目的：使用小猪肌腱细胞在低氧环境下构建组织工程化肌腱。比较低氧环境与常规氧环境下构建的组织工程化肌腱在大体观、组织学、偏光显微镜、生物力学等方面的异同,探讨低氧环境对组织工程化肌腱的影响,为后续研究做出初步探索。方法：取小猪趾深屈肌肌腱组织,经胶原酶消化获取小猪肌腱细胞,将肌腱细胞分别置放于常规氧培养箱(21%02)和低氧培养箱(5%02)里培养。细胞扩增至第二代时接种于PGA材料上,与PGA混合培养形成细胞-生物材料复合物,进行实验分组,给予U形弹簧给细胞-PGA复合物施加静态张力后低氧(5%02)培养(n=3)为实验组;而施加静态张力后常规氧(21%02)浓度培养(n=3)作为对照组;每2天换液1次。使用相差显微镜观察两组的第一代和第二代肌腱细胞形态学的差异。两组肌腱细胞接种于PGA上培养48小时及7天时对两组细胞材料复合物进行相差显微镜观察,观察细胞在支架材料上的黏附能力是否良好。两组肌腱细胞接种在PGA上培养第2、8周时取材进行大体观察形态学差异。两组肌腱细胞接种于PGA上培养第2、4、6,8、14周时取材进行组织学观察和偏光显微镜观察,观察PGA材料降解和胶原排列情况。两组肌腱材料复合物分别在第6W,8W,12W,14W时进行新生组织生物力学检测,并应用SPSS11.5软件包进行统计学分析。将数据采用T检验对实验结果进行统计学处理,以P<0.05为差异有统计学意义,P<0.01为差异有显著统计学意义。通过对两组差异的比较,进行低氧环境下静态构建组织工程化肌腱初步研究。结果：使用相差显微镜观察发现,常规氧环境下的第一代和第二代肌腱细胞与低氧环境下培养的第一代和第二代肌腱细胞形态上没有明显区别。肌腱细胞接种于PGA上48小时及7天时,使用相差显微镜发现两组肌腱细胞在支架材料上黏附能力较好。两组肌腱细胞接种在PGA上培养第2、8周时取材进行大体观察,发现第2周时对照组与实验组在外型上未见明显差别。第8周时对照组在外形上表现为条索状新生组织明显收缩；实验组呈条索状新生组织,明显变细,外形上与正常肌腱比较接近。两组肌腱细胞接种于PGA上培养第2、4、6,8、14周时取材进行组织学观察和偏光显微镜观察,发现第2周时对照组与实验组细胞材料复合物中可见大量未降解的PGA。第4周时对照组与实验组细胞材料复合物中仍然可见到大量未降解的PGA,且PGA纤维之间有少量胶原纤维形成。第6周时,HE染色显示对照组的细胞排列比实验组杂乱,两组的细胞-材料复合物中仍存在较多断裂的尚未降解的PGA,且PGA纤维之间有胶原形成。第8周时,对照组的HE染色均显示胶原纤维束和细胞排列较实验组杂乱,残留PGA也较实验组多。实验组与对照组通过偏光显微镜观察可见标本中胶原纤维束和肌腱细胞沿纵轴受力方向排列整齐有序,组织边缘处PGA基本降解,接近中央处尚有未降解的PGA,基本形成了肌腱样组织。第14周时,各组PGA基本降解,对照组的HE染色显示细胞和胶原排列的依然紊乱,胶原含量不多,出现中空现象。实验组肌腱细胞和胶原排列稍整齐,无明显的中空现象。对两组新生的肌腱的生物力学数据进行统计学处理,T检验显示6周时实验组抗张强度强于对照组,其差异具有显著意义,p<0.05,8周及以后的时间点实验组和对照组无显著差异,p>0.05。结论：在低氧环境下的细胞具有不同的存活能力、增殖能力和分化倾向能力。低氧环境下体外构建组织工程化肌腱,可以通过加速PGA降解从而促进组织工程化肌腱的形成。通过初步模拟低氧环境下构建组织工程化肌腱的实验,从细胞学,大体形态学,组织学,偏光显微镜观察,生物力学性能等方面的检测,证明了在低氧换环境下静态构建组织工程化肌腱的可行性。