大鼠视网膜缺血再灌注损伤中PKC、P53与CyclinD1的表达和bFGF对其影响

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【目的】 探讨外源性碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)在视网膜缺血再灌注损伤中的作用机制,为bFGF·对视网膜缺血再灌注损伤的治疗方面的研究提供理论依据。【方法】 将28只Wistar大鼠随机分为正常组(4只)、缺血组(24只,左眼)和bFGF治疗组(24只,右眼)三组,其中缺血组和bFGF治疗组又按照不同的再灌注时间分为再灌注后1h、6h、12h、24h、48h和72h6个时间段(每时间段4只大鼠)。通过升高眼内压造成视网膜缺血后,再恢复正常眼内压而制作成视网膜缺血再灌注损伤动物模型,并在以bFGF(治疗组)或平衡盐溶液(缺血组)玻璃体腔注射后1h、6h、12h、24h、48h和72h分别处死动物,通过免疫组织化学链酶卵白素-生物素复合体(strept-avidin-biotin complex,SABC)法检测不同时段视网膜组织中蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)、P53蛋白和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达变化。【结果】 1.缺血组视网膜在再灌注后6h可发现有PKC的表达,主要表达在视网膜神经节细胞层及神经纤维层,以后表达量逐渐增加,24h达到高峰,此时除在神经节细胞层及神经纤维层有强表达外,内核层也有散在表达,48h仍持续强表达,72h表达略有下降,但仍维持较高水平。2.缺血组视网膜在再灌注后6h可发现有P53蛋白的表达,P53蛋白主要表达在视网膜神经节细胞层及神经纤维层,以后表达量逐渐增加,24h达到高峰,此时除在神经节细胞层及神经纤维层有强表达外,内核层也有散在表达,48h仍持续强表达,72h表达已明显下降。3.缺血组视网膜在再灌注后6h可发现有CyclinD1的表达,CyclinD1表达主要在视网膜神经节细胞层及神经纤维层,位于细胞核内,以后表达量逐渐增加,24h达到高峰,此时除在神经节细胞层及神经纤维层有强表达外,内核层也有散在表达,48h仍持续强表达,72h表达已明显下降。4.bFGF治疗组各观察指标变化规律基本与缺血组相似,但表达量相对明显减弱,二组比较,在再灌注6h、12h、24h、48h、72h时段差别P均<0.05,具有统计学意义。【结论】视网膜缺血再灌注损伤能引起视网膜组织中PKC、P53蛋白和CyclinD1在视网膜神经节细胞层、神经纤维层与内核层表达的增高;PKC、P53蛋白及CyclinD1可能通过在与视网膜缺血再灌注损伤的细胞凋亡中起作用而参与了视网膜缺血再灌注损伤的发生机制;bFGF可以抑制视网膜缺血再灌注损伤时PKC、P53中文摘要蛋白和Cyc 1 1 nDI在视网膜表达的增高。
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