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【摘要】目的:建立HPLC法测定三参软肝丸中丹参酮ⅡA含量的方法。方法:采用Eclipse XDB-C18色谱柱，甲醇-水（75：25）为流动相；流速1.0mlomin-1；检测波长270nm。结果:丹参酮ⅡA在0.0279~0.2231ug范围内线性关系良好（r=0.99998），平均回收率为98.53%，RSD=0.93%（n=6）。结论 本方法操作简便，专属性强，结果准确，可用于三参软肝丸的质量控制。
【关键词】丹参酮ⅡA；高效液相色谱法；含量测定
【Abstact】Objective: To establish a HPLC method for the determination of tanshinoneⅡA in sanshenruangan pills. Method: The chromatographic system consisted of C18 column,using methanol -water (75:25) as mobile phase.The content was detected at a waveleng of 270nm,the flow rate was 1.0mlomin-1 .Results: The tanshinoneⅡA have a goodtincar rolatim in the range of0.0279~0.2231ug（r=0.99998）,the average recovery was 98.53% and RSD=0.93%（n=6）. Conolusion: The established method is accuracy ,sensitive and simple.It can be used for quality control of sanshenruangan pills.
【Key woeds】TanshinoneⅡA; HPLC; Determination
【中图分类号】R426【文献标识码】B【文章编号】1005-0515(2011)03-0008-01
溶栓通脉胶囊是由赤芍、黄芪、三七、丹参、何首乌等十三味药材加工制成的医院制剂，具有益气活血化瘀软坚之功效，主治由于气虚血滞所致肝硬化腹水症、症瘕、痞块，改善肝脏微循环，促进纤维蛋白的降解及白蛋白的合成，进而阻断肝硬化，肝纤维化的进一步发展。[1]现行质量标准中未收载含量测定项目，不能有效的控制药品质量。丹参为方中主药，丹参酮ⅡA是丹参的主要有效成分[2]，本文以丹参酮ⅡA为指标成分，建立了三参软肝丸中丹参酮ⅡA的高效液相測定法，为该制剂的质量控制提供了客观的含量评价方法。
1 仪器与试药
1.1 仪器:Agilengt 1200型高效液相色谱仪，AUW-220D电子分析天平。
1.2 试药:丹参酮ⅡA对照品（中国药品生物制品检定所，批号: 110766-200518 ）；甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂为分析纯。三参软肝丸由商丘市中医院提供。
2 方法与结果
2.1 色谱条件:色谱柱：Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6×150mm)
流动相：甲醇-水（75：25）为流动相；流速1.0mlomin-1；检测波长270nm；进样量10μl；理论板数应不低于2000[3]。
2.2 线性关系考察:取丹参酮ⅡA对照品约10mg，精密称定，置50ml棕色量瓶中，加甲醇适量，振摇使完全溶解后，稀释至刻度，摇匀。精密量取3ml，置另一50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。按照“2.1”项色谱条件，分别进样6、8、10、12、20μl，记录丹参酮ⅡA峰面积值，以峰面积积分值（Y）对对照品浓度（X）进行线性回归，得回归方程：Y=5760.12708X+2.33965 r=0.99998。结果表明，丹参酮ⅡA对照品浓度在0.0279~0.2231ug范围内与峰面积值呈良好的线性关系。
2.3 对照品溶液的制备:取丹参酮ⅡA对照品约10mg，精密称定，置50ml棕色量瓶中，加甲醇适量，振摇使完全溶解后，稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液。精密量取对照品储备液3ml，置另一50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
2.4 供试品溶液及阴性对照溶液的制备：取本品约6.0g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，加热回流60分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。另取缺丹参的其他味药按处方工艺制成阴性制剂，按上述方法制备阴性对照溶液。
2.5 干扰试验：取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液各10μl，按照“2.1”项色谱条件，分别进样测定，记录色谱图，结果见图1。
图1高效液相色谱图
2.6 精密度和稳定性试验：取同一对照品溶液，重复进样5次，每次10μl，记录峰面积，RSD=0.75%(n=5)，表明仪器精密度良好。取同一对照品溶液，分别在室温放置0、2、4、12、24h后依法测定，结果峰面积的RSD=0.92%，供试品溶液在24小时内稳定性好。
2.7 加样回收率试验：称取6份已知含量为0.0405mg/g的样品约2.0g，精密称定，分别置1~6号锥形瓶中，分别精密加入对照品储备液3ml，按照“2.4”项下供试品溶液制备方法制备溶液，按照“2.1”项色谱条件，分别测定，结果见表1。
表1 加样回收率试验结果
2.8 样品测定：取3批样品，按“2.4”项下方法制备供试液，各进样10μl，按外标法计算丹参酮ⅡA的含量，结果见表2。
3 讨论
本方法操作简便，具有较强的专属性，回收率好，能够更有效的控制该制剂质量的质量。
参考文献
[1] 河南省医疗机构制剂标准
[2] 陈占立，孙爱平，张卉朱等.复方丹参片中丹参酮ⅡA含量测定方法.中国药业.2006.15（5）
[3] 中国药典[S].2005年版.一部.52
作者单位：476000 河南省商丘市中医院
【关键词】丹参酮ⅡA；高效液相色谱法；含量测定
【Abstact】Objective: To establish a HPLC method for the determination of tanshinoneⅡA in sanshenruangan pills. Method: The chromatographic system consisted of C18 column,using methanol -water (75:25) as mobile phase.The content was detected at a waveleng of 270nm,the flow rate was 1.0mlomin-1 .Results: The tanshinoneⅡA have a goodtincar rolatim in the range of0.0279~0.2231ug（r=0.99998）,the average recovery was 98.53% and RSD=0.93%（n=6）. Conolusion: The established method is accuracy ,sensitive and simple.It can be used for quality control of sanshenruangan pills.
