【摘 要】
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以猪血为原料,采用丙酮沉淀、硫酸铵分级盐溶盐析、透析及反渗透等方法使之部分纯化,并对其性质进行研究.结果 表明,硫酸铵分级盐溶盐析和透析相结合的方法纯化后的PTP1B酶活
【机 构】
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郑州工程技术学院 郑州450044;郑州轻工业学院 郑州450002;湖北中烟工业有限责任公司 武汉430000
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以猪血为原料,采用丙酮沉淀、硫酸铵分级盐溶盐析、透析及反渗透等方法使之部分纯化,并对其性质进行研究.结果 表明,硫酸铵分级盐溶盐析和透析相结合的方法纯化后的PTP1B酶活力明显提高,其中70％透析酶的比活力为434.5 U/mg,高于60％ (402.1 U/mg)和80％ (154.7 U/mg)时的比活力,是粗酶比活力的3.36倍,可作为试验用酶.纯化后的蛋白酪氨酸磷酸酶Km为4.25 mmol/L.在35～42℃温度范围内保持较高的活力,其最适温度为37℃;在pH 5.50～7.67范围内保持较高的活力,其最适pH为7.20.反应速度与酶量、底物浓度的关系均符合酶促反应动力学.
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