论文部分内容阅读
【摘要】目的观察穆塞勒斯对小鼠免疫功能的影响。方法采用2，4-二硝基氯苯所致小鼠迟发型超敏反应试验、血清溶血素生成试验及溶血空斑细胞形成试验（PFC），观察穆塞勒斯对耳肿胀度、胸腺指数、脾脏指数、HC50、PFC的影响。结果低、中、高剂量穆塞勒斯酒均对2，4-二硝基氯苯所致小鼠迟发型超敏反应有增强作用；能提高小鼠胸腺指数；增强血清溶血素抗体生成能力和增加脾溶血空斑形成细胞数。结论穆塞勒斯具有增強小鼠免疫功能的作用。
【关键词】穆塞勒斯酒；免疫功能；溶血素；空斑形成细胞
穆塞勒斯酒是新疆阿瓦提县民间运用葡萄发酵酿酒的传统工艺制作的一种口感纯正、品质优良的各族人民喜食饮用的纯天然低度酒类，属温性饮品。据民间流传，该酒有多种保健功能，如活血化淤、降血脂、降低心脑血管发病率、保肝护肝以及抗衰老等多方面的功能，但均无实验研究依据。故本研究拟从细胞免疫，体液免疫两方面来研究其对正常小鼠免疫功能的影响，从而为将其开发成为功能性保健饮品提供理论依据。
1材料与方法
1.1试验药物穆塞勒斯酒，新疆阿瓦提穆塞勒斯酒厂生产，批号090112；地塞米松磷酸钠注射液，德阳华康有限公司生产，批号100417；绵羊红细胞（SRBC）；豚鼠血清；都氏试剂；杞天红景口服液，新疆乌鲁木齐尚仁科技有限公司生产，批号100108；2，4-二硝基氯苯（2，4-Dinitrochloro bebzene DNCB），批号：100801
1.2动物昆明种小鼠，20±2g，雌雄兼用，新疆医科大学动物实验中心提供，许可证号：SCXK（新）2003-2001。
1.3仪器分光光度计（上海棱光技术有限公司产品，型号Spectrumlab 22PC）；电子天平（北京赛多利斯天平有限公司产品，型号BS110S）；台式离心机（上海交亭科学仪器厂制造，型号TDL80-213）。
1.4方法
1.4.3对小鼠溶血空斑形成细胞（PFC）能力的影响[4]动物分组与给药方法同1.4.1，各组动物连续灌胃给药15天，于第15天末次给药后1h，处死小鼠取脾脏，除去脾脂肪和结缔组织，用注射器针芯经铜网（网目100目）轻轻捻碎脾组织，以pH7.4的磷酸缓冲生理盐水（PBS）制成脾悬液（在光学显微镜下将脾悬液浓度调至5×106个脾细胞/ml），每管加入脾悬液1mL、0.25% SRBC1mL和豚鼠血清混匀，370C水温育1h，1500r.min-1离心5min，取上清液用分光光度计在413nm处测定吸光度A值。
上述各组动物于实验第1天，腹部褪毛3×3cm，然后均匀涂抹5%的DNCB丙酮溶液50ul致敏，次日强化致敏一次，实验第6天，各组小鼠右耳正反两面用1%的DNCB丙酮溶液20ul均匀涂抹，进行攻击，24小时后，将各组小鼠脱颈椎处死，剪下两耳，用直径8mm的钢冲冲下耳片，称重，以左右两耳片重之差为耳肿胀度。
3讨论
穆塞勒斯酒由鲜葡萄、鹿茸、藏红花、小豆蔻、丁香经葡萄酿酒发酵的传统工艺精制而成，含有机体所需的氨基酸、维生素、葡萄糖、铁等多种营养成分。作为一种纯天然饮品，具有强身开胃、补肾的作用，由此提示穆塞勒斯酒可能具有增强机体免疫功能的作用。
本研究从体液免疫、细胞免疫角度，研究了穆塞勒斯酒对正常小鼠免疫功能的影响。迟发型超敏反应（DTH）是依赖T细胞的反应，又称接触性过敏反应。DTH反应中的T细胞，在自身免疫方面起着关键作用。免疫器官在淋巴细胞的成熟和再生中起着重要作用，因此胸腺和脾脏的重量的改变都会对机体免疫机能产生影响，通常以胸腺指数、脾脏指数作为观察指标。研究药物对机体体液免疫的影响的方法常采用溶血素测定法、溶血空斑法，其中溶血空斑法是一类体外检测单个抗体分泌细胞的方法，溶血空斑数可大体反映抗体分泌细胞数量以定量检测药物对抗体分泌细胞的作用。
实验结果发现穆塞勒斯酒能明显增强DNCB致小鼠迟发型超敏反应，提高胸腺指数，说明其能提高机体的细胞免疫功能；可增强血清溶血素生成和脾脏空斑形成细胞溶血能力，显示穆塞勒斯酒能增强正常小鼠的体液免疫功能。综上实验结果，提示穆塞勒斯酒具有增强机体免疫功能的功效。
参考文献
[1]陈东方，王海玉，李立，等.汉方茶对小鼠免疫功能增强作用[J].食品科技，2011，36（12）：48-50.
[2]洪德志，张作法，蒋学，等.桑枝多糖对正常小鼠免疫功能的影响[J].蚕业科学，2011，37（3）：481-485.
[3]周明眉，杨红舟，赵爱华，等.山豆根非生物碱部分对小鼠免疫功能的影响[J].时珍国医国药，2011，12（22）：2954-2955.
