油磷脂代谢通路发生改变。2.实验末期干预组与对照组相比,共鉴定出27种差异代谢物,有13种差异代谢物上调,包括溶血磷脂酰乙醇胺、溶血磷脂、亚油酰基左旋肉碱等;14种差异代谢物下调,包括褪黑素、前列腺素D2、N-乙酰-L-酪氨酸等。代谢通路分析表明,甘油磷脂代谢通路和花生四烯酸代谢通路发生改变。结论:1.虾青素干预可以引起机体血清代谢途径发生改变。2.虾青素可以通过调节甘油磷脂代谢、花生四烯酸代谢等,逆转PM2.5引起的机体异常变化。
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