【摘 要】
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【目的】探讨miR-223-3p在高糖诱导的心肌细胞焦亡中的作用及其可能的机制。【方法】将H9c2细胞随机分为对照组（5.6mmol/L葡萄糖+24.4mmol/L甘露醇,control group,CON）和高糖组（葡萄糖浓度:30mmol/L,high glucose group,HG）,应用CCK8法测定H9c2细胞活性;Western blot（WB）法测定焦亡相关蛋白（NLRP3、Cas
【基金项目】
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国家自然基金（81670424和81900424）； 湖南省自然基金项目（2019JJ40258和2019JJ50502）； 湖南省卫生健康委项目（202102063633,B2016087,B20180058和B20180874）；
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【目的】探讨miR-223-3p在高糖诱导的心肌细胞焦亡中的作用及其可能的机制。【方法】将H9c2细胞随机分为对照组（5.6mmol/L葡萄糖+24.4mmol/L甘露醇,control group,CON）和高糖组（葡萄糖浓度:30mmol/L,high glucose group,HG）,应用CCK8法测定H9c2细胞活性;Western blot（WB）法测定焦亡相关蛋白（NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N、IL-1β）和SPI1蛋白的表达;H9c2细胞培养液上清的LDH、IL-1β和IL-18的水平分别采用LDH试剂盒和ELISA法测定;免疫荧光染色法（immunofluorescence,IF）测定焦亡相关蛋白和SPI1蛋白的表达,H9c2细胞中miR-223-3p的表达通过RT-q PCR检测法测定,以探讨HG对H9c2细胞生长活力和细胞以及miR-223-3p和SPI1表达的影响。在H9c2细胞中分别转染miR-223-3p反义寡核苷酸（AMO-miR-223-3p）或者阴性对照物（AMO-NC）,将其分为四组:CON组、HG组、HG+AMO-miR-223-3p组和HG+AMO-NC组,H9c2细胞中miR-223-3p的表达通过RT-q PCR检测法测定,WB法测定焦亡相关蛋白的表达;H9c2细胞培养液上清的LDH、IL-1β和IL-18的水平分别采用LDH试剂盒和ELISA法测定;IF测定焦亡相关蛋白和SPI1蛋白的表达,以探讨miR-223-3p是否可调节HG诱导的H9c2细胞焦亡以及miR-223-3p对SPI1的调控作用。进一步将实验分为CON组、HG组、HG+si RNA-NC组以及HG+si-SPI1组,WB法测定焦亡相关蛋白和SPI1蛋白的表达;H9c2细胞培养液上清的LDH、IL-1β和IL-18的水平分别采用LDH试剂盒和ELISA法测定;IF法测定焦亡相关蛋白（NLRP3和Caspase-1）和SPI1蛋白的表达,以探讨SPI1在HG诱导H9c2细胞焦亡中的作用。【结果】HG诱导H9c2细胞24h后,miR-223-3p上调,而NLRP3、GSDMD、Caspase-1和IL-1β蛋白的表达亦显著增多,SPI1的表达下调,细胞培养液上清中LDH、IL-1β以及IL-18的水平均显著增加,IF结果与WB结果相一致。WB和IF结果显示,与HG组相比,HG+AMO-miR-223-3p组SPI1蛋白的表达显著上调,差异具有统计学意义（P＜0.05）;与HG组和HG+AMO-NC相比,HG+AMO-miR-223-3p组miR-223-3p表达降低;NLRP3、GSDMD、Caspase-1和IL-1β蛋白的表达降低,细胞培养上清液进行LDH和ELISA检测的结果显示LDH、IL-1β和IL-18的水平减少。抑制SPI1后能够进一步增加HG诱导H9c2细胞焦亡的作用（P＜0.05）。【结论】miR-223-3p可通过调控SPI1的表达抑制高糖诱导的H9c2细胞焦亡。
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【目的】mi R-3619-5p在多种癌症类型中表达异常。本课题组前期研究发现长链非编码RNA NBR2（lnc RNA NBR2）在胃癌细胞系中高表达,发挥促癌作用,且NBR2与mi R-3619-5p存在直接结合的关系,因而本实验将进一步探讨mi R-3619-5p对胃癌细胞生物学功能的影响及其鉴别其下游靶基因。【方法】1.q RT-PCR检测mi R-3619-5p在胃癌细胞SGC7901、
