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【摘要】目的：分析γ-干扰素释放实验在涂阴肺结核中的诊断作用。方法：研究对象为来自2013年1月至2014年12月期间的肺结核住院病患164例，其中含有涂阴肺结核108例，分为肺结核组与涂阴肺结核组，同时选取132例其他肺部疾病患者作为对照组，运用γ-干扰素释放试验来进行检验外周血淋巴细胞对结核分枝杆菌菌种的特异性分泌蛋白情况。结果：肺结核组中γ-干扰素释放实验阳性率为89.63%（147/164），涂阴肺结核组中其阳性率为88.89%（96/108），对照组为19.7%（23/132）。TST阳性率中，肺结核组为68.29%（112/164），涂阴肺结核组为71.30%（77/108），对照组为20.45%（27/132）。结论：运用γ-干扰素释放实验可以得到较快、特异性与敏感性高的的涂阴肺结核的检查情况，对于疑似肺结核的病患检测具有较高价值。
【关键词】肺结核；γ-干扰素释放试验；诊断价值
【中图分类号】R-0 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2015）01-0429-02
肺结核病患的及时治疗干预依赖与有效的诊断，而临床上涂阴肺结核病患却因为痰涂片细菌检测为阴性而存在诊断困难，痰培养方式的诊断敏感性低、检测周期长都是相关困难因素。而γ-干扰素释放试验已经成为临床上肺结核的有效诊断方式，广泛的应用于全球范围。该方式利用肺结核病患为周血单核细胞所具有的结核特异效应T淋巴细胞，在结核杆菌特异抗原刺激之后分泌INF-γ而开展的试验方式，其特异性和灵敏度较高[1-2]。
1 资料与方法
1.1 一般资料
研究对象为来自2013年1月至2014年12月期间的肺结核住院病患164例，其中含有涂阴肺结核108例，分为肺结核组与涂阴肺结核组，同时选取132例其他肺部疾病患者作为对照组。结核病患者纳入标准为：（1）年龄在18-65岁范围内；（2）临床症状为咳痰、咳嗽，X线胸片或则胸部CT表现有肺部阴影。排除了妊娠期病患。肺结核诊断主要依靠临床症状、痰检、影像检查资料同时参照相关诊断标准进行。涂阴肺结核的诊断标准为：（1）有肺结核临床症状和X线胸片的典型表现；（2）抗结核治疗干预有效；（3）排除了其他非结核性肺病者；（4）痰涂片细菌检测为阴性；（5）通过肺部或支气管组织病理检查确诊为结核性病变者。其他肺部疾病纳入主要包括支气管扩张、肺癌、慢阻肺、肺炎等。
1.2 方法
所有入選人员均进行了痰涂片、痰培养、痰结核分枝杆菌DNA检测，入院第二天进行血T-SPOT检测以及血清结核抗体检测，以及结核菌素皮肤试验。
全血T-SPOT试验运用试剂盒，抽全血6ml，如果属于白细胞量低或者免疫力低者抽取8-10ml，装入肝素抗凝管中。在6h内进行外周血单个核细胞，运用无血清培养液重悬细胞将细胞浓度调节到2.5×106/ml，配置成标准的溶液。加入50μl无血清培养液与加入植物血凝索作为两组对照，结核分枝杆菌的特异抗原A与B于其检测孔与阴性、PHA对照孔。每份标本添加含有2.5×105PBMCs的100μl标准溶液到对照孔与检测孔中。拍干之后添加底物显色溶液，在室温下进行7min孵育。运用离子水或蒸馏水进行洗涤拍干。将放大镜做每孔颜色斑点计数，依据抗原A或B孔的反应做结果判断：（1）无反应性对照孔的点数在0-5范围，如果抗原A或B斑点减去无反应对照孔点数在6及以上则为有反应性样本，则为阳性；（2）当无反应对照孔点数在6及以上，而有反应性样本是其2倍及以上，则为阳性。
1.3 统计学分析
