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摘 要：目的：对T淋巴细胞活化指标检测在自身免疫性肝炎患者中应用价值进行分析。方法：纳入我院收治的54例自身免疫性肝炎患者作为研究对象，其中31例为缓解期，23例为发病期，同时纳入27名健康体检者作为参照组，均给予T淋巴细胞活化指标检测，对不同时期自身免疫肝炎患者和健康人群T淋巴细胞活化指标检测结果进行对比分析。结果：缓解期患者的CD25+、CD38+、CD3+HLA-DR+、CD8+CD38+、CD8+HLA-DR+及HLA-DR+均低于发病期患者，CD4+CD25+高于健康组，比较发现差异具有统计学意义（P<0.05）;发病期CD4+CD25+低于健康组，CD25+、CD38+、CD8+CD38+、HLA-DR+、CD3+HLA-DR+及CD8+HLA-DR+高于健康組，比较发现差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：自身免疫性肝炎患者可通过检测T淋巴细胞活化指标来评估病情发展情况，判断患者病情轻重，可作为临床诊断的重要指标。此外，免疫抑制是当前临床治疗自身免疫性肝炎的主要方式，且随着近两年免疫抑制药物的发展和改良，使得该疗法越来越成熟，在临床上应用也越来越广泛，因此对患者的T淋巴细胞活化指标进行检测分析，不仅可作为临床治疗效果评估指标，还可帮助临床医学拓展自身免疫性肝炎细胞治疗的新方向和新思路。
关键词：自身免疫性肝炎;T淋巴细胞活化指标;发病期;缓解期;健康体检者
【中图分类号】 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2019）10-0192-02
前言
自身免疫性肝炎是临床较为常见肝脏疾病，是一组免疫介导的肝脏慢性进展性炎性疾病，病理特征以血清自身抗体阳性、肝组织内T淋巴细胞浸润为主，且患者可并发其他免疫性疾病，可导致患者生活质量严重下降[1]。目前临床上尚未明确该疾病发病机制，认为可能与遗传、感染、免疫及药物等因素相关，其中最密切相关的因素就是患者自身免疫介导引起的肝细胞损伤，但具体机制尚未并且，认为与患者的体液免疫、细胞免疫密切相关，因此认为T淋巴细胞亚群的变化与自身免疫性肝炎密切相关[2-3]。基于此，本文就自身免疫性肝炎患者T淋巴细胞活化指标检测的价值进行分析。
1 资料与方法
1.1 一般资料：纳入2018年1月至2018年12月我院收治的54例自身免疫性肝炎患者和27名健康体检者作为研究对象，年龄最小的18岁，年龄最大的64岁，均值（43.61±5.21）岁。其中，54例自身免疫性肝炎患者中有31例为缓解期（19例男，12例女），23例为发病期（16例男，7例女）。27例健康体检者设为参照组，其中男性19例，女性8例。对比缓解期、发病期及参照组患者的一般资料发现差异无统计学意义（P<0.05），可进行对比分析。研究已获得患者及其家属的知情同意，经医学伦理委员审核批准。
1.2方法：抽取患者3ml全血将其保存在EDTA-K2抗凝试管中，然后在抽取100μl的全血均分到3支BD管中，每支BD管分别加入25μl的混合标记荧光抗体（CD25-PE/CD4-PC5/CD3-FITC、HLA-DR-PC5/CD8-PE/CD3-FITC、CD8-PE/CD38-FITC）进行混匀，然后在室温避光环境下进行10分钟的孵育;孵育结束后进行溶血固定处理，然后加入5毫升的PBS溶液进行洗涤，共洗涤2次;洗涤结束后以每分钟1500转的速率进行5分钟的离心处理，然后分离出沉淀细胞，将0.5ml的PBS溶液加进去后进行混合;血样处理完成后将其放在流式细胞仪上进行检测，依据光散射性质对淋巴细胞区进行设定，并根据各分子圈门对细胞百分率进行检测。
