【摘 要】
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目的:探讨二甲双胍（MET）联合达格列净（DAPA）对西罗莫司（SRL）诱导的胰腺细胞损伤的保护作用及其机制。方法:1.以INS-1细胞为研究对象,分别设置正常对照（VH）组、SRL组、SRL+DAPA组、SRL+MET组和SRL+MET+DAPA组;2.应用CCK-8法检测经不同浓度药物作用后INS-1细胞的活性,筛选出合适的药物浓度;3.应用CCK-8法检测VH组及各实验组INS-1细胞的活性
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目的:探讨二甲双胍（MET）联合达格列净（DAPA）对西罗莫司（SRL）诱导的胰腺细胞损伤的保护作用及其机制。方法:1.以INS-1细胞为研究对象,分别设置正常对照（VH）组、SRL组、SRL+DAPA组、SRL+MET组和SRL+MET+DAPA组;2.应用CCK-8法检测经不同浓度药物作用后INS-1细胞的活性,筛选出合适的药物浓度;3.应用CCK-8法检测VH组及各实验组INS-1细胞的活性;4.葡萄糖刺激胰岛素分泌实验（GSIS）测定VH组及各实验组INS-1细胞胰岛素分泌水平;5.荧光染色法检测VH组及各实验组INS-1细胞活性氧（ROS）的表达;6.Annexin V-FITC/PI试剂盒检测VH组及各实验组细胞凋亡情况;7.蛋白质免疫印迹法检测VH组及各实验组INS-1细胞Mn SOD、Casepase-1、AMPK、PI3K、AKT、FOXO-1蛋白的表达。结果;1.通过CCK-8法对比不同浓度药物处理后INS-1细胞的活性,筛选出实验药物浓度:SRL浓度为30μg/m L、MET浓度为40μg/m L、DAPA浓度为25nmol/m L;2.与VH组相比,SRL组INS-1细胞的活性显著降低（P＜0.05）,GSIS水平下降（P＜0.05）,活性氧生成增加（P＜0.05）,细胞凋亡增加,Mn SOD、p-AMPK、p-FOXO-1蛋白表达减少,而Casepase-1、PI3K、p-AKT蛋白表达增加,由此证明,SRL能够诱导INS-1细胞损伤,使INS-1细胞胰岛素分泌功能下降;3.与SRL组相比,单药治疗组（SRL+DAPA组和SRL+MET组）INS-1细胞的活性明显增高（P＜0.05）,GSIS水平上升（P＜0.05）,活性氧生成减少（P＜0.05）,细胞凋亡减少,Mn SOD、p-AMPK、p-FOXO-1蛋白表达增多,而Casepase-1、PI3K、p-AKT蛋白表达减少;4.SRL+DAPA组与SRL+MET组相比,各项实验结果无明显差异;5.与单药治疗组（SRL+DAPA组和SRL+MET组）相比,SRL+MET+DAPA组INS-1细胞活性明显增加（P＜0.05）、GSIS水平进一步改善（P＜0.05）,ROS表达减少（P＜0.05）,细胞凋亡减少,Mn SOD、p-AMPK、p-FOXO-1蛋白表达增加,Casepase-1、PI3K、p-AKT蛋白表达减少。结论:1.MET联合DAPA对SRL诱导的INS-1细胞损伤具有保护作用;2.在MET治疗的基础上推荐DAPA作为治疗移植后新发糖尿病的二线药物。
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