NEP1—40基因克隆及蛋白的原核表达和纯化

来源 :中国修复重建外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kanebbsxu
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目的 通过基因工程手段从大鼠脊髓中获取Nogo-66、NEP1-40基因并实现其蛋白的体外表达。方法 从幼年大鼠的脊髓组织中,通过RT-PCR技术获得Nogo-66、NEP1—40基因,将目的基因通过基因连接反应与T载体连接,重组质粒进行基因序列测序,构建PQE30-GST和目的基因的高表达质粒,异丙基-β-D-硫代半乳糖(isopropylthiogalactoside,IPTG)诱导表达,Ni柱纯化,Western—blot法检测纯化的目的蛋白。结果 成功获得大鼠Nogo-66、NEP1-40基因,加
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