论文部分内容阅读
[摘要] 目的 探讨VEGF在甲状腺肿瘤组织中的表达及其与肿瘤血管生成的关系。 方法 应用免疫组织化学Envision法检测140例甲状腺癌组织、50例甲状腺腺瘤及30例正常甲状腺组织中VEGF的表达，并检测肿瘤微血管计数（MVD），分析VEGF蛋白的表达与肿瘤血管生成的关系。 结果 甲状腺癌组织中VEGF阳性表达和MVD计数均明显高于正常甲状腺和甲状腺腺瘤组织（P<0.05）。在甲状腺癌组织中有颈部淋巴结转移、AJCC分期Ⅲ～Ⅳ及浸润达包膜或包膜外者的VEGF表达及MVD计数明显高于无颈部淋巴结转移、AJCC分期I～Ⅱ及未突破包膜者（P<0.05）。甲状腺癌组织中VEGF表达及MVD值之间呈显著正相关（r=0.564，P<0.05）。 结论 VEGF和MVD计数可作为辅助甲状腺肿瘤早期鉴别诊断和预测甲状腺癌浸润、转移和预后的参考指标。
[关键词] 甲状腺肿瘤；免疫组织化学；VEGF；肿瘤微血管计数
[中图分类号] R736.1 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2013）12-23-03
目前多数学者已认同，实体肿瘤的恶性增殖、浸润转移等恶性生物学行为均以血管内皮细胞增殖与新生血管形成为前提[1-2]。肿瘤血管生成过程有许多诱导和抑制细胞因子参与及平衡，其中血管内皮生长因子（vascular epithelial growth factor，VEGF）是目前已知针对内皮细胞特异性最高、促肿瘤血管构建作用最强的调节因子。肿瘤微血管密度（microvessel density，MVD）是反映肿瘤微血管形成的一个重要指标。目前大量研究表明，VEGF的过表达及MVD计数增多与膀胱癌、肠道癌、乳腺癌、前列腺癌、宫颈癌等多种恶性肿瘤密切相关[3-5]。本研究应用免疫组化方法检测甲状腺肿瘤组织中VEGF的表达情况，并检测MVD，旨在探讨它们与甲状腺癌增殖、浸润及转移能力的相关性及其意义。
1 资料与方法
1.1 一般资料
收集2005年8月16日～2010年9月15日在东莞石碣医院和暨南大学附属第一医院住院治疗的甲状腺肿瘤患者190例，均经术后病理组织活检诊断确诊，其中甲状腺乳头状癌45例，滤泡状癌45例，髓样癌25例，末分化癌25例，甲状腺腺瘤50例。另选择甲状腺腺瘤切除术旁正常甲状腺组织30例为对照。
1.2 方法
采用Elivsion两步法检测甲状腺肿瘤组织和正常甲状腺组织中VEGF蛋白的表达，Elivsion试剂盒、DAB显色试剂盒以及VEGF、CD34鼠抗人单克隆抗体均购自广州安必平医药科技有限公司。操作程序按说明书进行。结果判断：VEGF阳性表达在肿瘤细胞浆，呈褐色或淡褐色颗粒状（图
1.3 统计学处理
应用SPSS12.0版统计软件进行数据统计处理。计数资料采用x2检验，计量资料采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 甲状腺肿瘤组织和正常甲状腺组织中VEGF蛋白的表达及MVD计数的比较
甲状腺癌组织中VEGF阳性表达和MVD计数均明显高于正常甲状腺和甲状腺腺瘤组织（P<0.05），而后两者比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表1。
2.2 甲状腺癌组织中VEGF表达及MVD值和与临床病理特征的关系
VEGF及MVD计数在140例甲状腺癌组织中的表达均与是否有颈部淋巴结转移、浸润深度以及AJCC分期密切相关（P<0.05），而与年龄、性别、肿瘤的大小及分化程度无关（P>0.05），见表2。
2.3 甲状腺癌组织中VEGF表达及MVD值的相关性
甲状腺癌组织中VEGF表达及MVD值之间呈显著正相关（r=0.564，P<0.05）。
3 讨论
近年来，从分子生物学角度探讨甲状腺良、恶性肿瘤在形成和演变过程的分子机制，并从中寻找辅助诊断甲状腺癌和预测甲状腺癌转移潜力的分子标记物，已成为甲状腺肿瘤研究领域中的关注点。新生血管的发生是恶性肿瘤发生进展过程中的必要条件，其中有许多细胞因子参与了调节肿瘤新生血管的生成过程。VEGF是重要的促血管生成因子，也是最强力的血管生成诱发剂，存在肿瘤细胞细胞核或细胞浆中，能通过旁分泌功能作用，刺激血管内皮细胞增殖和迁移，并为肿瘤细胞的生长和血管形成过程提供最佳微环境，促进肿瘤新生血管生成[6-8]。肿瘤组织中新生血管系统分布是不均衡的，目前多数认为MVD是观察肿瘤微血管形成过程的最有效指标之一，特异性最高[9-10]。
