转化生长因子β1的小干扰RNA对肝纤维化大鼠Smad蛋白表达的影响

来源 :第八届全国肝脏疾病临床学术大会暨第四届中国-印度尼西亚肝病峰会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:q3821713
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  目的:研究转化生长因子(TGF)β 1的小干扰RNA(siRNA)对CCl4诱导肝纤维化大鼠TGF β 1/Smad信号通路的影响。方法:以前期研究的TGF β lsiRNA治疗前后肝纤维化大鼠肝脏组织作为研究对象,分为正常组、模型组、TGF β lsiRNA 0.125 mg/kg组、TGF β lsiRNA 0.25 mg/kg组和阴性对照组(0.25 mg/kg非特异性靶序列)。用免疫组织化学和Western blot检测Smad2、3、4、7的蛋白表达;Real-time PCR法检测Smad2、3、4、7的mRNA表达。结果:免疫组织化学结果显示TGF-β lsiRNA 0.25mg/kg组及0.125mg/kg组Smad2/3、4的蛋白表达量较模型组、阴性对照组明显减少(F值分别为115.538,117.178,p<0.01),TGF-β lsiRNA0.25 mg/kg组较0.125 mg/kg组表达量少(p<0.05)。TGF—β 1 siRNA 0.25 mg/kg组及0.125 mg/kg组Smad7的蛋白表达量较模型组、阴性对照组增加(F=125.34,p<0.01),TGF-β 1 siRNA 0.25mg/kg组较0.125 mg/kg组表达量多(p<0.05),Western blot也显示相同趋势。Real-time PCR结果显示与模型组和阴性对照组比较,TGF β 1 siRNA可以明显抑制Smad2、3、4基因的表达,且TGF-β 1 siRNA 0.25 mg/kg组Smad2、3、4的mRNA表达量(分别为5.998±0.329,5.827±0.781,5.102±0.102)较TGF—β 1 siRNA 0.125mg/kg组(分别为2.870±0.705,2.904±0.414,2.667±0.466)明显减少(p<0.05)。TGF-β 1 siRNA 0.25 mg/kg组及0.125mg/kg组Smad7的mRNA表达量较模型组、阴性对照组增加(F=29.615,p<0.01),TGF-β 1 siRNA 025mg/kg组较0.125 mg/kg组表达量多(p<0.05)。结论:TGF β lsiRNA干扰大鼠TGF β 1表达后,Smad2、3、4表达量明显降低,而Smad7表达仍维持在较高水平,这利于肝纤维化的改善。
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