[4]聂焱，胡余明，易传祝.鳕鱼肝油对小鼠免疫功能影响的研究[J].实用预防医学，2012，19（1）：125-127.
[5]岑晓江，侯思名，樊传章，等.海枫藤水煎液对小鼠免疫功能的影响[J].细胞与分子免疫学杂志，2011，27（6）：700-701.
【关键词】穆塞勒斯酒；免疫功能；溶血素；空斑形成细胞
穆塞勒斯酒是新疆阿瓦提县民间运用葡萄发酵酿酒的传统工艺制作的一种口感纯正、品质优良的各族人民喜食饮用的纯天然低度酒类，属温性饮品。据民间流传，该酒有多种保健功能，如活血化淤、降血脂、降低心脑血管发病率、保肝护肝以及抗衰老等多方面的功能，但均无实验研究依据。故本研究拟从细胞免疫，体液免疫两方面来研究其对正常小鼠免疫功能的影响，从而为将其开发成为功能性保健饮品提供理论依据。
1材料与方法
1.1试验药物穆塞勒斯酒，新疆阿瓦提穆塞勒斯酒厂生产，批号090112；地塞米松磷酸钠注射液，德阳华康有限公司生产，批号100417；绵羊红细胞（SRBC）；豚鼠血清；都氏试剂；杞天红景口服液，新疆乌鲁木齐尚仁科技有限公司生产，批号100108；2，4-二硝基氯苯（2，4-Dinitrochloro bebzene DNCB），批号：100801
1.2动物昆明种小鼠，20±2g，雌雄兼用，新疆医科大学动物实验中心提供，许可证号：SCXK（新）2003-2001。
1.3仪器分光光度计（上海棱光技术有限公司产品，型号Spectrumlab 22PC）；电子天平（北京赛多利斯天平有限公司产品，型号BS110S）；台式离心机（上海交亭科学仪器厂制造，型号TDL80-213）。
1.4方法
1.4.3对小鼠溶血空斑形成细胞（PFC）能力的影响[4]动物分组与给药方法同1.4.1，各组动物连续灌胃给药15天，于第15天末次给药后1h，处死小鼠取脾脏，除去脾脂肪和结缔组织，用注射器针芯经铜网（网目100目）轻轻捻碎脾组织，以pH7.4的磷酸缓冲生理盐水（PBS）制成脾悬液（在光学显微镜下将脾悬液浓度调至5×106个脾细胞/ml），每管加入脾悬液1mL、0.25% SRBC1mL和豚鼠血清混匀，370C水温育1h，1500r.min-1离心5min，取上清液用分光光度计在413nm处测定吸光度A值。
上述各组动物于实验第1天，腹部褪毛3×3cm，然后均匀涂抹5%的DNCB丙酮溶液50ul致敏，次日强化致敏一次，实验第6天，各组小鼠右耳正反两面用1%的DNCB丙酮溶液20ul均匀涂抹，进行攻击，24小时后，将各组小鼠脱颈椎处死，剪下两耳，用直径8mm的钢冲冲下耳片，称重，以左右两耳片重之差为耳肿胀度。
3讨论
穆塞勒斯酒由鲜葡萄、鹿茸、藏红花、小豆蔻、丁香经葡萄酿酒发酵的传统工艺精制而成，含有机体所需的氨基酸、维生素、葡萄糖、铁等多种营养成分。作为一种纯天然饮品，具有强身开胃、补肾的作用，由此提示穆塞勒斯酒可能具有增强机体免疫功能的作用。
本研究从体液免疫、细胞免疫角度，研究了穆塞勒斯酒对正常小鼠免疫功能的影响。迟发型超敏反应（DTH）是依赖T细胞的反应，又称接触性过敏反应。DTH反应中的T细胞，在自身免疫方面起着关键作用。免疫器官在淋巴细胞的成熟和再生中起着重要作用，因此胸腺和脾脏的重量的改变都会对机体免疫机能产生影响，通常以胸腺指数、脾脏指数作为观察指标。研究药物对机体体液免疫的影响的方法常采用溶血素测定法、溶血空斑法，其中溶血空斑法是一类体外检测单个抗体分泌细胞的方法，溶血空斑数可大体反映抗体分泌细胞数量以定量检测药物对抗体分泌细胞的作用。
实验结果发现穆塞勒斯酒能明显增强DNCB致小鼠迟发型超敏反应，提高胸腺指数，说明其能提高机体的细胞免疫功能；可增强血清溶血素生成和脾脏空斑形成细胞溶血能力，显示穆塞勒斯酒能增强正常小鼠的体液免疫功能。综上实验结果，提示穆塞勒斯酒具有增强机体免疫功能的功效。
参考文献
[1]陈东方，王海玉，李立，等.汉方茶对小鼠免疫功能增强作用[J].食品科技，2011，36（12）：48-50.
[2]洪德志，张作法，蒋学，等.桑枝多糖对正常小鼠免疫功能的影响[J].蚕业科学，2011，37（3）：481-485.
[3]周明眉，杨红舟，赵爱华，等.山豆根非生物碱部分对小鼠免疫功能的影响[J].时珍国医国药，2011，12（22）：2954-2955.
[4]聂焱，胡余明，易传祝.鳕鱼肝油对小鼠免疫功能影响的研究[J].实用预防医学，2012，19（1）：125-127.
[5]岑晓江，侯思名，樊传章，等.海枫藤水煎液对小鼠免疫功能的影响[J].细胞与分子免疫学杂志，2011，27（6）：700-701.