将采集到的数据通过spss17.0统计学做分析处理，将计数资料运用卡方来检验，计量资料运用t来检验，同时以p<0.05作为组间差异具有统计学意义的标准。
2 结果
表1：肺结核组与对照组T-SPOT与TST的检验情况
注：两组对比，P<0.05。
表2：涂阴肺结核与对照组T-SPOT与TST的检验情况
注：两组对比，P<0.05。
肺结核组中γ-干扰素释放实验阳性率为89.63%（147/164），涂阴肺结核组中其阳性率为88.89%（96/108），对照组为19.7%（23/132）。TST阳性率中，肺结核组为68.29%（112/164），涂阴肺结核组为71.30%（77/108），对照组为20.45%（27/132）。具体情况如表1所示。
3 讨论
γ-干扰素释放试验在结核病中的运用相关数据还在不断的积累，其技术存在的局限性也在逐步被人们注意到。γ-干扰素释放试验的结果受到多种因素的干扰，如病患年龄、癌症化疗、营养不良、感染等情况。结核感染的重要参考指标之一——TST，接种卡介苗与肺结核分支杆菌会影响其特异性，而结果的判读又受到检测人员水平的差异影响。有相关数据显示，T-SPOT敏感性高于TST，健康群体中的TST阳性率要高于T-SPOT，而T-SPOT不受到卡介苗疫苗的影响。在临床研究上，TST敏感性与QFT-G有较高的相似性。本研究中，肺结核组中γ-干扰素释放实验阳性率为89.63%（147/164），涂阴肺结核组中其阳性率为88.89%（96/108），对照组为19.7%（23/132）。TST阳性率中，肺结核组为68.29%（112/164），涂阴肺结核组为71.30%（77/108），对照组为20.45%（27/132）。可以看出T-SPOT在结核感染的敏感性要高于TST，同时有效的在感染与非感染人群中有更高的区分度。
总体而言，T-SPOT在检测的敏感度上，要显著高于其他检验方式，无论是涂阴肺结核还是常规肺结核情况的检验，其敏感性和特异性更强，检出是速度也更快，效率更高。
参考文献：
[1]杨新婷，李琦，贾红彦.全血γ-干扰素释放试验在菌阴肺结核中诊断价值的临床观察[J].中国临床医生，2013（3）：42-45
[2]陈红梅，黄移生.γ-干扰素释放试验在辅助诊断活动性肺结核中的临床意义[J].中南药学，2014（7）：
【关键词】肺结核；γ-干扰素释放试验；诊断价值
【中图分类号】R-0 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2015）01-0429-02
肺结核病患的及时治疗干预依赖与有效的诊断，而临床上涂阴肺结核病患却因为痰涂片细菌检测为阴性而存在诊断困难，痰培养方式的诊断敏感性低、检测周期长都是相关困难因素。而γ-干扰素释放试验已经成为临床上肺结核的有效诊断方式，广泛的应用于全球范围。该方式利用肺结核病患为周血单核细胞所具有的结核特异效应T淋巴细胞，在结核杆菌特异抗原刺激之后分泌INF-γ而开展的试验方式，其特异性和灵敏度较高[1-2]。
1 资料与方法
1.1 一般资料
研究对象为来自2013年1月至2014年12月期间的肺结核住院病患164例，其中含有涂阴肺结核108例，分为肺结核组与涂阴肺结核组，同时选取132例其他肺部疾病患者作为对照组。结核病患者纳入标准为：（1）年龄在18-65岁范围内；（2）临床症状为咳痰、咳嗽，X线胸片或则胸部CT表现有肺部阴影。排除了妊娠期病患。肺结核诊断主要依靠临床症状、痰检、影像检查资料同时参照相关诊断标准进行。涂阴肺结核的诊断标准为：（1）有肺结核临床症状和X线胸片的典型表现；（2）抗结核治疗干预有效；（3）排除了其他非结核性肺病者；（4）痰涂片细菌检测为阴性；（5）通过肺部或支气管组织病理检查确诊为结核性病变者。其他肺部疾病纳入主要包括支气管扩张、肺癌、慢阻肺、肺炎等。
