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目的:通过克隆表达和敲除编码犬尿氨酸酶的kyn基因,考察此途径中犬尿氨途径对达托霉素生物合成的影响。方法:将kyn和pET23b载体用NdeⅠ和XhoⅠ双酶切后连接,化入E.coil BL21(DE3)并进行诱导表达,最佳诱导条件为28℃,5h,通过荧光光度计检测检测酶活。结果:KYN蛋白体外存在酶活性,可以将犬尿氨酸分解代谢为邻氨基苯甲酸,进一步证明S.roseosporus中存在犬尿氨酸途径。通过同源双交换构建kyn敲除突变株,培养和检测达托霉素含量。结论:犬尿氨酸途径中大yn基因敲除后,达托霉素的产量与野生型菌株相比上升了的33.75%。这说明了犬尿氨酸途径在达托霉素的生物合成中有着重要影响。