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摘要：目的：建立适用性强，可操作性强及具有可靠性的总蒽醌测定方法。方法：样品经混合酸水解后采用乙醚提取，在碱性溶液中处理后用紫外分光光度法进行测定。结果：回收率为97.5%～100.1%，精密度RSD0.90%。结论：应用本方法检测5种含蒽醌的减肥类保健食品，方法操作简单可行，重现性好。
关键词：总蒽醌：减肥类保健食品；分光光度法
蒽醌类化合物在百合科的芦荟、豆科的决明子和番泻叶中有较高含量，各种蒽醌及其苷都具有多方面的生物活性，重要的是致泻和抗菌作用。许多保健食品如减肥茶、降脂胶囊和芦荟制品都含有蒽醌类物质，总蒽醌在减肥产品中的主要起泻下作用，但是蒽醌类化合物，也有一定的副作用，剂量过大会引起胃肠的各种不适。严重的可能会导致胃肠出血、呼吸困难、心悸，故而蒽醌类成分的保健食品的质量控制十分重要。其含量测定方法有重量法、荧光法、高效液相色谱法、超临界流体萃取法等。目前保健食品中总葸醌含量检测还没有国家标准方法，本文参照保健食品生产企业提供的方法并对其进行优化，制定出更为合理可控的检测方法。由于蒽醌苷元是一个极性大的物质，先将蒽醌用酸水解成极性较小游离蒽醌后，根据“相似相溶”原理，选择极性较小的溶剂或溶剂系统为提取剂。
1 试剂与仪器
1.1 试剂
1.8-二羟基蒽醌对照品，批号：10120222，纯度：98%，上海同田生物技术有限公司
乙醚、冰醋酸、盐酸、氢氧化钠、氨水，均为AR级
混合碱溶液：10% NaOH与4%氨水等量混合
混合酸溶液：25%盐酸2ml加冰醋酸18ml
1.2 实验仪器
电子分析天平型号：XP205，梅特勒一托利多仪器（上海）有限公司
紫外可见分光光度计型号：UV-2450，日本岛津
数显恒温水浴锅型号：HH-6，国华电器有限公司
2 实验方案
2.1 样品测定
精密称取样品lOOmg，置于lOOml圆底烧瓶中，加混合酸溶液6ml摇匀，在沸水浴中回流15min，放冷，加乙醚30ml提取，提取液通过脱脂棉滤入分液漏斗中，继续用乙醚洗涤残渣两次，每次5ml，药渣再加混合酸4ml，在沸水浴中回流15min，放冷，加乙醚20ml提取，用乙醚洗涤残渣两次，每次5ml，合并乙醚液。用30，20ml振摇洗涤两次，弃去水洗液。乙醚液用混合碱液50，20，20ml提取三次，合并碱提取液，置lOOml容量瓶中，加混合碱液定容，混匀。取约50ml置锥形瓶中，称重，置沸水浴中回流30min，冷却，称重，补加10%氨溶液到原来的重量，混匀，525nm测定吸光度。
2.2 标准曲线的制备
精密称取1.8-二羟基蒽醌对照品9.32mg，加冰乙酸溶解并稀释至lOmL，分别吸取上述标准液O.lOml、0.20ml、0.30ml、0.40ml、0.50ml、0.60ml、0.70ml置于50ml容量瓶中，用混合碱液定容，于暗处放置30min，以混合碱液为空白，于525nm处测定吸光度。以吸光度为横坐标，浓度为纵坐标，绘制标准曲线。
3 结果与讨论
3.1 混合酸比例的优化
分别用100%冰醋酸，25%盐酸：冰醋酸（1：19），25%盐酸：冰醋酸（1：9），25%盐酸：冰醋酸（1：4），25%盐酸：冰醋酸（1：1），25%盐酸6种混合酸进行水解。结果见表1。
由表2可知，当单纯为冰醋酸或25%盐酸时，水解效果均不理想，而采用混合酸时水解效率大大提高，故选择25%盐酸：冰醋酸（1：9）作为混合酸比例。
3.2 水解时间的优化
分别使用10、20、30、45、60、90分钟的水解时间，结果见表2。
随着水解时间的增加，样品所测得的总蒽醌浓度也随之相应增加。说明水解时间按对蒽配的水解有较大的影响，提取时问在10-30min之间呈直线上升趋势，而到了30min之后，随着提取时间的增加，总蒽醌浓度没有明显增加，因此合适的水解时间为30min。
3.3 线性范围
1.8-二羟基蒽醌在525nm，浓度1.864-13.048ug/ml范围内线性关系良好
线性方程：y=0.05lx+0.002，R2=0.9997。
3.4 回收率实验
分别称取5批已测知含量的样品进行加标实验，测得回收率范围在97.5%-100.1%，RSD范围在1.33%-1.59%，表明该方法准确度良好，结果见表3。
3.5 精密度试验
精密称取批号20100602样品6份，测得含量，RSD为0.90%.结果见表4。
