【摘 要】
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目的:初步探索高迁移率族蛋白A1（High Mobility Group Protein A1,HMGA1）通过调控LINC01361在人乳腺癌细胞株有氧糖酵解中的作用。方法:实验以乳腺癌MCF7和MDA-MB-231细胞为研究对象,通过葡萄糖和乳酸检测试剂盒、荧光定量PCR（q RT-PCR）和Western Blot（WB）实验探究HMGA1低表达对乳腺癌MCF7和MDA-MB-231细胞葡萄
【基金项目】
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湖南省杰出青年科学基金项目（2019JJ20014）,HMGA1调控乳腺癌细胞能量代谢的机制研究；
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目的:初步探索高迁移率族蛋白A1（High Mobility Group Protein A1,HMGA1）通过调控LINC01361在人乳腺癌细胞株有氧糖酵解中的作用。方法:实验以乳腺癌MCF7和MDA-MB-231细胞为研究对象,通过葡萄糖和乳酸检测试剂盒、荧光定量PCR（q RT-PCR）和Western Blot（WB）实验探究HMGA1低表达对乳腺癌MCF7和MDA-MB-231细胞葡萄糖消耗、乳酸生成以及糖酵解因子m RNA水平和蛋白表达的影响;通过染色质免疫沉淀测序（CHIP-sequence）探索HMGA1调控乳腺癌MCF7和MDA-MB-231细胞有氧糖酵解的下游候选因子,并在三个乳腺癌细胞系（SK-BR-3、MCF7和MDA-MB-231）分别高表达和低表达HMGA1,通过q RT-PCR验证HMGA1与下游候选因子的调控关系;敲低LINC01361检测乳腺癌MDA-MB-231细胞葡萄糖消耗、乳酸产量、糖酵解因子m RNA水平和蛋白水平变化以及迁移能力;在乳腺癌MDA-MB-231细胞中高表达HMGA1后敲低LINC01361检测细胞迁移能力、葡萄糖消耗、乳酸产量以及糖酵解因子的蛋白表达水平。结果:1.HMGA1低表达抑制乳腺癌MCF7和MDA-MB-231细胞的葡萄糖消耗、乳酸产生以及糖酵解因子的m RNA和蛋白水平。2.CHIP-sequence结果显示HMGA1在MCF7细胞和MDA-MB-231细胞中共同调控的下游因子有13个。q RT-PCR验证结果显示HMGA1正向调控LINC01361。3.LINC01361低表达抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的葡萄糖消耗、乳酸产生以及糖酵解因子的m RNA水平和蛋白表达。4.LINC01361低表达抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的迁移。5.回复实验证明LINC01361低表达可逆转HMGA1高表达引起的葡萄糖消耗、乳酸产生的增高以及糖酵解因子的上调。6.LINC01361低表达可逆转HMGA1高表达引起的促迁移作用。结论:1.HMGA1低表达可以抑制乳腺癌细胞的有氧糖酵解过程。2.LINC01361低表达能抑制乳腺癌细胞的迁移和有氧糖酵解过程。3.HMGA1通过LINC01361促进乳腺癌细胞的迁移和有氧糖酵解过程。
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