【摘 要】
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目的：应用基因工程手段获得重新设计的肺表面活性物质结合蛋白Ｃ（ＳＰＣ）的ｃＤＮＡ克隆。方法：根据发表的ＳＰＣ基因序列，重新设计适宜在大肠杆菌中表达的目的基因片段，该基因双链分８个小片段合成，经退火、
【机 构】
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第一军医大学附属珠江医院,第一军医大学免疫教研室
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目的：应用基因工程手段获得重新设计的肺表面活性物质结合蛋白Ｃ（ＳＰＣ）的ｃＤＮＡ克隆。方法：根据发表的ＳＰＣ基因序列，重新设计适宜在大肠杆菌中表达的目的基因片段，该基因双链分８个小片段合成，经退火、复性连接成目的片段后，克隆到经过ＥｃｏＲⅠ和ＨｉｎＤⅢ双酶切的质粒载体ｐＵＣ１１８中并转化大肠杆菌ＴＧ１，碱裂解法抽提重组子测序。结果：测序证明获得的基因序列与实验设计完全符合。结论：正确设计并合成了ＳＰＣ的ｃＤＮＡ，为进一步在大肠杆菌中表达奠定了基础。
OBJECTIVE: To obtain a redesigned cDNA clone of pulmonary surfactant binding protein C (SPC) by genetic engineering. METHODS: According to the published SPC gene sequence, the target gene fragment suitable for expression in E. coli was redesigned. The gene was double-stranded in 8 small fragments and annealed. After annealing and annealing, the target fragment was ligated into EcoRⅠ and HinDⅢ Double digested plasmid vector pUC118 and transformed into E. coli TG1, alkaline lysis extraction of recombinant sub-sequencing. Results: Sequencing proved that the obtained gene sequence was completely consistent with the experimental design. Conclusion: The correct design and synthesis of SPC cDNA laid the foundation for further expression in E. coli.
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