【Key woeds】TanshinoneⅡA; HPLC; Determination
【中图分类号】R426【文献标识码】B【文章编号】1005-0515(2011)03-0008-01
溶栓通脉胶囊是由赤芍、黄芪、三七、丹参、何首乌等十三味药材加工制成的医院制剂，具有益气活血化瘀软坚之功效，主治由于气虚血滞所致肝硬化腹水症、症瘕、痞块，改善肝脏微循环，促进纤维蛋白的降解及白蛋白的合成，进而阻断肝硬化，肝纤维化的进一步发展。[1]现行质量标准中未收载含量测定项目，不能有效的控制药品质量。丹参为方中主药，丹参酮ⅡA是丹参的主要有效成分[2]，本文以丹参酮ⅡA为指标成分，建立了三参软肝丸中丹参酮ⅡA的高效液相測定法，为该制剂的质量控制提供了客观的含量评价方法。
1 仪器与试药
1.1 仪器:Agilengt 1200型高效液相色谱仪，AUW-220D电子分析天平。
1.2 试药:丹参酮ⅡA对照品（中国药品生物制品检定所，批号: 110766-200518 ）；甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂为分析纯。三参软肝丸由商丘市中医院提供。
2 方法与结果
2.1 色谱条件:色谱柱：Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6×150mm)
流动相：甲醇-水（75：25）为流动相；流速1.0mlomin-1；检测波长270nm；进样量10μl；理论板数应不低于2000[3]。
2.2 线性关系考察:取丹参酮ⅡA对照品约10mg，精密称定，置50ml棕色量瓶中，加甲醇适量，振摇使完全溶解后，稀释至刻度，摇匀。精密量取3ml，置另一50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。按照“2.1”项色谱条件，分别进样6、8、10、12、20μl，记录丹参酮ⅡA峰面积值，以峰面积积分值（Y）对对照品浓度（X）进行线性回归，得回归方程：Y=5760.12708X+2.33965 r=0.99998。结果表明，丹参酮ⅡA对照品浓度在0.0279~0.2231ug范围内与峰面积值呈良好的线性关系。
2.3 对照品溶液的制备:取丹参酮ⅡA对照品约10mg，精密称定，置50ml棕色量瓶中，加甲醇适量，振摇使完全溶解后，稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液。精密量取对照品储备液3ml，置另一50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
2.4 供试品溶液及阴性对照溶液的制备：取本品约6.0g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，加热回流60分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。另取缺丹参的其他味药按处方工艺制成阴性制剂，按上述方法制备阴性对照溶液。
2.5 干扰试验：取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液各10μl，按照“2.1”项色谱条件，分别进样测定，记录色谱图，结果见图1。
图1高效液相色谱图
2.6 精密度和稳定性试验：取同一对照品溶液，重复进样5次，每次10μl，记录峰面积，RSD=0.75%(n=5)，表明仪器精密度良好。取同一对照品溶液，分别在室温放置0、2、4、12、24h后依法测定，结果峰面积的RSD=0.92%，供试品溶液在24小时内稳定性好。
2.7 加样回收率试验：称取6份已知含量为0.0405mg/g的样品约2.0g，精密称定，分别置1~6号锥形瓶中，分别精密加入对照品储备液3ml，按照“2.4”项下供试品溶液制备方法制备溶液，按照“2.1”项色谱条件，分别测定，结果见表1。
表1 加样回收率试验结果
2.8 样品测定：取3批样品，按“2.4”项下方法制备供试液，各进样10μl，按外标法计算丹参酮ⅡA的含量，结果见表2。
3 讨论
本方法操作简便，具有较强的专属性，回收率好，能够更有效的控制该制剂质量的质量。
参考文献
[1] 河南省医疗机构制剂标准
[2] 陈占立，孙爱平，张卉朱等.复方丹参片中丹参酮ⅡA含量测定方法.中国药业.2006.15（5）
[3] 中国药典[S].2005年版.一部.52
作者单位：476000 河南省商丘市中医院