3.6 稳定性试验
分别于Omin，5min，lOmin，20min，30min，60min，90min测定样品溶液吸光度，结果表明，显色产物在90min内稳定，RSD为0.17%。
关键词：总蒽醌：减肥类保健食品；分光光度法
蒽醌类化合物在百合科的芦荟、豆科的决明子和番泻叶中有较高含量，各种蒽醌及其苷都具有多方面的生物活性，重要的是致泻和抗菌作用。许多保健食品如减肥茶、降脂胶囊和芦荟制品都含有蒽醌类物质，总蒽醌在减肥产品中的主要起泻下作用，但是蒽醌类化合物，也有一定的副作用，剂量过大会引起胃肠的各种不适。严重的可能会导致胃肠出血、呼吸困难、心悸，故而蒽醌类成分的保健食品的质量控制十分重要。其含量测定方法有重量法、荧光法、高效液相色谱法、超临界流体萃取法等。目前保健食品中总葸醌含量检测还没有国家标准方法，本文参照保健食品生产企业提供的方法并对其进行优化，制定出更为合理可控的检测方法。由于蒽醌苷元是一个极性大的物质，先将蒽醌用酸水解成极性较小游离蒽醌后，根据“相似相溶”原理，选择极性较小的溶剂或溶剂系统为提取剂。
1 试剂与仪器
1.1 试剂
1.8-二羟基蒽醌对照品，批号：10120222，纯度：98%，上海同田生物技术有限公司
乙醚、冰醋酸、盐酸、氢氧化钠、氨水，均为AR级
混合碱溶液：10% NaOH与4%氨水等量混合
混合酸溶液：25%盐酸2ml加冰醋酸18ml
1.2 实验仪器
电子分析天平型号：XP205，梅特勒一托利多仪器（上海）有限公司
紫外可见分光光度计型号：UV-2450，日本岛津
数显恒温水浴锅型号：HH-6，国华电器有限公司
2 实验方案
2.1 样品测定
精密称取样品lOOmg，置于lOOml圆底烧瓶中，加混合酸溶液6ml摇匀，在沸水浴中回流15min，放冷，加乙醚30ml提取，提取液通过脱脂棉滤入分液漏斗中，继续用乙醚洗涤残渣两次，每次5ml，药渣再加混合酸4ml，在沸水浴中回流15min，放冷，加乙醚20ml提取，用乙醚洗涤残渣两次，每次5ml，合并乙醚液。用30，20ml振摇洗涤两次，弃去水洗液。乙醚液用混合碱液50，20，20ml提取三次，合并碱提取液，置lOOml容量瓶中，加混合碱液定容，混匀。取约50ml置锥形瓶中，称重，置沸水浴中回流30min，冷却，称重，补加10%氨溶液到原来的重量，混匀，525nm测定吸光度。
2.2 标准曲线的制备
精密称取1.8-二羟基蒽醌对照品9.32mg，加冰乙酸溶解并稀释至lOmL，分别吸取上述标准液O.lOml、0.20ml、0.30ml、0.40ml、0.50ml、0.60ml、0.70ml置于50ml容量瓶中，用混合碱液定容，于暗处放置30min，以混合碱液为空白，于525nm处测定吸光度。以吸光度为横坐标，浓度为纵坐标，绘制标准曲线。
3 结果与讨论
3.1 混合酸比例的优化
分别用100%冰醋酸，25%盐酸：冰醋酸（1：19），25%盐酸：冰醋酸（1：9），25%盐酸：冰醋酸（1：4），25%盐酸：冰醋酸（1：1），25%盐酸6种混合酸进行水解。结果见表1。
由表2可知，当单纯为冰醋酸或25%盐酸时，水解效果均不理想，而采用混合酸时水解效率大大提高，故选择25%盐酸：冰醋酸（1：9）作为混合酸比例。
3.2 水解时间的优化
分别使用10、20、30、45、60、90分钟的水解时间，结果见表2。
随着水解时间的增加，样品所测得的总蒽醌浓度也随之相应增加。说明水解时间按对蒽配的水解有较大的影响，提取时问在10-30min之间呈直线上升趋势，而到了30min之后，随着提取时间的增加，总蒽醌浓度没有明显增加，因此合适的水解时间为30min。
3.3 线性范围
1.8-二羟基蒽醌在525nm，浓度1.864-13.048ug/ml范围内线性关系良好
线性方程：y=0.05lx+0.002，R2=0.9997。
3.4 回收率实验
分别称取5批已测知含量的样品进行加标实验，测得回收率范围在97.5%-100.1%，RSD范围在1.33%-1.59%，表明该方法准确度良好，结果见表3。
3.5 精密度试验
精密称取批号20100602样品6份，测得含量，RSD为0.90%.结果见表4。
3.6 稳定性试验
分别于Omin，5min，lOmin，20min，30min，60min，90min测定样品溶液吸光度，结果表明，显色产物在90min内稳定，RSD为0.17%。