1.3观察指标：观察 54例自身免疫性肝炎患者和27名健康体检者的T 淋巴细胞免疫活化指标检测结果，主要对其CD25+、CD38+、CD3+CD25+、CD4+CD25+、CD8+CD38+、HLA-DR+、CD3+HLA-DR+及CD8+HLA-DR+等指标进行观察分析，对比缓解期、发病期及健康体检者上述指标间差异。
1.4统计学处理：本研究采用SPSS26.0统计学软件对相关研究数据进行处理，计量资料用（
）表示，t检验，当P<0.05，表示差异显著且具有统计学意义。
2 结果
通过对54例自身免疫性肝炎患者和27名健康体检者的T 淋巴细胞免疫活化指标检测结果观察发现，缓解期患者的CD25+、CD38+、CD3+HLA-DR+、CD8+CD38+、CD8+HLA-DR+及HLA-DR+均低于发病期患者，CD4+CD25+高于健康组，比较发现差异具有统计学意义（P<0.05）;发病期CD4+CD25+低于健康组，CD25+、CD38+、CD8+CD38+、HLA-DR+、CD3+HLA-DR+及CD8+HLA-DR+高于健康组，比较发现差异具有统计学意义（P<0.05）。如表1所示。
3 讨论
自身免疫性肝炎病理特点以自身免疫细胞对肝细胞进行攻击为主，因此会出现免疫球蛋白、血清自身抗体及氨基转移酶等指标升高的情况，从肝组织学方面可观察到界面性的肝炎[4]。但是由于不同患者的发病特点、病情发展过程、并发疾病等因素，会使得临床诊断方面存在较大的异质性，研究发现缓解期的症状尽管较于发病期要轻，免疫细胞活性活化也较低，大使体液免疫依然活跃[5-6]。在本次研究中，通过对缓解期、发病期及健康体检者的T 淋巴细胞免疫活化指标检测结果观察发现，CD25+是T细胞早中期活化的指标，一般在T淋巴细胞活化15小时后表达;CD38+一般在活化中期表达，且常与CD8+搭配，可对具有杀伤性的T细胞活化状态进行反应;CD3+CD25+、CD4+CD25+在发病期表达降低，HLA-DR+表达增加，由此可见在自身免疫性肝炎病情发展过程中和发生时免疫细胞活化的作用十分重要[7]。此外，CD4+CD25+可直接对Treg细胞的状态进行直接反应，对患者体内细胞免疫调节的功能和状态进行准确的反应。
由上得出结论，自身免疫性肝炎患者可通过检测T淋巴细胞活化指标来评估病情发展情况，判断患者病情轻重，可作为临床诊断的重要指标。此外，免疫抑制是当前临床治疗自身免疫性肝炎的主要方式，且随着近两年免疫抑制药物的发展和改良，使得该疗法越来越成熟，在临床上应用也越来越广泛，因此对患者的T淋巴细胞活化指标进行检测分析，不仅可作为临床治疗效果评估指标，还可帮助临床医学拓展自身免疫性肝炎细胞治疗的新方向和新思路。
参考文献
[1] 熊克宫，柯坤宇，孔金峰，等.1型自身免疫性肝炎患者外周血T淋巴细胞PD-L1的表达情况及其与肝脏炎症活动度的相关性分析[J].临床肝胆病杂志，2018，34（06）：1248-1252.
[2] 熊武芳，刘友迎，黄雪梅，等.自身免疫性肝炎患者外周血PBMC中FGL2表达及其与外周血Th17、Treg细胞及相关因子的关系[J].标记免疫分析与临床，2019，26（12）：2109-2114.
[3] 李巧利，徐芸，保洁，等.自身免疫性肝炎患者65例外周血T细胞、Th1/Th2比值及肝功能检测分析[J].医药论坛杂志，2019，40（10）：89-92.
[4] 肖倩，谭善忠，赵天慧，等.抗核抗体及肝组织病理对男性自身免疫性肝病患者的诊断意义分析[J].临床肝胆病杂志，2019，35（05）：1070-1073.
