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[期刊论文] 作者:常华,花群义,段纲,杨云庆,周晓黎,董俊,尹尚莲,项勋,曾昭, 来源:中国生物工程杂志 年份:2006
参照Genebank中非洲猪瘟VP73基因序列,人工合成的VP73全基因克隆至pMD18-T克隆载体质粒中,采用PCR扩增得到1188bp的VP73基因;将VP73基因片段亚克隆插入pBAD/Thio表达载体,经测序鉴...
[期刊论文] 作者:詹爱军,王新卫,花群义,卢体康,阮周曦,曾少灵,陈兵,秦爱建, 来源:扬州大学学报:农业与生命科学版 年份:2010
用DNAStar软件对GenBank中西尼罗热病毒(WNV)的E基因进行序列分析,设计WNV特异性探针并标记生物素,与荧光编码微球偶联后与病毒E基因的PCR产物杂交反应,用液相芯片检测仪(Liquichip......
[期刊论文] 作者:王宇航,张星艳,花群义,任琴,戴少波,李体远,金宁一,周伯平, 来源:新发传染病电子杂志 年份:2020
目的了解1株登革病毒分离株的来源及进化情况。方法分离获得1株登革病毒,通过对该毒株进行血清型分型鉴定及基因组序列测定,进而通过生物信息学方法对囊膜蛋白E进行系统进化...
[期刊论文] 作者:曾少灵,花群义,张彩虹,曹琛福,秦智锋,阮周曦,杨俊兴,卢体, 来源:动物医学进展 年份:2009
根据GenBank公布的非洲猪瘟病毒(ASFV)结构蛋白基因vp73的序列,设计一对特异性检测引物,扩增片段251bp,建立了检测ASFV的PCR方法。与OIE推荐使用的2组PCR引物进行比对试验,结果表明......
[期刊论文] 作者:刘玉洪,花群义,徐自忠,杨云庆,周晓黎,董俊,尹尚莲,许靖逸, 来源:中国兽医科学 年份:2006
参照GenBank中小反刍兽疫病毒(PPRV)H抗原基因序列,人工合成了PPRVH基因,将其克隆至PUC18-T质粒中,转化E.coli JM109感受态细胞,构建并选择PPRVH基因克隆重组质粒,经核苷酸序列分析正......
[期刊论文] 作者:杨俊兴,花群义,陈焕春,卢体康,吕建强,秦智峰,陶红,林庆燕, 来源:中国兽医科学 年份:2009
用将纯化的蓝舌病病毒(BTV)免疫BALB/c小鼠,分离免疫鼠脾细胞,与SP2/0细胞融合,经间接ELISA筛选,得到了3株(1F5、4E5和6A1)可以稳定分泌抗BTVVP7特异性单抗的杂交瘤细胞株。用纯化的BTV......
[期刊论文] 作者:康文玉,徐自忠,花群义,杨云庆,周晓黎,董俊,尹尚莲,高洪, 来源:中国兽医科学 年份:2006
参照羊痘病毒(CaPV)P32的基因序列,设计合成了2套引物和1条探针,建立了实时荧光定量PCR技术,对细胞培养物、皮肤丘疹、痂皮等组织病料中的GPV进行了特异性检测和敏感性试验。结果......
[期刊论文] 作者:康文玉,徐自忠,花群义,杨云庆,周晓黎,董俊,尹尚莲,高洪, 来源:中国兽医科学 年份:2006
为获得山羊痘病毒膜蛋白重组P32抗原,根据其基因序列设计合成了1对特异性引物,对CaPVP32基因进行了PCR扩增,产物大小约为969bp;产物回收纯化后,将其克隆至pBAD/Thio—TOPO载体中,转......
[期刊论文] 作者:刘玉洪,徐自忠,花群义,高洪,杨云庆,周晓黎,董俊,尹尚莲, 来源:猪业科学 年份:2006
最近几年才兴起的生物芯片、核酸序列依赖性扩增法(NASBA)及荧光定量PCR技术同传统的实验方法相比有灵敏性高。特异性强,快速,高通量等优点,而倍受中外学者的青睐。但仍有好多初学......
[期刊论文] 作者:廖立珊,孙洁,刘建利,花群义,唐金明,林彦星,阮周曦,张彩虹, 来源:上海畜牧兽医通讯 年份:2016
本文设计特异性引物扩增全长p30基因,得到585bp的目的片段,克隆至杆状病毒Bat-To—Bac表达载体pFastBac/NT—TOPO中,转化大肠杆菌DH10Bac进行同源重组,成功构建了含有p30基因的真...
