【摘 要】
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目的：本研究建立了链脲佐菌素(STZ)诱导的NIT-1 胰岛细胞凋亡模型,分析槲皮素与EGCG 调控miRNA 协同抑制胰岛细胞凋亡的分子机制。方法：通过MTT 方法和DCFH-DA 方法检测槲皮素和EGCG 协同(15 μmol/L+15μmol/L)处理对STZ(6 mmol/L)诱导NIT-1 细胞损伤的细胞活力及ROS 水平的影响；使用生物信息学工具(TargetScan、PicTar、m
【机 构】
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山东农业大学食品学院山东泰安 271018 山东农业大学食品学院山东泰安 271018;奥克兰大学
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目的：本研究建立了链脲佐菌素(STZ)诱导的NIT-1 胰岛细胞凋亡模型,分析槲皮素与EGCG 调控miRNA 协同抑制胰岛细胞凋亡的分子机制。方法：通过MTT 方法和DCFH-DA 方法检测槲皮素和EGCG 协同(15 μmol/L+15μmol/L)处理对STZ(6 mmol/L)诱导NIT-1 细胞损伤的细胞活力及ROS 水平的影响；使用生物信息学工具(TargetScan、PicTar、miRDB 等)预测可能协同调控BCL-2 的潜在靶点miRNA,采用RT-PCR 技术进行定量验证；进一步通过miRNA 过表达和双荧光素酶试验,研究靶点miR-16-5p 与靶基因BCL-2 的互作关系。结果：槲皮素和EGCG 联用对STZ 损伤的胰岛细胞具有协同保护作用,降低了细胞ROS 水平,通过筛选和验证,发现槲皮素和EGCG 可显著抑制miR-16-5p 的表达,过表达miR-16-5p 可显著削弱槲皮素和EGCG 对细胞活力的促进作用,降低了槲皮素和EGCG 促进BCL-2 表达的能力。结论：槲皮素和EGCG 联用可能通过下调miR-16-5p 的表达促进BCL-2 的表达,进而抑制胰岛细胞凋亡。
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