[5] 古丽努尔·赛提汗，哈尼帕·司马义.儿童自身免疫性肝炎的临床病理特征与治疗[J].肝脏，2019，24（12）：1396-1398.
[6] 王维钊，向晓星.Treg/Th17、Th1/Th2平衡在自身免疫性肝炎中的免疫学机制及诊疗新靶点[J].临床肝胆病杂志，2019，35（08）：1874-1877.
[7] 葛宽雪，高伟华，向晓星.辅助性T淋巴细胞17和调节性T淋巴细胞及其平衡改变与自身免疫性肝炎的关系[J].临床肝胆病杂志，2018，34（07）：1573-1576.
关键词：自身免疫性肝炎;T淋巴细胞活化指标;发病期;缓解期;健康体检者
【中图分类号】 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2019）10-0192-02
前言
自身免疫性肝炎是临床较为常见肝脏疾病，是一组免疫介导的肝脏慢性进展性炎性疾病，病理特征以血清自身抗体阳性、肝组织内T淋巴细胞浸润为主，且患者可并发其他免疫性疾病，可导致患者生活质量严重下降[1]。目前临床上尚未明确该疾病发病机制，认为可能与遗传、感染、免疫及药物等因素相关，其中最密切相关的因素就是患者自身免疫介导引起的肝细胞损伤，但具体机制尚未并且，认为与患者的体液免疫、细胞免疫密切相关，因此认为T淋巴细胞亚群的变化与自身免疫性肝炎密切相关[2-3]。基于此，本文就自身免疫性肝炎患者T淋巴细胞活化指标检测的价值进行分析。
1 资料与方法
1.1 一般资料：纳入2018年1月至2018年12月我院收治的54例自身免疫性肝炎患者和27名健康体检者作为研究对象，年龄最小的18岁，年龄最大的64岁，均值（43.61±5.21）岁。其中，54例自身免疫性肝炎患者中有31例为缓解期（19例男，12例女），23例为发病期（16例男，7例女）。27例健康体检者设为参照组，其中男性19例，女性8例。对比缓解期、发病期及参照组患者的一般资料发现差异无统计学意义（P<0.05），可进行对比分析。研究已获得患者及其家属的知情同意，经医学伦理委员审核批准。
1.2方法：抽取患者3ml全血将其保存在EDTA-K2抗凝试管中，然后在抽取100μl的全血均分到3支BD管中，每支BD管分别加入25μl的混合标记荧光抗体（CD25-PE/CD4-PC5/CD3-FITC、HLA-DR-PC5/CD8-PE/CD3-FITC、CD8-PE/CD38-FITC）进行混匀，然后在室温避光环境下进行10分钟的孵育;孵育结束后进行溶血固定处理，然后加入5毫升的PBS溶液进行洗涤，共洗涤2次;洗涤结束后以每分钟1500转的速率进行5分钟的离心处理，然后分离出沉淀细胞，将0.5ml的PBS溶液加进去后进行混合;血样处理完成后将其放在流式细胞仪上进行检测，依据光散射性质对淋巴细胞区进行设定，并根据各分子圈门对细胞百分率进行检测。
1.3观察指标：观察 54例自身免疫性肝炎患者和27名健康体检者的T 淋巴细胞免疫活化指标检测结果，主要对其CD25+、CD38+、CD3+CD25+、CD4+CD25+、CD8+CD38+、HLA-DR+、CD3+HLA-DR+及CD8+HLA-DR+等指标进行观察分析，对比缓解期、发病期及健康体检者上述指标间差异。
1.4统计学处理：本研究采用SPSS26.0统计学软件对相关研究数据进行处理，计量资料用（
）表示，t检验，当P<0.05，表示差异显著且具有统计学意义。
2 结果
