【摘 要】
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目的:本研究通过实时荧光定量聚合酶链反应（RT-q PCR）法检测风湿性心脏瓣膜病、先天性心脏病等心血管疾病患者右心房心肌组织中miR-133a-3p、miR-208a-3p相对表达量,并通过Masson染色观察其纤维化程度,免疫组化检测其I型胶原蛋白量的表达;旨在探讨micro RNAs在心肌重构发生机制中的作用,为进一步深入研究奠定基础。方法:（1）选取2021年7月1日至2021年11月31
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目的:本研究通过实时荧光定量聚合酶链反应（RT-q PCR）法检测风湿性心脏瓣膜病、先天性心脏病等心血管疾病患者右心房心肌组织中miR-133a-3p、miR-208a-3p相对表达量,并通过Masson染色观察其纤维化程度,免疫组化检测其I型胶原蛋白量的表达;旨在探讨micro RNAs在心肌重构发生机制中的作用,为进一步深入研究奠定基础。方法:（1）选取2021年7月1日至2021年11月31日来我院胸心血管外科就诊并确诊为风湿性心脏瓣膜病、先天性心脏病、主动脉夹层等心血管疾病患者12例,通过经胸彩色多普勒超声心动图测量患者右心房内径增大（RAs＞40mm）、标准心电图监测提示（P波振幅＞0.25mv或出现心房颤动）分为对照组（n=6）和心房重构组（n=6）;（2）所有患者均知情并签署知情同意书,采集12例患者在全麻手术体外循环建立后右心耳心肌组织约200mg入组研究,于-80℃液氮冰箱或甲醛溶液固定保存待用;（3）收集12例研究对象的术前年龄、性别等一般临床资料,测定血清总胆固醇、甘油三脂等术前血生化结果;（4）RT-q PCR法检测心房重构组和对照组患者右心房心肌组织miR-133a-3p、miR-208a-3p相对表达量,并统计分析两组心肌组织micro RNAs的差异性表达;（5）Masson染色观察心房重构组和对照组心肌组织胶原蛋白沉积程度,免疫组化法检测两组心肌组织标本中I型胶原（Collagen I,Col I）蛋白量的表达;生物信息学分析其靶蛋白互相作用及靶基因的生物学功能。结果:（1）单因素分析结果显示,心房重构组患者与对照组比较,在年龄、性别、体重指数、既往病史、术前血生化等一般临床资料上无显著差异（P＞0.05）,两组均衡可比。（2）RT-q PCR结果显示:心房重构组miR-133a-3p的相对表达量（11.48±6.10）显著高于对照组（4.38±3.52）（P＜0.05）,且心房重构组miR-208a-3p的相对表达量（7.17±4.21）也显著高于对照组（2.34±1.46）（P＜0.05）;（3）Masson染色结果显示:心房重构组心肌胶原纤维沉积量显著高于对照组（P＜0.05）,且排列紊乱,分布不均,提示存在明显心肌纤维化;（4）免疫组化结果显示:心房重构组较对照组而言,深棕色面积增加,Collagen I的表达显著增多（P＜0.05）。（5）生物信息学分析结果表明,miR-133a-3p的核心靶基因有13个,主要参与蛋白质修饰降解过程,miR-133a-3p可能通过抑制蛋白降解有利于心肌重构纤维蛋白沉积病理过程;未检测到miR-208a-3p的核心靶基因,但其参与基因表达调控过程、细胞周期、蛋白质磷酸化修饰。结论:右心房重构心肌组织miR-133a-3p、miR-208a-3p表达显著上调,miR-133a-3p可能通过抑制蛋白降解促进心肌重构纤维蛋白沉积。
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