【背景】心肌梗死（Myocardial infarction,MI）的发病率和死亡率在国际范围内都居高不下。目前临床上主要的治疗手段为经皮冠状动脉介入术（Percutaneous coronary intervention,PCI）,这可以使心外膜冠状动脉的血流得到恢复,从而降低患者的死亡率。但仍有相当一部分的患者在恢复血流灌注之后,心肌损伤反而加重,即“心肌缺血-再灌注损伤（Myocardial
【目的】本研究旨在探讨SFN-RAB7通路在调控上皮间质转化（EMT）中的作用,及其与鼻咽癌（NPC）迁移侵袭的关系,为临床上NPC的靶向治疗提供理论依据和实验基础。【方法】1.采用Western Blot检测NPC细胞系5-8F和6-10B中SFN与RAB7的表达情况。2.利用ZDOCK2.3.2在线网站分析SFN与RAB7之间的结合关系。3.利用p CDH-CMV-MCS-EF1a-GFP载体
【背景】慢性心力衰竭的发生发展是一个复杂的过程,它是由多种机制共同作用的结果。不同原因所导致的心力衰竭以及心力衰竭发展的不同阶段其参与作用的机制可能不同,而神经-体液调节失衡以及能量代谢障碍在其中起着关键作用。在神经体液失衡机制中,RAAS系统的激活,特别是血管紧张素II（AngⅡ）水平的增加,在不利的心肌重构和心力衰竭的进展中起着举足轻重的作用。前蛋白转化酶枯草溶菌素9（proprotein c
背景:动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）是心血管疾病主要病理基础,其发生发展与巨噬细胞息息相关。脂肪量与肥胖相关基因（FTO）作为第一个m~6A m RNA去甲基化酶的发现确立了可逆RNA修饰的概念,FTO是主要m~6A“橡皮擦”之一。N6甲基腺苷（N6-methyladenosine,m~6A）修饰影响脂质代谢过程,与人体脂质紊乱疾病进展有关。作为真核生物信使RNA（m RNA
目的:PLCD1（Phospholipase C delta 1）基因位于3p22,编码一种可以介导细胞能量代谢、钙离子稳态和细胞内运动的酶。PLCD1在几种类型肿瘤中发挥抑瘤作用,但其在肾细胞癌（RCC）中的表达与作用尚不清楚。本研究观察PLCD1在肾细胞癌中的表达情况,并探索PLCD1表达异常的原因,进一步揭示PLCD1在肾细胞癌中的作用与初步机制。方法:本研究通过生信分析PLCD1在肾癌组织
【目的】探讨烟酰胺单核苷酸（NMN）改善PCOS大鼠子宫内膜组织稳态的作用。【方法】将45只雌性Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组（CON组）15只和模型组（PCOS组）30只。CON组大鼠进行普通饲料喂养,PCOS组大鼠用来曲唑连续灌胃30天,同时进行高脂饲料喂养,建立PCOS大鼠模型。PCOS模型构建成功后,将大鼠随机分为模型组（PCOS组）15只和NMN干预组（实验组）15只。N
[目的]胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,严重威胁人类的生命和健康。课题组前期利用同位素标记定量蛋白质组学技术,筛选与鉴定出胃粘膜癌变相关的血清蛋白质—亮氨酸氨基肽酶3（leucine aminopeptidase 3,LAP3）。本研究旨在证实LAP3蛋白在胃癌组织及血清中的表达的临床意义,并探究其表达调控机制。[方法]1.采用生物信息学方法,分析TCGA数据库中LAP3蛋白在胃腺癌组织和正常胃粘
胃癌是全球最为常见的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率在我国所有恶性肿瘤中均居前列。课题组前期通过免疫组化等实验研究发现ANXA1、S100A9和Vimentin三种蛋白的表达水平可能与胃癌的发生发展、浸润转移等恶性生物学行为相关,并通过统计学等级相关检验分析发现这三种蛋白的表达水平具有一定的相关性。本研究旨在初步探讨ANXA1对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其分子机制,为胃癌远处转移的分子机制提供
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