【摘 要】
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番茄灰霉病是番茄生产上发生普遍、为害严重的气传病害,严重影响番茄的产量和质量。长期大量的施用化学农药容易引起病原菌抗药性问题,降低对灰霉病的防治效果。微生物杀菌剂是防治作物病害行之有效且环境友好的措施之一。微生物防治作物气传病害的机制多样,其中微生物在叶片的定殖能力影响其生防效果。因此,开展生防微生物叶面定殖能力检测有助于明确其生防机理,指导科学用药。HMB19198菌株是本实验室筛选得到的有效防
【机 构】
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河北省农林科学院植物保护研究所河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心农业农村部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室
【出 处】
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病虫防护与生物安全——中国植物保护学会2021年学术年会论文集
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番茄灰霉病是番茄生产上发生普遍、为害严重的气传病害,严重影响番茄的产量和质量。长期大量的施用化学农药容易引起病原菌抗药性问题,降低对灰霉病的防治效果。微生物杀菌剂是防治作物病害行之有效且环境友好的措施之一。微生物防治作物气传病害的机制多样,其中微生物在叶片的定殖能力影响其生防效果。因此,开展生防微生物叶面定殖能力检测有助于明确其生防机理,指导科学用药。HMB19198菌株是本实验室筛选得到的有效防治番茄灰霉生防菌株,为开展HMB19198菌株叶面定殖能力检测,本实验基于HMB19198菌株全基因测序结果,通过将HMB19198菌株的基因组与NCBI库中的基因序列进行比对,获得HMB19198菌株特异性基因片段19198-69,并据此设计获得针对HMB19198菌株的特异性引物和探针。利用56株芽孢杆菌以及番茄叶片DNA为模板进行特异性检测,结果显示,引物和探针针对HMB19198具有特异性。根据引物序列构建重组质粒,利用酶切线性化的质粒为模板建立标准曲线。标准曲线的线性关系良好,相关系数为0.987 9,最低检测限度为102拷贝/反应。利用建立的标准曲线对叶片喷施HMB19198菌株之后的叶片定殖数量进行动态检测,同时与平板计数得到的数据做比较,两者数据具有较高的相关性。接种8天后HMB19198菌株的数量维持在10~7CFU/g叶片。本实验建立的HMB19198菌株实时荧光定量PCR检测体系具有特异性强、灵敏性高的特点,可以快速、准确地检测叶片组织上HMB19198菌株的定殖数量,为番茄灰霉的有效防治提供有效的技术手段。
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