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目的:钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)是钙调节通路以及其参与创伤性颅脑损伤(Traumatic brain injury,TBI)的关键蛋白,但是其与TBI后神经元凋亡的关系还未完全阐明。因此本研究将通过建立TBI模型,测定CaSR及凋亡通路中关键分子表达并分析其相关性,进一步探讨CaSR表达与神经元凋亡的关系,为治疗TBI后神经元凋亡提供新的思路及靶点。方法:雄性SD大鼠分为空白对照组、假手术组、TBI组、TBI+NS组、TBI+NPS2143组(CaSR特异性阻滞剂)、TBI+NPSR568组(CaSR激动剂);使用HE染色方法来鉴定TBI模型是否建立成功;采用改良的神经行为学评分对各组大鼠进行神经行为学评分;采用EB染色检测各组大鼠的血脑屏障的通透性;采用干湿重法检测以上各组大鼠的脑水肿程度;采用RT-PCR、Western blot检测各组大鼠凋亡神经元中CaSR及细胞凋亡通路关键分子的表达。结果:1.造模成功后肉眼观察显示,空白对照组脑组织形态及结构完整,而TBI组可见大量新鲜出血,有明显的脑组织挫裂伤。建模后HE染色显示,空白对照组可见脑组织结构完整,细胞排列整齐;TBI组可见脑组织稀疏,蛛网膜下腔出血,炎性细胞浸润,细胞周围空泡明显,核固缩、深染;TBI+NPS2143组脑组织可见脑组织稀疏,蛛网膜下腔出血,炎性细胞浸润,细胞周围空泡明显,核固缩、深染,但较TBI组上述现象改善。2.神经行为学评分显示:TBI组、TBI+NS组大鼠神经行为学评分高于空白对照组及假手术组,TBI+NPSR568(CaSR激动剂)组大鼠神经行为学评分高于TBI组,而TBI+NPS2143(CaSR阻断剂)组大鼠神经行为学评分低于TBI组;3.与空白对照组相比,假手术组大鼠血脑屏障通透性无明显变化,TBI组、TBI+NS、TBI+NPS2143组、TBI+NPSR568组大鼠血脑屏障通透性均有不同程度的增加;4.TBI组、TBI+NS组大鼠脑组织含水量高于空白对照组及假手术组,TBI+NPSR568(激动剂)组大鼠脑组织含水量高于TBI组,而TBI+NPS2143(抑制剂)组大鼠脑组织含水量低于TBI组;5.采用RTPCR及Western blotting的方法检测CaSR、Caspase-3基因及蛋白表达水平。结果显示:TBI组和TBI+NS组模型组中CaSR、Caspase-3表达水平较空白对照组升高,差异具有统计学意义;TBI+NPS2143模型组中CaSR、Caspase-3较TBI组表达下降,差异具有统计学意义;TBI+NPSR568模型组中CaSR、Caspase-3较TBI组表达增加,差异具有统计学意义。6.采用RT-PCR及Western blotting的方法检测内质网应激通路相关蛋白Caspase-12的基因及蛋白表达水平。结果显示:TBI模型组中Caspase-12的表达较空白对照组升高,差异具有统计学意义;TBI+NPS2143模型组中Caspase-12较TBI组表达下降,差异具有统计学意义;TBI+NPSR568模型组中Caspase-12较TBI组表达增加,差异具有统计学意义。7.采用RT-PCR及Western blotting的方法检测死亡受体通路相关蛋白Caspase-8、Caspase-10基因及蛋白表达水平。结果显示:TBI模型组中死亡受体通路中的关键分子:Caspase-8、Caspase-10的表达较空白对照组升高,均具有统计学意义;TBI+NPS2143模型组中死亡受体通路中的关键分子:Caspase-8、Caspase-10较TBI组表达下降,均具有统计学意义;TBI+NPSR568模型组中死亡受体通路中的关键分子:Caspase-8、Caspase-10较TBI组表达增加均具有统计学意义。8.采用RT-PCR及Western blotting的方法检测线粒体通路Cyt C、Caspase-9、BCL-2基因及蛋白表达水平。结果显示:TBI模型组中线粒体通路中的关键分子:Cyt C、Caspase-9的表达较空白对照组升高,均具有统计学意义,而BCL-2较空白对照组降低,两组之间具有统计学意义;TBI+NPS2143模型组中线粒体通路中的关键分子:Cyt C、Caspase-9的表达较TBI组下降,均具有统计学意义,而BCL-2较TBI组升高,两组之间具有统计学意义;TBI+NPSR568模型组中线粒体通路中的关键分子:Cyt C、Caspase-9的表达较TBI组升高,均具有统计学意义,而BCL-2较TBI组下降,两组之间具有统计学意义。结论:CaSR通过三条Caspase相关凋亡通路(线粒体通路、死亡受体通路、内质网通路)调节创伤性脑损伤继发神经元凋亡。CaSR特异性阻滞剂NPS2143可减轻创伤性脑损伤程度。