1.2 方法
所有入選人员均进行了痰涂片、痰培养、痰结核分枝杆菌DNA检测，入院第二天进行血T-SPOT检测以及血清结核抗体检测，以及结核菌素皮肤试验。
全血T-SPOT试验运用试剂盒，抽全血6ml，如果属于白细胞量低或者免疫力低者抽取8-10ml，装入肝素抗凝管中。在6h内进行外周血单个核细胞，运用无血清培养液重悬细胞将细胞浓度调节到2.5×106/ml，配置成标准的溶液。加入50μl无血清培养液与加入植物血凝索作为两组对照，结核分枝杆菌的特异抗原A与B于其检测孔与阴性、PHA对照孔。每份标本添加含有2.5×105PBMCs的100μl标准溶液到对照孔与检测孔中。拍干之后添加底物显色溶液，在室温下进行7min孵育。运用离子水或蒸馏水进行洗涤拍干。将放大镜做每孔颜色斑点计数，依据抗原A或B孔的反应做结果判断：（1）无反应性对照孔的点数在0-5范围，如果抗原A或B斑点减去无反应对照孔点数在6及以上则为有反应性样本，则为阳性；（2）当无反应对照孔点数在6及以上，而有反应性样本是其2倍及以上，则为阳性。
1.3 统计学分析
将采集到的数据通过spss17.0统计学做分析处理，将计数资料运用卡方来检验，计量资料运用t来检验，同时以p<0.05作为组间差异具有统计学意义的标准。
2 结果
表1：肺结核组与对照组T-SPOT与TST的检验情况
注：两组对比，P<0.05。
表2：涂阴肺结核与对照组T-SPOT与TST的检验情况
注：两组对比，P<0.05。
肺结核组中γ-干扰素释放实验阳性率为89.63%（147/164），涂阴肺结核组中其阳性率为88.89%（96/108），对照组为19.7%（23/132）。TST阳性率中，肺结核组为68.29%（112/164），涂阴肺结核组为71.30%（77/108），对照组为20.45%（27/132）。具体情况如表1所示。
3 讨论
γ-干扰素释放试验在结核病中的运用相关数据还在不断的积累，其技术存在的局限性也在逐步被人们注意到。γ-干扰素释放试验的结果受到多种因素的干扰，如病患年龄、癌症化疗、营养不良、感染等情况。结核感染的重要参考指标之一——TST，接种卡介苗与肺结核分支杆菌会影响其特异性，而结果的判读又受到检测人员水平的差异影响。有相关数据显示，T-SPOT敏感性高于TST，健康群体中的TST阳性率要高于T-SPOT，而T-SPOT不受到卡介苗疫苗的影响。在临床研究上，TST敏感性与QFT-G有较高的相似性。本研究中，肺结核组中γ-干扰素释放实验阳性率为89.63%（147/164），涂阴肺结核组中其阳性率为88.89%（96/108），对照组为19.7%（23/132）。TST阳性率中，肺结核组为68.29%（112/164），涂阴肺结核组为71.30%（77/108），对照组为20.45%（27/132）。可以看出T-SPOT在结核感染的敏感性要高于TST，同时有效的在感染与非感染人群中有更高的区分度。
总体而言，T-SPOT在检测的敏感度上，要显著高于其他检验方式，无论是涂阴肺结核还是常规肺结核情况的检验，其敏感性和特异性更强，检出是速度也更快，效率更高。
参考文献：
[1]杨新婷，李琦，贾红彦.全血γ-干扰素释放试验在菌阴肺结核中诊断价值的临床观察[J].中国临床医生，2013（3）：42-45
[2]陈红梅，黄移生.γ-干扰素释放试验在辅助诊断活动性肺结核中的临床意义[J].中南药学，2014（7）：