耐热型α-葡萄糖苷酶基因在大肠杆菌中的克隆及表达

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应用PCR法从火山口嗜热菌中克隆出了α-葡萄糖苷酶基因,并将该基因导入大肠杆菌,获得了稳定表达的大肠杆菌菌株。同时对其表达产物进行了酶学性质分析。结果表明:该基因长1587bp,编码501个氨基酸,为新舡葡萄糖苷酶同源基因,已将该序列在Genbank中登记;其表达产物经SDS-PAGE分析表明,相对分子质量约为66kD;该α-葡萄糖苷酶的最适温度为90℃,最适pH值为7.0,在80℃放置3h,酶活仍能达到94%以上。结果表明该酶具有优良的耐热性,将有广泛的工业应用前景。
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