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1目的:骨骼肌过度使用性损伤是常见的工作或运动性慢性骨骼-肌肉系统损伤,严重妨碍了患者的日常生活或运动员的训练比赛,因而探讨其发生机制,对于预防和治疗骨骼肌过度使用性损伤具有重要的意义。本文通过建立过度离心训练引起的骨骼肌过度使用性损伤动物模型,监控不同时相细胞及细胞外基质形态结构变化,旨在探讨骨骼肌过度使用性损伤发生过程及机制。2方法:选取72只6-8周龄的健康雄性wistar大鼠,随机分成3组,即安静组(C,n=24)、连续运动组(E,n=24)、间歇运动组(I,n=24)。大鼠适应性训练一周后,正式进行4周动物跑台离心训练(第1周:-16°、16m/min、60min;第2周:-16°、20m/min、60min;第3、4周:-16°、20m/min、90min),连续运动组每周连续训练,共5次;间歇运动组每周隔天训练,共3次。每周末次训练36h后,分别取大鼠同侧股中肌,用于免疫组织化学测试,分别观察不同时相Ⅰ型、Ⅲ型和Ⅳ型胶原纤维浓度变化,以及细胞、细胞外基质形态结构变化特征。在第4周末次训练36h后,取大鼠同侧股中肌,分为两段,一段进行透射电子显微镜测试,观察骨骼肌超微结构变化;另一段用于扫描电子显微镜测试,观察骨骼肌胶原纤维结构变化。3结果:3.1骨骼肌细胞形态结构:(1)与C组相比,E组1-4周肌细胞横截面积均值均增加。组内比较时,2E组肌细胞横截面积均值最大,1E组肌细胞横截面积均值最小。(2)I组1-4周肌细胞横截面积均值大于C组。组内比较时,4I组肌细胞横截面积均值最大,2I组肌细胞横截面积均值最小。(3)E组与I组组间比较,4E与4I组肌细胞横截面积分布相似。3.2Ⅳ型胶原纤维浓度与基底膜厚度:(1)E组不同时相Ⅳ型胶原纤维浓度均显著高于C组(P﹤0.001),但组内呈2E最低、3E最高的规律,均与其他三组呈极显著性差异(P﹤0.001);E组基底膜厚度在第2、3周下调且小于C组,第4周增加,组内各时相没有统计学意义。(2)I组Ⅳ型胶原纤维浓度在前三周下调,4I增加,其中1I、2I、4I组显著高于C组(P﹤0.001),组内3I最低,与其他组呈极显著性差异(P﹤0.001);与C组相比,I组基底膜厚度在3I(P﹤0.01)、4I(P﹤0.05)显著增加,组内3I最高与1I呈显著变化(P﹤0.001)。(3)Ⅳ型胶原纤维浓度组间比较时,2E显著小于2I(P﹤0.01),3E显著高于3I(P﹤0.001),4E与4I没有统计学意义;基底膜厚度组间比较时2E、3E分别小于2I(P﹤0.05)、3I(P﹤0.001),4E与4I没有统计学意义。3.3Ⅲ型胶原纤维浓度与肌内膜厚度:(1)E组中,1E、3E和4E组Ⅲ型胶原纤维浓度显著大于C组(P﹤0.001),2E组显著低于C组(P﹤0.05),组内2E最低,与其他三组呈极显著性差异(P﹤0.001),3E最高,分别与1E(P﹤0.01)、2E(P﹤0.001)呈显著变化;E组不同时相肌内膜厚度均大于C组,在第1、2、4周与C组呈极显著性差异(P﹤0.001),3E与C组呈显著性差异(P﹤0.05),组内比较时,3E最低,与1E(P﹤0.01)、4E(P﹤0.001)有显著差异。(2)I组中,1I和4I组Ⅲ型胶原纤维浓度显著大于C组(P﹤0.001),组内前三周Ⅲ型胶原浓度逐周下降,3I最低,显著低于1I(P﹤0.001)、2I(P﹤0.05)、4I(P﹤0.001);与C组相比,1I(P﹤0.01)、2I(P﹤0.01)、3I(P﹤0.001)、4I(P﹤0.05)肌内膜厚度均显著增加,但组内没有显著性差异。(3)Ⅲ型胶原纤维浓度组间比较时,2E显著低于2I(P﹤0.01),3E极显著高于3I(P﹤0.001),4E与4I没有统计学意义;对肌内膜厚度进行组间比较,4E极显著大于4I(P﹤0.001)。3.4Ⅰ型胶原纤维浓度与肌束膜厚度:(1)E组中,1E-4EⅠ型胶原浓度均高于C组,其中1E、3E、4E具有极显著性差异(P﹤0.001),组内2E最低,与其他三组具有极显著性差异(P﹤0.001);与C组相比,1E(P﹤0.01)、2E(P﹤0.05)、3E(P﹤0.001)、4E(P﹤0.001)肌束膜厚度均显著增加,组内4E最高,与1E(P﹤0.001)、2E(P﹤0.001)、3E(P﹤0.05)有显著差异。(2)I组中,1I-4I组Ⅰ型胶原纤维浓度与C组相比均增加,1I、2I与C组相比有极显著性差异(P﹤0.001),组内没有显著性差异;I组肌束膜厚度较C组增加,1I(P﹤0.001)、2I(P﹤0.01)、4I(P﹤0.05)与C组相比有显著差异,组内没有显著性差异。(3)Ⅰ型胶原纤维浓度组间比较时,2E与2I有非常显著性差异(P﹤0.01),3E、4E与3I、4I分别呈极显著性差异(P﹤0.001);对肌束膜厚度进行组间比较,3E与3I具有非常显著性差异(P﹤0.01),4E与4I具有极显著性差异(P﹤0.001)。4结论:4.1 4周连续过度离心训练引起细胞外基质结构持续重塑,用于维持细胞形态,但细胞外基质重塑不能匹配细胞形态变化,造成Ⅰ型胶原纤维浓度、肌束膜厚度过度增加,过度使用损伤症状发生。4.2 4周间歇离心训练引起细胞外基质结构持续重塑,用于维持细胞形态,细胞外基质重塑能匹配细胞形态变化,没有造成Ⅰ型胶原纤维浓度、肌束膜厚度过度增加,产生良性适应。