本组研究结果发现甲状腺癌组织中VEGF阳性表达和MVD计数均明显高于正常甲状腺和甲状腺腺瘤组织（P<0.05），而后两者间比较，差异无统计学意义（P>0.05），证明VEGF表达上调及MVD计数增多在甲状腺癌发生早期阶段中扮演着重要的角色。随着肿瘤细胞持续恶性增殖，VEGF表达异常增高，新生血管形成随之增多，以维持肿瘤细胞进一步异常增殖[11-12]。提示VEGF表达检测和MVD计数可以作为早期鉴别诊断甲状腺癌的辅助参考指标。同时本研究结果进一步发现，在甲状腺癌组织中有颈部淋巴结转移、AJCC分期Ⅲ～Ⅳ及浸润达包膜或包膜外者的VEGF表达及MVD计数明显高于无颈部淋巴结转移、AJCC分期I～Ⅱ及未突破包膜者（P<0.05）。提示提示VEGF表达升高和MVD计数增多对甲状腺癌的生长、浸润和转移等恶性生物学行为有重要的促进作用，可作为肿瘤恶性浸润转移进展的的预测因子及判断预后的独立指标。
本研究分析了甲状腺癌组织中VEGF表达及MVD计数的相关性，结果显示VEGF表达及MVD值之间相互两两呈显著正相关（r=0.564，P<0.05）。提示VEGF与肿瘤血管形成均密切相关，VEGF起促进血管形成的作用，VEGF过表达对血管形成和肿瘤的发展提供了条件。相信随着研究的不断深入，VEGF表达及MVD计数将为靶向分子治疗甲状腺癌开辟新的思路。 [参考文献]
[1] 呼晓荣，史民权，董济民，等.血小板反应素-1在子宫颈癌组织中的表达及其与血管生成的关系[J].陕西医学杂志，2008，37（7）：812-813.
[2] Allegrinj G，Falcone A，Fioravanm TI A，et al.A pharmacokinetic and pharmacodynamic study on metronomic irinotecan in metastatic colorectal cancer patients[J].Br J Cancer，2008，98（8）：1312-1319.
[3] 于霄，赵俊军，王波，等.甲状腺乳头状癌组织中瘦素的表达与血管生成及转移的关系[J].中国癌症杂志，2011，21（4）：283-286.
[4] 王洗蕊，马德花，赵淑萍.p53和VEGF蛋白表达与子宫内膜癌的关系[J].现代生物医学进展，2008，8（10）：1900-1902.
[5] Oh JM，Ryoo IJ，Yang Y，et al.Hypoxia-inducible transcription factor（HIF）-1 alpha stabilization by actin-sequestering protein，thymosin beta-4（TIM）in Hela cervical tumor cells[J].Cancer Lett，2008，264（1）：29.
[6] 叶晓锋，高平，李金平.非小细胞肺癌中VEGF和MMP-2的表达及其与肿瘤侵袭转移关系的研究[J].宁夏医学杂志，2009，31（12）：1098-1100.
[7] Wang HR，Ma DH，Zhao SP. Relationship between Expression of p53 and VEGF and Endometrial Carclnoma[J].Progress in Modern Biomedcine，2008，8（10）：1900-1902.
[8] 邓志勇，李海，张阳.VEGF与Ki-67在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义[J].现代肿瘤医学，2011，19（7）：1325-1326.
[9] Linderholm BK，Hellborg H，Johansson U，et a1.Significantly higher levels of vasculm endothelial growth factor（VEGF）and shorter survival times for patients with primm-y operable triple-negative breast cancer[J].Ann Oncol，2009，20（10）：1639-1646.
[10] 席妍，王彦荣，冯立艳.非小细胞肺癌组织MMP-2表达及MVD的研究[J].中国实验诊断学，2010，14（12）：1960-1961.
