摘要目的：观察枸橼酸预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤与抑制细胞凋亡的作用及其机制。方法：建立大鼠在体缺血再灌注模型健康成年雄性D大鼠只采用随机数字表法分为组假手术组（只穿线不结扎；ham）、缺血再灌注组（缺血分钟再灌注1分钟；I/R）组以及枸橼酸预处理组（P组）。于再灌注1分钟末采用Evans蓝和，，5一氯化三苯基四氮唑（TT）双重染色法进行测定心肌缺血、梗死面积；提取心肌组织蛋白采用aspase-活性分光光度法检测试剂盒检测其活性。结果：ham组缺血面积/左心室面积；P组7.6±58明显低于I/R组±79（P<5）；ham组梗死面积/左心室面积P组591±197显著低于I/R组186±65（P<.5）；与ham组相比I/R组aspase-活性增加5（P<.5）；和I/R组相比P组减低（P<.5）。结论：枸橼酸预处理可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤其机制与下调aspase-基因表达从而抑制细胞调亡有关。
　　关键词心肌缺血再灌注枸橼酸细胞凋亡
　　心肌缺血再灌注损伤常见的临床改变包括心肌顿抑、微血管功能失调和心肌细胞的凋亡等。细胞凋亡可能是心肌缺血再灌注损伤发病机制的重要环节之一aspases家族蛋白酶是细胞凋亡途径的核心成分；aspase-作为凋亡效应蛋白是条途径：线粒体途径、内质网信号途径、死亡受体途径的共同下游通路在凋亡信号传导通路中占有举足轻重的地位。枸橼酸又名柠檬酸枸椽酸根离子可与血中钙离子生成难解离的可溶性络合物枸椽酸钙降低血清钙离子浓度；文献表明缺血、缺氧时引起细胞内酸中毒再灌注时通过H+-Na+交换和Na+-a+交换使细胞内钙增加进而激活磷脂酶使膜磷脂成分受损而分解。
　　资料与方法
　　心肌缺血大鼠模型制备：采用健康成年雄性prague-Dawley（D）大鼠体重5～g。用5乌拉坦（1.g/kg）对健康成年雄性D大鼠行腹腔注射麻醉连接心电图（Ⅱ导联）尾静脉置入G套管留置针以便给药。行气管切开置管接动物呼吸机控制呼吸呼吸频率7次/分潮气量8ml/kg吸呼比1∶。稳定1分钟后于胸骨左缘第、肋间开胸暴露心脏用6-无损伤缝线在左心耳右缘与肺动脉圆锥左缘之间冠状动脉左前降支起点下mm环绕冠脉将结扎线从1根聚乙烯小管中穿出拉紧形成闭环造成缺血放松即发生再灌注。再灌注前1分钟按照不同分组分别经尾静脉给予生理盐水、枸橼酸（.5mol/）容量1ml。
　　讨论
　　197年err首次提出了凋亡的概念经过历年研究发现心肌细胞凋亡参与了冠心痛、心律失常等心血管疾病的形成和发展过程缺血再灌注损伤时心肌细胞凋亡也明显加重。在众多aspase成员中caspase。被认为是各种凋亡刺激因子激活的aspase家族中的关键蛋白酶与DNA断裂、染色体凝聚和凋亡小体形成有关是直接介导凋亡的效应分子。心肌梗死面积扩大是心肌缺血再灌注损伤的一个重要特征而梗死面积的多少决定着缺血再灌对心肌损伤的严重程度。
　　本研究结果表明与I/R组比较P组心肌梗死面积明显缩小提示枸橼酸通过螯合血清中钙离子减少进入心肌细胞内钙离子量进而减轻心肌缺血再灌注损伤；I/R组caspase-活性上调提示再灌注损伤和心肌梗死均能诱导心肌细胞凋亡同时枸橼酸通过抑制caspase-的激活来抑制心肌缺血再灌注诱导的细胞凋亡其基本机制可能是钙离子浓度减少使a+Mg+依赖的核酸内切酶活化受阻从而阻断了细胞凋亡的发生。
　　参考文献
　　1马桂兰.细胞凋亡与冠心病[J].医学综述，，6（11）：91-9.
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　　胡章乐，马礼坤.aspase-与心肌缺脚再灌注损伤.国际病理科学与临床杂志，7，7（）：8-1.
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