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摘要：目的：为断骨膏巴布剂选择最适合的促渗剂，发挥其最强的药效作用，为患者最大限度地缓解痛苦。方法：采用改良Franz直立式释放池[1]，以豚鼠皮肤代替人体皮肤做透皮吸收实验，计算用不同促渗剂后断骨膏巴布剂中主要药效成分（人参皂甙Rg1）的累积渗透量和透皮速率常数。结果：加促渗剂8（氮酮）、促渗剂1（1，2-丙二醇）、促渗剂3（乙醇）、促渗剂4（乙酸乙醋）、促渗剂6（异丙醇）的累积渗透量要优于没加促渗剂的。尤其是促渗剂8、1和3累积渗透量跟时间是呈线性关系的。结论：从试验的8种促渗剂来看，氮酮可以作为断骨膏巴布剂最理想的促渗剂。
关键词：断骨膏巴布剂；累积渗透量；透皮速率常数
经皮给药系统可以绕过肝脏的首过效应及胃肠道的破坏，维持稳定、持久的血药浓度，提供可预定的和较长的作用时间，降低药物毒性和副作用，提高疗效，减少给药次数，使用方便。TDD制剂对药物的理化性质有较严格的要求。事实上并非所有的药物都符合上述要求从而保证足够量药物进入体内。因此经皮吸收促进剂的研究成为TDD制剂研究中的主要内容[2]。
透皮吸收与中药的性能、气味、归经密切相关。中药外敷制剂多为复方，且多用辛辣芳香，气味浓烈的窜透性药物和活血化淤力强的药物促进透皮和疏通经络脏腑，所谓“假猛药、生药、香药率群药，开结行滞，直达病所”，是中药透皮内病外治的理论依据[3]。
巴布剂具有载药量大，透皮效果好，药量缓释可控，透气性好，无皮肤刺激和过敏反应等优点。很适合于中药透皮给药制剂的开发，包括中药新透皮制剂开发和黑膏药等外用老剂型的改进[4]。
本品（断骨膏）系由大黄、没药、乳香、五加皮、续断、自然铜等药物与基质配制而成的外用亲水性凝胶制剂。其主要功能与主治：散瘀活血、消肿止痛。用于骨折、骨裂、血阻不散等。
1实验原理
在测得的峰面积标准曲线上求出相应的药物浓度，按公式[5]计算累积渗透量（Q）。
Q=（Cn×18×10-3+?Ci×4）/A；Cn：第n个取样点测得的药物浓度g.l-1；Ci：第I个取样点测得的药物浓度g.l-1；A：渗透面积。
以累积渗透量Q对时间t进行线性回归所得方程即为Higuchi方程（Q=Jt+B）所得斜率J即为透皮速率常数。
2实验前准备
2.1试药与仪器
断骨膏巴布剂：上海医疗器械集团有限公司卫生材料厂生产，批号为1003；人参皂甙Rg1对照品：批号为0703-201118，购于中国药品生物制品检定所；乙睛：分析纯；磷酸：分析纯；水：重蒸馏水；1，2丙二醇：中国医药集团上海化学试剂公司；1，3丙二醇：同上；异丙醇：同上；乙酸乙酸：同上；乙醇：上海振兴化工一厂；正丁醇：宜兴市第二化学试剂厂；聚乙二醉：上海浦东高南化工厂；氮酮：上海凌峰化学试剂有限公司；豚鼠：购于中科院上海实验中心供销科。Waters高效液相色谱仪：Waters1525 Binary HPLC Pump；7725I进样阀：Waters 2487 Dual λAbsorbance Detector；Millennium32色谱工作站。透皮试验装置：自制Franz扩散池，该装置分为供应室和接受室上下两室，上室为供应室，下室为接受室，接受室连有一取样管，供取样、补充接受液和排除气泡用，扩散室和接受室直径为1.8cm2，整个装置置于37°C恒温水浴中，用磁力搅拌器搅拌。
