多粘芽孢杆菌(Bacillus polymyxa)β—葡萄糖苷酶基因在大肠杆菌中的表达、纯化及酶学性质分析

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从多粘芽孢杆菌(Bacillus polymyxa 1.794)中克隆得到β-葡萄糖苷酶基因6glA.将其构建在大肠杆菌(Escherichia coli)表达载体pET28a(+)上,转化E.coli BL21,获得重组工程菌BL1979.重组表达的β-葡萄糖苷酶的酶活力达到24.7 IU/mL,经镍柱纯化后的β-葡萄糖苷酶最适温度为37℃,最适pH值为7.0,该酶经纯化后纯度可达92.7%.用非变性梯度聚丙烯凝胶电泳发现该酶具有多种寡聚体形式,经荧光底物活性染色表明这些寡聚体均具有β-葡萄糖苷酶活性.
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