【摘 要】
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目的：探讨DEC1在多巴胺能神经元(SH-SY5Y)神经毒素(MPP+)诱导细胞凋亡中的作用.方法：SH-SY5Y细胞分别用生理盐水、不同浓度的MPP+处理24 h或48 h.用MTT法和DAPI染色测定细胞增殖和细胞凋亡,Western blot测定DEC1、细胞凋亡相关蛋白以及PI3K/Akt/GSK3β/β-catenin通路信号蛋白的表达.DEC1的过度表达和敲减通过转染表达DEC1质粒和
【机 构】
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南京医科大学,药理学系,南京,210029
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目的：探讨DEC1在多巴胺能神经元(SH-SY5Y)神经毒素(MPP+)诱导细胞凋亡中的作用.方法：SH-SY5Y细胞分别用生理盐水、不同浓度的MPP+处理24 h或48 h.用MTT法和DAPI染色测定细胞增殖和细胞凋亡,Western blot测定DEC1、细胞凋亡相关蛋白以及PI3K/Akt/GSK3β/β-catenin通路信号蛋白的表达.DEC1的过度表达和敲减通过转染表达DEC1质粒和shDEC1质粒.结果：MPP+抑制SH-SY5Y细胞增殖和诱导细胞凋亡的同时降低DEC1的表达；过度表达或敲减DEC1可以减轻或加重MPP+抑制细胞增殖,此外过度表达DEC1可减轻MPP+所致cleaved caspase 3/caspase 3的增高作用但不能减轻MPP+ Bax/Bcl-2的增高作用.MPP+抑制PI3Kpl 10α、p-Akt/Akt、p-GSK-3β/GSK-3β和β-catenin表达,同时伴有DEC1表达,说明MPP+抑制DEC1表达的同时也可抑制PI3K/Akt/GSK-3β通路.这一现象通过用PI3K/Akt/GSK-3β通路激活剂或抑制剂可减轻或加重MPP+抑制PI3K/Akt/GSK3β/β-catenin通路得到两方面的证实.进一步研究发现,单独过表达DEC1可增加PI3Kp 110α,p-Akt/Akt,p-GSK-3β/GSK-3β,and β-catenin的表达,并且明显减轻MPP+抑制PI3Kp110α,p-Akt/Akt,p-GSK-3β/GSK-3β,and β-catenin表达水平.结论：DEC1通过PI3K/Akt通路减轻SH-SY5Y细胞由MPP+所致细胞凋亡作用,DEC1有望成为治疗帕金森病的靶标.
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