2.2离体鼠皮的制备
取豚鼠（购于中科院上海实验中心供销社），腹部皮肤用电动剃须刀剃毛后用脱毛霜脱毛，用清水洗净皮肤表面，饲养24h后处死，取下无损伤皮肤，去掉皮下脂肪，用蒸馏水洗净，置生理盐水中于-20°C冷冻保存备用，实验前自燃解冻。
2.3人参皂甙Rg1分析方法的建立
色谱条件：色谱柱：intersil ODS-3（4.6×250mm，5μ）；流动相：乙晴：水：磷酸=21.5：77.5：0.04；检测波长：203nm；流速：1.0ml/min；柱温：室温；进样量=10μl。
对照品溶液的制备：精密称取人参皂甙Rg1对照品，加甲醇配制成每1ml含人参皂甙Rg1约0.4mg的溶液。
供试品溶液制备：透皮试验取样溶液经微孔滤膜过滤后滤液。
3实验步骤
豚鼠离体皮肤自冰箱中取出洗净剪成适宜大小（4cm×4cm大小）9块，固定于样品室，断骨膏巴布剂9小片，（4cm×4cm大小），分别于试验开始1、2、3、4、6、8、12、24、48h在接受室取样5ml，接受室中补加5ml37°C生理盐水。微孔滤膜过滤后滤液按前面样品的含量测定方法测定其中人参皂甙Rg1含量。从表1中可以看出促渗剂依次为：（1）1，2-丙二醇；（2）1，3-丙二醇；（3）乙醇；（4）乙酸乙酯；（5）正丁醇；（6）异丙醇；（7）聚乙二醇；（8）氮酮；（9）不加促渗剂。试验数据如下表：
表1：使用不同促渗剂在不同取样时间段时人参皂甙Rg1含量（%）
从表2和图2中可以看出加促渗剂8、促渗剂1、促渗剂3、促渗剂4、促渗剂6对断骨膏巴布剂有促渗作用。尤其是促渗剂8、促渗剂1、促渗剂3。而促渗剂2、促渗剂5、促渗剂7则正好相反，即这3种促渗剂对断骨膏巴布剂均呈抑制作用。从图2中可以看出不论哪个促渗剂其累积渗透量跟时间是呈线性关系的。从表3中可以看出累积渗透量与透皮速率常数是一一对应的，即累积渗透量大，透皮速率常数也大；反之亦然。
5讨论
经皮吸收促渗剂的应用是促进药物渗经皮肤进入体内的重要的药剂学方法，是TDD研究的重点之一[6]。氮酮、丙二醇是较常用的2种经皮促渗剂。其中丙二醇可单独作为促渗剂，亦可与其它促渗剂合用，以增强促渗效果，但其增强作用与药物的性质有关。氮酮是近年来国内外使用较多的促渗剂，一般认为其作用机理在于改善角质层的通透性[7]，有报道表明[8]，氮酮对水性药物促进作用比脂溶性药物更好。
本试验结果表明，当以氮酮作为促渗剂时，断骨膏巴布剂中药效成分的累积渗透量最多。所以我认为断骨膏巴布剂最合适的促渗剂是氮酮。
参考文献：
[l]吴宏霞，刘辉.促渗剂对噁丙嗪凝胶透皮作用的研究[J].医学导报2005.5（8）：244
[2]杨凌辉，杨卫民，朱时潮.中药透皮吸收制剂研究进展[J].中成药，1996，11（9）：19
[3]朱清梅，刘泳.透皮吸收实验实例分析[J].华西药学杂志.1999，14（5～6）：323～325
[4]《首届全国新型给药技术与中药现代化学术研讨会论文集》北京.清华.2002：310
[5]周莉玲，刘强，李锐.青藤碱PVA膜中经皮吸收促进剂的选择[J].中国实验方剂学杂志，1999，10（5）：5
