【摘 要】
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目的 探讨α1抗胰蛋白酶(AAT)对脂多糖(LPS)诱导肺泡上皮细胞炎症因子分泌的影响及其机制.方法 选择具有肺泡上皮细胞特征的非小细胞肺癌细胞系A549为研究对象,将其分为对照
【机 构】
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广州市番禺区中心医院呼吸内科,广州,511400新疆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室,乌鲁木齐,830011;新疆医科大学附属中医医院心血管内科,乌鲁木齐,830000;
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目的 探讨α1抗胰蛋白酶(AAT)对脂多糖(LPS)诱导肺泡上皮细胞炎症因子分泌的影响及其机制.方法 选择具有肺泡上皮细胞特征的非小细胞肺癌细胞系A549为研究对象,将其分为对照组、AAT (0.5 mg/mL)组、LPS(10 μg/mL)组、AAT+ LPS组4组.分别加入AAT和LPS进行干预和诱导,细胞培养10h后收集并提取蛋白,采用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测核转录因子-κB(NF-κB)抑制蛋白IκBα和NF-κB p65的表达水平;培养18 h后分别收集细胞培养上清和细胞,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)和单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的含量,采用实时荧光定量PCR检测细胞中白细胞介素-1β(IL-1β)的mRNA表达水平.结果 与LPS组比较,AAT+ LPS组细胞培养上清中TNF-α、IL-8、MCP-1的含量明显降低,细胞中IL-1β mRNA的水平降低,组间比较差异有统计学意义(P ＜0.05);Western blot结果显示,与LPS组比较,AAT+ LPS组IκBα的磷酸化和细胞核内NF-κB p65的蛋白水平明显下降.结论 AAT能够有效地抑制LPS诱导肺泡上皮细胞炎症的因子的分泌,此过程可能是通过抑制NF-κB的激活和进入细胞核而发挥作用.
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