[11] 王亚秋，华清泉.甲状腺乳头状癌中缺氧诱导因子-α和血管内皮生长因子及血管内皮生长因子-C表达的临床意义[J].临床耳鼻咽喉头颈外科杂志，2007，21（5）：204-208.
[12] 陈红耀，魏秀珍，郭明丽.HIF-1α、VEGF表达对甲状腺乳头状癌预后的影响[J].现代中西医结合杂志，2011，20（24）：2991-3039.
（收稿日期：2013-05-03）
[关键词] 甲状腺肿瘤；免疫组织化学；VEGF；肿瘤微血管计数
[中图分类号] R736.1 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2013）12-23-03
目前多数学者已认同，实体肿瘤的恶性增殖、浸润转移等恶性生物学行为均以血管内皮细胞增殖与新生血管形成为前提[1-2]。肿瘤血管生成过程有许多诱导和抑制细胞因子参与及平衡，其中血管内皮生长因子（vascular epithelial growth factor，VEGF）是目前已知针对内皮细胞特异性最高、促肿瘤血管构建作用最强的调节因子。肿瘤微血管密度（microvessel density，MVD）是反映肿瘤微血管形成的一个重要指标。目前大量研究表明，VEGF的过表达及MVD计数增多与膀胱癌、肠道癌、乳腺癌、前列腺癌、宫颈癌等多种恶性肿瘤密切相关[3-5]。本研究应用免疫组化方法检测甲状腺肿瘤组织中VEGF的表达情况，并检测MVD，旨在探讨它们与甲状腺癌增殖、浸润及转移能力的相关性及其意义。
1 资料与方法
1.1 一般资料
收集2005年8月16日～2010年9月15日在东莞石碣医院和暨南大学附属第一医院住院治疗的甲状腺肿瘤患者190例，均经术后病理组织活检诊断确诊，其中甲状腺乳头状癌45例，滤泡状癌45例，髓样癌25例，末分化癌25例，甲状腺腺瘤50例。另选择甲状腺腺瘤切除术旁正常甲状腺组织30例为对照。
1.2 方法
采用Elivsion两步法检测甲状腺肿瘤组织和正常甲状腺组织中VEGF蛋白的表达，Elivsion试剂盒、DAB显色试剂盒以及VEGF、CD34鼠抗人单克隆抗体均购自广州安必平医药科技有限公司。操作程序按说明书进行。结果判断：VEGF阳性表达在肿瘤细胞浆，呈褐色或淡褐色颗粒状（图
1.3 统计学处理
应用SPSS12.0版统计软件进行数据统计处理。计数资料采用x2检验，计量资料采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 甲状腺肿瘤组织和正常甲状腺组织中VEGF蛋白的表达及MVD计数的比较
甲状腺癌组织中VEGF阳性表达和MVD计数均明显高于正常甲状腺和甲状腺腺瘤组织（P<0.05），而后两者比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表1。
2.2 甲状腺癌组织中VEGF表达及MVD值和与临床病理特征的关系
VEGF及MVD计数在140例甲状腺癌组织中的表达均与是否有颈部淋巴结转移、浸润深度以及AJCC分期密切相关（P<0.05），而与年龄、性别、肿瘤的大小及分化程度无关（P>0.05），见表2。
2.3 甲状腺癌组织中VEGF表达及MVD值的相关性
甲状腺癌组织中VEGF表达及MVD值之间呈显著正相关（r=0.564，P<0.05）。
3 讨论
近年来，从分子生物学角度探讨甲状腺良、恶性肿瘤在形成和演变过程的分子机制，并从中寻找辅助诊断甲状腺癌和预测甲状腺癌转移潜力的分子标记物，已成为甲状腺肿瘤研究领域中的关注点。新生血管的发生是恶性肿瘤发生进展过程中的必要条件，其中有许多细胞因子参与了调节肿瘤新生血管的生成过程。VEGF是重要的促血管生成因子，也是最强力的血管生成诱发剂，存在肿瘤细胞细胞核或细胞浆中，能通过旁分泌功能作用，刺激血管内皮细胞增殖和迁移，并为肿瘤细胞的生长和血管形成过程提供最佳微环境，促进肿瘤新生血管生成[6-8]。肿瘤组织中新生血管系统分布是不均衡的，目前多数认为MVD是观察肿瘤微血管形成过程的最有效指标之一，特异性最高[9-10]。
