【摘 要】
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抑肽酶作为天然的非特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂,临床用途广泛.为实现抑肽酶的大量制备,按大肠杆菌惯用密码子用人工方法合成抑肽酶结构基因,克隆于PUC18的EcoRⅠ和PstⅠ位点,
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抑肽酶作为天然的非特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂,临床用途广泛.为实现抑肽酶的大量制备,按大肠杆菌惯用密码子用人工方法合成抑肽酶结构基因,克隆于PUC18的EcoRⅠ和PstⅠ位点,转入Top10大肠杆菌(recA)中,经测序证明序列正确.表达体系模拟抑肽酶的体内成熟过程,将其自身的13肽pro序列融合于抑肽酶的N端,并在其间插入胰蛋白酶识别位点.该融合蛋白在使用PET-11C载体表达时,产物以包涵体形式存在于大肠杆菌中,表达量占菌体总蛋白的30%以上.复性实验证明:该肽段不影响抑肽酶的正确折叠,还能帮助抑肽酶
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