【摘 要】
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通过对目的基因随机突变,希望获得纤溶酶活性提高的突变体.方法:采用一种简单方便的突变方法--亚硝酸钠直接突变含目的基因的质粒,然后转化受体菌获得突变体.在亚硝酸钠浓度
【机 构】
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华东师范大学生命科学学院分子生物学实验室
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通过对目的基因随机突变,希望获得纤溶酶活性提高的突变体.方法:采用一种简单方便的突变方法--亚硝酸钠直接突变含目的基因的质粒,然后转化受体菌获得突变体.在亚硝酸钠浓度为40mmol/L,温度为37℃,反应时间为1h条件下,突变带枯草杆菌纤溶酶基因的质粒pUBH,转化受体菌DB403,得到大量突变体.随机挑取约1600个转化子,用纤维平板法筛选.结果:获得酶活不同程度改变的突变体,其中有纤溶酶活性增加高达一倍的突变体;分离纯化了活性最高的突变酶,并证明其活性提高是与比活性提高相关的;序列分析该突变体发现碱基
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