通过对54例自身免疫性肝炎患者和27名健康体检者的T 淋巴细胞免疫活化指标检测结果观察发现，缓解期患者的CD25+、CD38+、CD3+HLA-DR+、CD8+CD38+、CD8+HLA-DR+及HLA-DR+均低于发病期患者，CD4+CD25+高于健康组，比较发现差异具有统计学意义（P<0.05）;发病期CD4+CD25+低于健康组，CD25+、CD38+、CD8+CD38+、HLA-DR+、CD3+HLA-DR+及CD8+HLA-DR+高于健康组，比较发现差异具有统计学意义（P<0.05）。如表1所示。
3 讨论
自身免疫性肝炎病理特点以自身免疫细胞对肝细胞进行攻击为主，因此会出现免疫球蛋白、血清自身抗体及氨基转移酶等指标升高的情况，从肝组织学方面可观察到界面性的肝炎[4]。但是由于不同患者的发病特点、病情发展过程、并发疾病等因素，会使得临床诊断方面存在较大的异质性，研究发现缓解期的症状尽管较于发病期要轻，免疫细胞活性活化也较低，大使体液免疫依然活跃[5-6]。在本次研究中，通过对缓解期、发病期及健康体检者的T 淋巴细胞免疫活化指标检测结果观察发现，CD25+是T细胞早中期活化的指标，一般在T淋巴细胞活化15小时后表达;CD38+一般在活化中期表达，且常与CD8+搭配，可对具有杀伤性的T细胞活化状态进行反应;CD3+CD25+、CD4+CD25+在发病期表达降低，HLA-DR+表达增加，由此可见在自身免疫性肝炎病情发展过程中和发生时免疫细胞活化的作用十分重要[7]。此外，CD4+CD25+可直接对Treg细胞的状态进行直接反应，对患者体内细胞免疫调节的功能和状态进行准确的反应。
由上得出结论，自身免疫性肝炎患者可通过检测T淋巴细胞活化指标来评估病情发展情况，判断患者病情轻重，可作为临床诊断的重要指标。此外，免疫抑制是当前临床治疗自身免疫性肝炎的主要方式，且随着近两年免疫抑制药物的发展和改良，使得该疗法越来越成熟，在临床上应用也越来越广泛，因此对患者的T淋巴细胞活化指标进行检测分析，不仅可作为临床治疗效果评估指标，还可帮助临床医学拓展自身免疫性肝炎细胞治疗的新方向和新思路。
参考文献
[1] 熊克宫，柯坤宇，孔金峰，等.1型自身免疫性肝炎患者外周血T淋巴细胞PD-L1的表达情况及其与肝脏炎症活动度的相关性分析[J].临床肝胆病杂志，2018，34（06）：1248-1252.
[2] 熊武芳，刘友迎，黄雪梅，等.自身免疫性肝炎患者外周血PBMC中FGL2表达及其与外周血Th17、Treg细胞及相关因子的关系[J].标记免疫分析与临床，2019，26（12）：2109-2114.
[3] 李巧利，徐芸，保洁，等.自身免疫性肝炎患者65例外周血T细胞、Th1/Th2比值及肝功能检测分析[J].医药论坛杂志，2019，40（10）：89-92.
[4] 肖倩，谭善忠，赵天慧，等.抗核抗体及肝组织病理对男性自身免疫性肝病患者的诊断意义分析[J].临床肝胆病杂志，2019，35（05）：1070-1073.
[5] 古丽努尔·赛提汗，哈尼帕·司马义.儿童自身免疫性肝炎的临床病理特征与治疗[J].肝脏，2019，24（12）：1396-1398.
[6] 王维钊，向晓星.Treg/Th17、Th1/Th2平衡在自身免疫性肝炎中的免疫学机制及诊疗新靶点[J].临床肝胆病杂志，2019，35（08）：1874-1877.
[7] 葛宽雪，高伟华，向晓星.辅助性T淋巴细胞17和调节性T淋巴细胞及其平衡改变与自身免疫性肝炎的关系[J].临床肝胆病杂志，2018，34（07）：1573-1576.