癌症、心血管疾病、神经性疾病是威胁人类生命健康最主要的三大病症。癌症的研究是目前生物医学领域的热点。癌症是由外在因素和内在因素共同作用所引发的疾病。外在因素包括辐射、紫外线、有毒物质、抽烟、酒精等,内在因素包括DNA突变,染色体异常,抑癌基因失活,原癌基因异常活化等。在内外因素的作用下,造成细胞异常生长,在组织表面形成肿瘤。早期形成的肿瘤是良性肿瘤,发展到后期,会变成恶性肿瘤。在癌细胞转移前期,一群肿瘤表皮细胞发生表皮间质转化,转变成间充质类细胞,这群细胞逃脱胞外基质的限制,穿过毛细血管,并通过淋巴或血液系统的循环转移到其他器官,最后少数细胞发生间质表皮转化,重新变成表皮细胞,在新的位置形成新的肿瘤,即转移灶。癌细胞转移,意味着癌症已经进入中后期,病人的生存时间所剩无几。因此,表皮间质转化所引发的癌细胞转移是癌症发展过程中的重要一环。表皮间质转化(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT)是良性肿瘤向恶性癌症发展过程中的重要步骤。目前已知导致EMT发生的重要转录因子包括Snail、Slug、TWIST、锌指结构蛋白等。在EMT发生过程中,细胞失去表皮细胞的特性,获得间充质细胞的特性。具体表现为细胞形态变成梭形,细胞间结构变得松散,细胞失去极性。表皮细胞的标志蛋白如E-钙黏素(E-cadherin)、β-连环素(β-catenin)、闭合蛋白(Occludin)等减少,间充质细胞的标志蛋白如N-钙黏素(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤连蛋白(Fibronectin)等增加。实验室早期研究发现BMP(Bone morphogenetic protein)信号通路中的转运蛋白 RanBP3L(Ran-binding Protein 3 Like)能把蛋白 Smad1/5/8 从细胞核内转运到细胞质中,在此基础上,我们准备深入研究RanBP3L的其他功能。查找文献资料,我们发现 RanBP3L 的类似蛋白 RanBP3(Ran-binding Protein 3)能被 Akt/PKB 磷酸化,通过序列比对,我们发现RanBP3L同样具有Akt的识别的序列72RVRSSS77。实验确认RanBP3L的S77位点能被Akt磷酸化,并且该磷酸化修饰能被磷酸酶PPM1A去磷酸化。在乳腺上皮细胞MCF10A中稳定表达RanBP3L-WT,我们发现细胞形态变成梭形,细胞间结构变得松散,表现出间充质细胞的特性。表达RanBP3L-S77D时,间充质细胞的特性变得更加明显。表达RanBP3L-S77A时,与对照组接近,仍具有表皮细胞的特性。综上所述,我们的实验确认了 RanBP3L的S77位点能被激酶Akt磷酸化,该磷酸化修饰能被磷酸酶PPM1A去磷酸化调控。并且发现RanBP3L能促进细胞发生表皮间质转化,其作用效果与磷酸化状态有关。