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[目 的]探讨新西兰大白兔自体跟腱重建前交叉韧带（Anterior cruciate ligament,ACL）股骨隧道不同长度对腱骨愈合的影响,分析其愈合机制,为其临床应用提供实验依据。[方 法]1.制备24只28周龄骨骼成熟雄性新西兰大白兔ACL重建模型,按三种不同的股骨隧道长度分为三组,A组股骨隧道长度为0mm（n=8）、B组股骨隧道长度为2.5mm（n=8）、C组股骨隧道长度为5mm（n=8）,取双下肢自体跟腱为移植物。分别在6周、12周时各组处死4只,行大体观察。2.分别取6周、12周各组3只兔膝关节标本行组织学染色（HE染色、番红0染色）和免疫组化染色（Ⅱ型胶原和Ⅲ型胶原）。行组织学评分和Mankin评分。3.12周各组3只兔膝关节行微计算机断层扫描技术（micro computed tomography,Micro-CT）检查评估骨隧道大小和骨密度改变,Micro-CT三维重建观察有无新骨生成。4.分别取6周、12周各组5只兔膝关节行生物力学检查。[结 果]1.24只兔手术均成功,术后无感染及死亡。经大体观察,ACL未见明显松弛,完整性良好。2.6周,A组HE染色显示:可见软骨母细胞,排列规则。B组和C组HE染色显示:可见成骨细胞,排列规则,新生骨小梁填充了移植物上方和侧方部分间隙。A组免疫组化染色结果显示:ACL股骨止点处可见纤维软骨。B组和C组免疫组化染色结果显示:可见Sharpey纤维,Sharpey纤维连接肌腱和新生骨小梁,排列不规则。6周,三组移植物肌腱的完整性良好,A组的纤维软骨融合大于B组和C组,A组无明显肌腱重构,B组与C组肌腱重构比较无明显差异。A组组织学评分:A组（3.33±0.57）、B组（4.33±0.57）、C组（4.33±0.57）,组间对比无统计学差异（P＞0.05）。12周,A组HE染色显示:可见更多软骨母细胞,排列规则。B组和C组HE染色显示:可见更多的成骨细胞,新生的骨小梁填充了部分肌腱。A组免疫组化染色结果显示:可见更多的纤维软骨生成,排列规则。B组和C免疫组化染色结果显示:可见更多Sharpey纤维生成,Sharpey纤维紧密的连接肌腱和新生的骨小梁,并向肌腱方向长入,部分肌腱组织被新生的骨小梁填充。12周,三组移植物肌腱的完整性良好,A组的纤维软骨融合大于B组和C组,A组无明显肌腱重构,B组与C组肌腱重构比较无明显差异。组织学评分:A组（3.33±0.57）、B组（4.33±0.57）、C组（4.33±0.57）,组间对比无统计学差异（P＞0.05）。番红0染色显示:A组可见软骨细胞和纤维软骨,B组和C组在骨隧道中只观察到极少量的纤维软骨。6周,A组番红0染色显示:软骨表面不规则和出现了血管翳,可见部分增生组织,细胞局部增多,基质染色轻度减少,潮线完整。B组和C组番红0染色显示:软骨表面结构正常,细胞弥漫性增多,基质染色正常,潮线完整。6周骨性关节炎Mankin评分:A组（3.33±0.57）、B组（2.00±0.00）、C组（2.00±0.00）,组间对比无统计学差异（P＞0.05）。12周,A组番红0染色显示:软骨表面结构正常,细胞弥漫性增多,基质染色正常,潮线完整。B组番红0染色显示:软骨表面结构正常,细胞局部增多,基质染色轻度减少,潮线完整。C组番红0染色显示:软骨表面结构基本正常,细胞局部增多,基质染色正常,潮线完整。骨性关节炎Mankin评分:A组（2.00±0.00）、B组（1.33 ± 0.577）、C组（1.33±0.577）,组间对比无统计学差异（P＞0.05）。3.12周时,Micro-CT扫描显示,在冠状位上,C组在隧道最大直径处（3.987±0.0384mm）的增宽大于B组（3.527±0.1937mm）,两组间对比无统计学差异（P＞0.05）。在矢状位上,与B组最大直径处（3.607±0.026mm）和孔径处（3.430±0.0472mm）相比,C组在隧道最大直径处（3.737±0.052mm）和孔径处（3.620±0.0692mm）的隧道加宽更大,但两组间对比无统计学计差异（P＞0.05）。12周Micro-CT三维重建横截面,可见A组ACL止点处可见新生骨,B组和C组ACL止点处和骨隧道壁上可见新生骨。12周时,B组骨隧道内CT值为516±6.38HU,C组骨隧道内CT值为525.2±3.545HU,两组间骨密度比较无统计学差异（P＞0.05）。4.6 周时,最大载荷分别为:A 组（14.10±0.244N）、B 组（15.00±0.636N）、C组（15.34±0.716N）,组间对比无统计学差异（P＞0.05）。12周时,最大载荷分别为:A 组（15.02±1.14N）、B 组（16.80±0.836N）和 C 组（16.80±1.30N）,组间对比无统计学差异（P＞0.05）。[结 论]1.ACL股骨隧道不同长度对腱-骨愈合的生物力学影响无明显差异。2.腱-骨表面愈合机制主要是直接愈合,腱-骨隧道的愈合主机制要为间接愈合。