[6]王鹏，王玉珠，沈建民.均匀设计及其在药学中的应用[J].沈阳药学院学报，1989，41（4）：297
[7]张奇，邓英杰，刘会勉.中药透皮吸收制剂青龙贴剂的处方筛及药物动力学[J].沈阳药科大学学报，1999，16（4）：254-258
[8]殷立新，李素民，刘宝库，等.月桂氮酮对药物促透皮吸收作研究概况[J].中国医院药学杂志，1998，18（2）：80-81
关键词：断骨膏巴布剂；累积渗透量；透皮速率常数
经皮给药系统可以绕过肝脏的首过效应及胃肠道的破坏，维持稳定、持久的血药浓度，提供可预定的和较长的作用时间，降低药物毒性和副作用，提高疗效，减少给药次数，使用方便。TDD制剂对药物的理化性质有较严格的要求。事实上并非所有的药物都符合上述要求从而保证足够量药物进入体内。因此经皮吸收促进剂的研究成为TDD制剂研究中的主要内容[2]。
透皮吸收与中药的性能、气味、归经密切相关。中药外敷制剂多为复方，且多用辛辣芳香，气味浓烈的窜透性药物和活血化淤力强的药物促进透皮和疏通经络脏腑，所谓“假猛药、生药、香药率群药，开结行滞，直达病所”，是中药透皮内病外治的理论依据[3]。
巴布剂具有载药量大，透皮效果好，药量缓释可控，透气性好，无皮肤刺激和过敏反应等优点。很适合于中药透皮给药制剂的开发，包括中药新透皮制剂开发和黑膏药等外用老剂型的改进[4]。
本品（断骨膏）系由大黄、没药、乳香、五加皮、续断、自然铜等药物与基质配制而成的外用亲水性凝胶制剂。其主要功能与主治：散瘀活血、消肿止痛。用于骨折、骨裂、血阻不散等。
1实验原理
在测得的峰面积标准曲线上求出相应的药物浓度，按公式[5]计算累积渗透量（Q）。
Q=（Cn×18×10-3+?Ci×4）/A；Cn：第n个取样点测得的药物浓度g.l-1；Ci：第I个取样点测得的药物浓度g.l-1；A：渗透面积。
以累积渗透量Q对时间t进行线性回归所得方程即为Higuchi方程（Q=Jt+B）所得斜率J即为透皮速率常数。
2实验前准备
2.1试药与仪器
断骨膏巴布剂：上海医疗器械集团有限公司卫生材料厂生产，批号为1003；人参皂甙Rg1对照品：批号为0703-201118，购于中国药品生物制品检定所；乙睛：分析纯；磷酸：分析纯；水：重蒸馏水；1，2丙二醇：中国医药集团上海化学试剂公司；1，3丙二醇：同上；异丙醇：同上；乙酸乙酸：同上；乙醇：上海振兴化工一厂；正丁醇：宜兴市第二化学试剂厂；聚乙二醉：上海浦东高南化工厂；氮酮：上海凌峰化学试剂有限公司；豚鼠：购于中科院上海实验中心供销科。Waters高效液相色谱仪：Waters1525 Binary HPLC Pump；7725I进样阀：Waters 2487 Dual λAbsorbance Detector；Millennium32色谱工作站。透皮试验装置：自制Franz扩散池，该装置分为供应室和接受室上下两室，上室为供应室，下室为接受室，接受室连有一取样管，供取样、补充接受液和排除气泡用，扩散室和接受室直径为1.8cm2，整个装置置于37°C恒温水浴中，用磁力搅拌器搅拌。
2.2离体鼠皮的制备
取豚鼠（购于中科院上海实验中心供销社），腹部皮肤用电动剃须刀剃毛后用脱毛霜脱毛，用清水洗净皮肤表面，饲养24h后处死，取下无损伤皮肤，去掉皮下脂肪，用蒸馏水洗净，置生理盐水中于-20°C冷冻保存备用，实验前自燃解冻。