[期刊论文] 作者:刘玉洪,徐自忠,花群义,高洪,杨云庆,周晓黎,董俊,尹尚莲, 来源:畜牧兽医杂志 年份:2006
最近几年才兴起的生物芯片、核酸序列依赖性扩增法(NASBA)及荧光定量PCR技术同传统的实验方法相比有灵敏性高,特异性强,快速,高通量等优点,而倍受中外学者的青睐。但仍有好多初学者......
[期刊论文] 作者:杨俊兴,花群义,陈焕春,陈兵,吕建强,曹琛福,阮周曦,张彩红, 来源:动物医学进展 年份:2009
根据已经扩增的鹿流行性出血病病毒(EHDV)VP7基因序列,设计一对扩增VP7基因特异性引物,用RT~PCR从血清1型EHDV(EHDV-1)总RNA中扩增VP7基因,并将其克隆到原核表达载体pBAD/Thio中,构建了......
[期刊论文] 作者:曾少灵,林庆燕,花群义,张彩虹,阮周曦,杨俊兴,孙洁,秦智锋, 来源:动物医学进展 年份:2010
设计2对引物分别扩增PRRSV的ORF5和ORF7基因,对从云南某猪场分离到的毒株A06进行RT-PCR检测,得到2条特异性扩增带,克隆至pMD18-T载体并测序。将A06株的ORF5和ORF7基因及其推...
[期刊论文] 作者:吕建强,何云蔚,卢体康,花群义,秦智锋,陶虹,杨俊兴,阮周曦, 来源:动物医学进展 年份:2010
伪狂犬病是世界范围内严重影响养猪业发展的重要动物疫病,快速检测是有效防控该病的重要措施之一。为了建立该病的快速分子生物学检测方法,根据GenBank中登录的伪狂犬病病毒g...
[期刊论文] 作者:杨俊兴,花群义,卢体康,吕建强,曹琛福,阮周曦,张彩虹,孙洁, 来源:动物医学进展 年份:2010
用纯化的水疱性口炎毒(VSV)免疫接种Balb/c小鼠,取免疫接种的小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,经间接ELISA筛选,有限稀释法克隆,获得4株稳定分泌抗VSV特异性单克隆抗...
[期刊论文] 作者:钟金栋,花群义,肖荣海,夏雪山,杨云庆,周晓黎,董俊,邓祖洪, 来源:动物医学进展 年份:2006
根据基因库中的口蹄疫病毒(FM—DV),猪水疱病病毒(SVDV)和水疱性口炎病毒(VSV)各基因序列,设计了与FMDV,SVDV和VSV互补的3对特异性引物,对样品中的cDNA模板进行了多重PCR扩增及反应条件......
[期刊论文] 作者:曾昭文,花群义,段纲,周晓黎,董俊,杨云庆,尹尚莲,项勋,常, 来源:中国农学通报 年份:2006
为获得非洲马瘟病毒VP7蛋白.以用于制备AHS血清学诊断试剂并为AHS新型疫苗的构建奠定基础.笔者采用原核表达系统表达VP7蛋白。在GeneBank中查找非洲马瘟病毒VP7基因序列.人工合...
[期刊论文] 作者:曾少灵,秦智锋,阮周曦,花群义,陈书琨,吕建强,张彩虹,曹琛, 来源:中国预防兽医学报 年份:2008
本研究根据山羊、绵羊线粒体中的cytb基因序列,利用ABI primer express3.0和DNAStar软件设计了特异性引物和探针。通过对引物和探针浓度、Mg^2+浓度、dNTP浓度和Taq酶用量以及反...
[期刊论文] 作者:廖立珊,詹爱军,杨俊兴,曾少灵,花群义,余兴龙,秦智锋,林庆, 来源:动物医学进展 年份:2009
用纯化的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)A06株病毒抗原免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与sp2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合。经间接ELISA方法筛选,有限稀释法克隆,获得4株稳定分泌特异......
[期刊论文] 作者:曾昭文,花群义,段纲,周晓黎,董俊,杨云庆,尹尚莲,项勋,常, 来源:中国农学通报 年份:2004
为获得非洲马瘟病毒VP7蛋白,以用于制备AHS血清学诊断试剂并为AHS新型疫苗的构建奠定基础,笔者采用原核表达系统表达VP7蛋白.在GeneBank中查找非洲马瘟病毒VP7基因序列,人工...
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