【摘 要】
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[目的]建立一种基于四环素受体蛋白TetR以及DNA序列tetO的四环素类药物残留检测的ELISA方法.[方法]以大肠杆菌XL1-Blue为模版,克隆TetR基因后,在大肠杆菌中诱导表达并进行纯化鉴定.生物素化的tetO结合在预包被了链霉亲和素的ELISA板上,条件优化后,建立以TetR-tetO为基础的四环素类药物残留检测的ELISA方法,并确定其他四环素类药物的交叉反应率.[结果]本实验建立的
【机 构】
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中国农业大学动物医学院,北京100193 河北省石家庄藁城市畜牧水产局,河北石家庄052160
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨
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[目的]建立一种基于四环素受体蛋白TetR以及DNA序列tetO的四环素类药物残留检测的ELISA方法.[方法]以大肠杆菌XL1-Blue为模版,克隆TetR基因后,在大肠杆菌中诱导表达并进行纯化鉴定.生物素化的tetO结合在预包被了链霉亲和素的ELISA板上,条件优化后,建立以TetR-tetO为基础的四环素类药物残留检测的ELISA方法,并确定其他四环素类药物的交叉反应率.[结果]本实验建立的四环素间接竞争ELISA方法的IC50为0.36 ng/ml,线性检测范围为0.10-1.27 ng/ml.与其他常用四环素类药物的交叉反应率介于25.5-1333％.[结论]本研究建立的ELISA方法灵敏度良好,为以后试剂盒的研制以及以TetR-tetO为基础的提他检测方法的建立奠定基础.
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