2.3人参皂甙Rg1分析方法的建立
色谱条件：色谱柱：intersil ODS-3（4.6×250mm，5μ）；流动相：乙晴：水：磷酸=21.5：77.5：0.04；检测波长：203nm；流速：1.0ml/min；柱温：室温；进样量=10μl。
对照品溶液的制备：精密称取人参皂甙Rg1对照品，加甲醇配制成每1ml含人参皂甙Rg1约0.4mg的溶液。
供试品溶液制备：透皮试验取样溶液经微孔滤膜过滤后滤液。
3实验步骤
豚鼠离体皮肤自冰箱中取出洗净剪成适宜大小（4cm×4cm大小）9块，固定于样品室，断骨膏巴布剂9小片，（4cm×4cm大小），分别于试验开始1、2、3、4、6、8、12、24、48h在接受室取样5ml，接受室中补加5ml37°C生理盐水。微孔滤膜过滤后滤液按前面样品的含量测定方法测定其中人参皂甙Rg1含量。从表1中可以看出促渗剂依次为：（1）1，2-丙二醇；（2）1，3-丙二醇；（3）乙醇；（4）乙酸乙酯；（5）正丁醇；（6）异丙醇；（7）聚乙二醇；（8）氮酮；（9）不加促渗剂。试验数据如下表：
表1：使用不同促渗剂在不同取样时间段时人参皂甙Rg1含量（%）
从表2和图2中可以看出加促渗剂8、促渗剂1、促渗剂3、促渗剂4、促渗剂6对断骨膏巴布剂有促渗作用。尤其是促渗剂8、促渗剂1、促渗剂3。而促渗剂2、促渗剂5、促渗剂7则正好相反，即这3种促渗剂对断骨膏巴布剂均呈抑制作用。从图2中可以看出不论哪个促渗剂其累积渗透量跟时间是呈线性关系的。从表3中可以看出累积渗透量与透皮速率常数是一一对应的，即累积渗透量大，透皮速率常数也大；反之亦然。
5讨论
经皮吸收促渗剂的应用是促进药物渗经皮肤进入体内的重要的药剂学方法，是TDD研究的重点之一[6]。氮酮、丙二醇是较常用的2种经皮促渗剂。其中丙二醇可单独作为促渗剂，亦可与其它促渗剂合用，以增强促渗效果，但其增强作用与药物的性质有关。氮酮是近年来国内外使用较多的促渗剂，一般认为其作用机理在于改善角质层的通透性[7]，有报道表明[8]，氮酮对水性药物促进作用比脂溶性药物更好。
本试验结果表明，当以氮酮作为促渗剂时，断骨膏巴布剂中药效成分的累积渗透量最多。所以我认为断骨膏巴布剂最合适的促渗剂是氮酮。
参考文献：
[l]吴宏霞，刘辉.促渗剂对噁丙嗪凝胶透皮作用的研究[J].医学导报2005.5（8）：244
[2]杨凌辉，杨卫民，朱时潮.中药透皮吸收制剂研究进展[J].中成药，1996，11（9）：19
[3]朱清梅，刘泳.透皮吸收实验实例分析[J].华西药学杂志.1999，14（5～6）：323～325
[4]《首届全国新型给药技术与中药现代化学术研讨会论文集》北京.清华.2002：310
[5]周莉玲，刘强，李锐.青藤碱PVA膜中经皮吸收促进剂的选择[J].中国实验方剂学杂志，1999，10（5）：5
[6]王鹏，王玉珠，沈建民.均匀设计及其在药学中的应用[J].沈阳药学院学报，1989，41（4）：297
[7]张奇，邓英杰，刘会勉.中药透皮吸收制剂青龙贴剂的处方筛及药物动力学[J].沈阳药科大学学报，1999，16（4）：254-258
[8]殷立新，李素民，刘宝库，等.月桂氮酮对药物促透皮吸收作研究概况[J].中国医院药学杂志，1998，18（2）：80-81