本组研究结果发现甲状腺癌组织中VEGF阳性表达和MVD计数均明显高于正常甲状腺和甲状腺腺瘤组织（P<0.05），而后两者间比较，差异无统计学意义（P>0.05），证明VEGF表达上调及MVD计数增多在甲状腺癌发生早期阶段中扮演着重要的角色。随着肿瘤细胞持续恶性增殖，VEGF表达异常增高，新生血管形成随之增多，以维持肿瘤细胞进一步异常增殖[11-12]。提示VEGF表达检测和MVD计数可以作为早期鉴别诊断甲状腺癌的辅助参考指标。同时本研究结果进一步发现，在甲状腺癌组织中有颈部淋巴结转移、AJCC分期Ⅲ～Ⅳ及浸润达包膜或包膜外者的VEGF表达及MVD计数明显高于无颈部淋巴结转移、AJCC分期I～Ⅱ及未突破包膜者（P<0.05）。提示提示VEGF表达升高和MVD计数增多对甲状腺癌的生长、浸润和转移等恶性生物学行为有重要的促进作用，可作为肿瘤恶性浸润转移进展的的预测因子及判断预后的独立指标。
本研究分析了甲状腺癌组织中VEGF表达及MVD计数的相关性，结果显示VEGF表达及MVD值之间相互两两呈显著正相关（r=0.564，P<0.05）。提示VEGF与肿瘤血管形成均密切相关，VEGF起促进血管形成的作用，VEGF过表达对血管形成和肿瘤的发展提供了条件。相信随着研究的不断深入，VEGF表达及MVD计数将为靶向分子治疗甲状腺癌开辟新的思路。 [参考文献]
[1] 呼晓荣，史民权，董济民，等.血小板反应素-1在子宫颈癌组织中的表达及其与血管生成的关系[J].陕西医学杂志，2008，37（7）：812-813.
[2] Allegrinj G，Falcone A，Fioravanm TI A，et al.A pharmacokinetic and pharmacodynamic study on metronomic irinotecan in metastatic colorectal cancer patients[J].Br J Cancer，2008，98（8）：1312-1319.
[3] 于霄，赵俊军，王波，等.甲状腺乳头状癌组织中瘦素的表达与血管生成及转移的关系[J].中国癌症杂志，2011，21（4）：283-286.
[4] 王洗蕊，马德花，赵淑萍.p53和VEGF蛋白表达与子宫内膜癌的关系[J].现代生物医学进展，2008，8（10）：1900-1902.
[5] Oh JM，Ryoo IJ，Yang Y，et al.Hypoxia-inducible transcription factor（HIF）-1 alpha stabilization by actin-sequestering protein，thymosin beta-4（TIM）in Hela cervical tumor cells[J].Cancer Lett，2008，264（1）：29.
[6] 叶晓锋，高平，李金平.非小细胞肺癌中VEGF和MMP-2的表达及其与肿瘤侵袭转移关系的研究[J].宁夏医学杂志，2009，31（12）：1098-1100.
[7] Wang HR，Ma DH，Zhao SP. Relationship between Expression of p53 and VEGF and Endometrial Carclnoma[J].Progress in Modern Biomedcine，2008，8（10）：1900-1902.
[8] 邓志勇，李海，张阳.VEGF与Ki-67在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义[J].现代肿瘤医学，2011，19（7）：1325-1326.
[9] Linderholm BK，Hellborg H，Johansson U，et a1.Significantly higher levels of vasculm endothelial growth factor（VEGF）and shorter survival times for patients with primm-y operable triple-negative breast cancer[J].Ann Oncol，2009，20（10）：1639-1646.
[10] 席妍，王彦荣，冯立艳.非小细胞肺癌组织MMP-2表达及MVD的研究[J].中国实验诊断学，2010，14（12）：1960-1961.
[11] 王亚秋，华清泉.甲状腺乳头状癌中缺氧诱导因子-α和血管内皮生长因子及血管内皮生长因子-C表达的临床意义[J].临床耳鼻咽喉头颈外科杂志，2007，21（5）：204-208.
[12] 陈红耀，魏秀珍，郭明丽.HIF-1α、VEGF表达对甲状腺乳头状癌预后的影响[J].现代中西医结合杂志，2011，20（24）：2991-3039.
（收稿日期：2013-05-03）