基于细胞与细胞外基质形态结构特征探讨离心运动性骨骼肌过度使用损伤发生机制

来源 :曲阜师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhanchuangye
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1目的:骨骼肌过度使用性损伤是常见的工作或运动性慢性骨骼-肌肉系统损伤,严重妨碍了患者的日常生活或运动员的训练比赛,因而探讨其发生机制,对于预防和治疗骨骼肌过度使用性损伤具有重要的意义。本文通过建立过度离心训练引起的骨骼肌过度使用性损伤动物模型,监控不同时相细胞及细胞外基质形态结构变化,旨在探讨骨骼肌过度使用性损伤发生过程及机制。2方法:选取72只6-8周龄的健康雄性wistar大鼠,随机分成3组,即安静组(C,n=24)、连续运动组(E,n=24)、间歇运动组(I,n=24)。大鼠适应性训练一周后,正式进行4周动物跑台离心训练(第1周:-16°、16m/min、60min;第2周:-16°、20m/min、60min;第3、4周:-16°、20m/min、90min),连续运动组每周连续训练,共5次;间歇运动组每周隔天训练,共3次。每周末次训练36h后,分别取大鼠同侧股中肌,用于免疫组织化学测试,分别观察不同时相Ⅰ型、Ⅲ型和Ⅳ型胶原纤维浓度变化,以及细胞、细胞外基质形态结构变化特征。在第4周末次训练36h后,取大鼠同侧股中肌,分为两段,一段进行透射电子显微镜测试,观察骨骼肌超微结构变化;另一段用于扫描电子显微镜测试,观察骨骼肌胶原纤维结构变化。3结果:3.1骨骼肌细胞形态结构:(1)与C组相比,E组1-4周肌细胞横截面积均值均增加。组内比较时,2E组肌细胞横截面积均值最大,1E组肌细胞横截面积均值最小。(2)I组1-4周肌细胞横截面积均值大于C组。组内比较时,4I组肌细胞横截面积均值最大,2I组肌细胞横截面积均值最小。(3)E组与I组组间比较,4E与4I组肌细胞横截面积分布相似。3.2Ⅳ型胶原纤维浓度与基底膜厚度:(1)E组不同时相Ⅳ型胶原纤维浓度均显著高于C组(P﹤0.001),但组内呈2E最低、3E最高的规律,均与其他三组呈极显著性差异(P﹤0.001);E组基底膜厚度在第2、3周下调且小于C组,第4周增加,组内各时相没有统计学意义。(2)I组Ⅳ型胶原纤维浓度在前三周下调,4I增加,其中1I、2I、4I组显著高于C组(P﹤0.001),组内3I最低,与其他组呈极显著性差异(P﹤0.001);与C组相比,I组基底膜厚度在3I(P﹤0.01)、4I(P﹤0.05)显著增加,组内3I最高与1I呈显著变化(P﹤0.001)。(3)Ⅳ型胶原纤维浓度组间比较时,2E显著小于2I(P﹤0.01),3E显著高于3I(P﹤0.001),4E与4I没有统计学意义;基底膜厚度组间比较时2E、3E分别小于2I(P﹤0.05)、3I(P﹤0.001),4E与4I没有统计学意义。3.3Ⅲ型胶原纤维浓度与肌内膜厚度:(1)E组中,1E、3E和4E组Ⅲ型胶原纤维浓度显著大于C组(P﹤0.001),2E组显著低于C组(P﹤0.05),组内2E最低,与其他三组呈极显著性差异(P﹤0.001),3E最高,分别与1E(P﹤0.01)、2E(P﹤0.001)呈显著变化;E组不同时相肌内膜厚度均大于C组,在第1、2、4周与C组呈极显著性差异(P﹤0.001),3E与C组呈显著性差异(P﹤0.05),组内比较时,3E最低,与1E(P﹤0.01)、4E(P﹤0.001)有显著差异。(2)I组中,1I和4I组Ⅲ型胶原纤维浓度显著大于C组(P﹤0.001),组内前三周Ⅲ型胶原浓度逐周下降,3I最低,显著低于1I(P﹤0.001)、2I(P﹤0.05)、4I(P﹤0.001);与C组相比,1I(P﹤0.01)、2I(P﹤0.01)、3I(P﹤0.001)、4I(P﹤0.05)肌内膜厚度均显著增加,但组内没有显著性差异。(3)Ⅲ型胶原纤维浓度组间比较时,2E显著低于2I(P﹤0.01),3E极显著高于3I(P﹤0.001),4E与4I没有统计学意义;对肌内膜厚度进行组间比较,4E极显著大于4I(P﹤0.001)。3.4Ⅰ型胶原纤维浓度与肌束膜厚度:(1)E组中,1E-4EⅠ型胶原浓度均高于C组,其中1E、3E、4E具有极显著性差异(P﹤0.001),组内2E最低,与其他三组具有极显著性差异(P﹤0.001);与C组相比,1E(P﹤0.01)、2E(P﹤0.05)、3E(P﹤0.001)、4E(P﹤0.001)肌束膜厚度均显著增加,组内4E最高,与1E(P﹤0.001)、2E(P﹤0.001)、3E(P﹤0.05)有显著差异。(2)I组中,1I-4I组Ⅰ型胶原纤维浓度与C组相比均增加,1I、2I与C组相比有极显著性差异(P﹤0.001),组内没有显著性差异;I组肌束膜厚度较C组增加,1I(P﹤0.001)、2I(P﹤0.01)、4I(P﹤0.05)与C组相比有显著差异,组内没有显著性差异。(3)Ⅰ型胶原纤维浓度组间比较时,2E与2I有非常显著性差异(P﹤0.01),3E、4E与3I、4I分别呈极显著性差异(P﹤0.001);对肌束膜厚度进行组间比较,3E与3I具有非常显著性差异(P﹤0.01),4E与4I具有极显著性差异(P﹤0.001)。4结论:4.1 4周连续过度离心训练引起细胞外基质结构持续重塑,用于维持细胞形态,但细胞外基质重塑不能匹配细胞形态变化,造成Ⅰ型胶原纤维浓度、肌束膜厚度过度增加,过度使用损伤症状发生。4.2 4周间歇离心训练引起细胞外基质结构持续重塑,用于维持细胞形态,细胞外基质重塑能匹配细胞形态变化,没有造成Ⅰ型胶原纤维浓度、肌束膜厚度过度增加,产生良性适应。
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