【摘 要】
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目的观察青藤碱对人增生性瘢痕成纤维细胞生长和迁移的抑制作用。方法手术切除3例患者[年龄(34.04±6.36)岁，肩背部2例、四肢1例]的增生性瘢痕，提取成纤维细胞进行培养。首先通过噻唑蓝(MTT)实验检测25 μmol/L和50 μmol/L的青藤碱对成纤维细胞增殖的影响，应用流式细胞术对青藤碱作用后的成纤维细胞的细胞周期进行分析。通过Hochest 33258染色法观察经青藤碱处理的成纤维细胞
【机 构】
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锦州医科大学解放军北部战区总医院研究生培养基地，沈阳 110016,中国人民解放军北部战区总医院整形外科，沈阳 110016
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目的观察青藤碱对人增生性瘢痕成纤维细胞生长和迁移的抑制作用。
方法手术切除3例患者[年龄(34.04±6.36)岁，肩背部2例、四肢1例]的增生性瘢痕，提取成纤维细胞进行培养。首先通过噻唑蓝(MTT)实验检测25 μmol/L和50 μmol/L的青藤碱对成纤维细胞增殖的影响，应用流式细胞术对青藤碱作用后的成纤维细胞的细胞周期进行分析。通过Hochest 33258染色法观察经青藤碱处理的成纤维细胞的凋亡情况。利用Transwell实验检测青藤碱对成纤维细胞迁移的作用。通过蛋白质印迹法(Western blot)验证青藤碱对转化生成因子-β1(TGF-β1)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2 (bcl-2)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的调节作用。计量资料采用t检验，计数资料比较采用χ2检验。
结果25 μmol/L和50 μmol/L青藤碱作用于成纤维细胞24 h后对细胞增殖的抑制比率分别为(13.14±5.51)%和(43.28±4.98)%，青藤碱对细胞的抑制作用随着药物浓度的增加和作用时间的延长而增强。青藤碱作用后，细胞会出现G1/S期阻滞的现象，凋亡细胞数量有所增加，细胞的迁移数量降低。空白对照、25 μmol/L和50 μmol/L青藤碱处理成纤维细胞24 h后，TGF-β1、Cyclin D1、bcl-2和MMP-2蛋白表达灰度值分别为(0.84±0.01比0.16±0.04比0.17±0.03)、(1.06±0.01比0.93±0.04比0.82±0.05)、(0.55±0.03比0.34±0.01比0.28±0.01)和(0.64±0.01比0.28±0.04比0.14±0.02)，组间比较差异有统计学意义(t＝11.040、25.370；18.880、15.410；15.760、17.440；19.600、7.210，P<0.05)。
结论青藤碱能够抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的生长和迁移。
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