鲍鱼外套膜酶解物和胶原蛋白研究

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鲍鱼外套膜是鲍鱼加工过程中的副产物,占鲍鱼全重(带壳)的4-7%,富含蛋白质。本论文以皱纹盘鲍外套膜为原料,采用蛋白酶水解法制备鲍鱼外套膜水解物(Abalone mantle hydrolysate,AMH);采用胃蛋白酶与乙酸溶解相结合的方法制备鲍鱼外套膜酶促溶性胶原蛋白(pepsin-soluble collagen,PSC)。采用中性蛋白酶水解鲍鱼外套膜制得AMH,通过超滤得到分子质量分别为小于1 kDa、1~3 kDa、3~5 kDa和5~10 kDa的四种酶解物组分;考察AMH和不同分子质量组分的体外抗氧化活性,结果表明:AMH清除DPPH自由基和OH自由基的IC50值分别为11.76、12.07,亚铁离子螯合能力的EC50值为4.04 mg/mL;经超滤分离后组分的抗氧化活性明显增强,其中分子质量1~3 kDa组分清除DPPH自由基和羟自由基能力最强,分子质量3~5 kDa组分的亚铁离子螯合能力最强。对鲍鱼外套膜酶促溶性胶原进行结构鉴定、理化性质和功能特性研究。结果表明:鲍鱼外套膜PSC的提取率为11.01%(干基)。氨基酸分析发现,每1000个总氨基酸残基中,甘氨酸含量为327个,脯氨酸羟基化率为47.0%;紫外—可见扫描测得其最大吸收峰位于232 nm;圆二色谱分析鲍鱼外套膜PSC在222 nm处存在一个正峰,在196 nm处存在一负槽,属于典型胶原蛋白三股螺旋结构的圆二色谱特征峰型。Q-TOF2质谱仪测定结果表明,随机片段氨基酸序列具有胶原蛋白典型一级结构“G-X-Y”重复序列。对鲍鱼外套膜PSC理化性质进行考察,鲍鱼外套膜PSC的变性温度(Td)为24.0℃;pH和NaCl浓度对胶原蛋白溶解度的影响结果表明,随着NaCl浓度的升高,鲍鱼外套膜PSC溶解度下降;在pH 2.0时,鲍鱼外套膜PSC的溶解度最大,pH 4.4时达到最低。功能特性研究结果表明:鲍鱼外套膜PSC具有较好吸油性,高达60.4 mL/g;PSC溶液起泡性为51.3%,乳化性可达到95.0%。
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