应用PCR法制备地高辛标记探针原位杂交检测绵羊卵巢褪黑素受体Mel1a基因表达

来源 :中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第五届全体会议第十次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:YIFEIFEI
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
采用RT-PCR技术从绵羊下丘脑组织中克隆到褪黑素(melatonin,Mel)受体Mel1aα基因,扩增序列全长650bp。以此为模板,运用随机引物法制备了地高辛(DIG)标记的核酸探针,检测探针的标记效率达到100ng/μL。利用此探针,采用原位杂交(ISH)技术,对卵巢组织Mel1a α基因进行检测。杂交结果显示阳性,证明绵羊卵巢组织存在Mella基因的mRNA表达,说明Mel可直接作用于卵巢组织,对生殖系统进行调控.
其他文献
基因聚合育种是通过传统动物杂交存种技术结合分子信息,将有利基因聚合到同一个基因组,在分离世代,通过分子标记选择含有多个目标基因的个体,再从中选出优良生产性状的个体。
本文通过两个公式证明了两阶段选择时留种率的最佳分配:第一步一个也不淘汰,第二步才按照总的留种率要求选择,可使遗传进展最大化。
MTDFREML,即多性状非求导约束最大似然法,是目前国际上较为流行和准确的遗传参数估计方法。目前,国内报道的遗传参数估计研究,往往测定数据较少,影响了遗传参数估计的准确性。本研究利用MTDFREML对广东温氏集团大量的长白猪生长发育性状测定数据进行分析,应用多性状动物模型估计了生长发育性状的遗传参数和遗传趋势,为长白猪的遗传评估和选育提供参考。
TLR基因家族在先天免疫中扮演着重要的角色,其单核苷酸多态性性疾病的遗传抗性或易感性相关。本研究分析了山羊3个TLR基因在中、外18个山羊群体的SNPs及其连锁不平衡,为山羊TLR基因的进一步研究提供参考。
后基因组时代,基因芯片作为一种先进的、大规模、高通量检测技术,已经广泛用于许多物种的功能基因组学研究。表达谱基因芯片是基因芯片技术中应用得最多的技术之一。然而,农业动物表达谱基因芯片的相关数据共享目前尚不普遍。芯片数据库是解决这一问题的关键。截止目前,本实验室以及其他同行在猪的表达谱基因芯片方面己经积累了很多实验数据,它们都是以原始数据的形式提交到GEO等网站,不利于数据的查询和分析,所以建立猪专
S-烯丙基-L-半胱氨酸亚砜(SACS),又名蒜氨酸是大蒜中一种水溶性烯丙基硫化物。在对动物的研究中,发现蒜氨酸SACS有抗氧化和抗肿瘤的作用。本研究的目的在于探讨在人脐静脉内皮细胞中,蒜氨酸SACS能否抑制肿瘤坏死因子TNF-引起的细胞粘附分子表达量的增加。
本文介绍了蓝耳病和圆环病毒病并发病例的发病情况及临床症状,分析了病理剖检和实验室检查结果,并提出防制措施。
LH在卵母细胞成熟中起着重要的作用,但是在体外成熟培养中如何应用LH才能发挥其最佳的促成熟作用还存在许多的争论。所以本试验就针对这一问题在卵母细胞体外成熟的不同时间段添加LH,观察其核成熟的情况。实验1用无LH的基础成熟液I和添加LH的成熟液II分别培养,在成熟的不同时间点(3h,6h,9h)用醋酸地农红染色观察各自的生发泡破裂率,确定核成熟启动的时间。试验2在体外成熟培养的不同时间段添加LH(0
基于SYBR GreenⅠ技术的实时荧光定量PCR是目前定量检测核酸比较准确的方法之一。本试验目的是建立SYBR greenⅠ实时荧光定量PCR检测巴马香猪TLR2 mRNA的方法。前腔静脉采血,提取外周血单核细胞RNA,反转录,连接载体后制作成标准品质粒。倍比稀释TLR2标准品质粒,建立PCR标准曲线,同时绘制融解曲线,并进行重复性和精密度评价。结果表明:TLR2标准品质粒的标准曲线符合线性要求
β-防御素是先天免疫防御系统中起重要作用的抗微生物肽,为了解中国荷斯坦奶牛气管抗菌肽(TAP)基因序列特征,根据已知牛TAP基因cDNA序列设计1对引物,提取乳腺组织总RNA,采用RT-PCR扩增TAP基因,重组到pMD19-T Simple载体中进行测序和序列分析。序列分析显示:克隆的TAP基因包含完整的开放阅读框(ORF)195bp,与牛TAP基因同源性达93.8%;该ORF编码的64个氨基酸