【摘 要】
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鱼类是主要的致敏食物之一，痕量的过敏原即可能导致过敏患者产生严重的过敏反应.因此，有必要建立灵敏度高、特异性好的针对主要过敏原小清蛋白的检测方法.本研究以纯化的淡水鲢鱼小清蛋白免疫Balb/c小鼠，取小鼠B细胞与骨髓瘤细胞融合后，经筛选获得抗鲢鱼小清蛋白单克隆抗体.ELISA和Western blot结果表明，制备的抗小清蛋白单克隆抗体的效价高，特异性好.利用该单克隆抗体建立了对鱼类小清蛋白进行定
【机 构】
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集美大学生物工程学院 厦门 361021;上海海洋大学食品学院 上海 201306 上海海洋大学食
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鱼类是主要的致敏食物之一，痕量的过敏原即可能导致过敏患者产生严重的过敏反应.因此，有必要建立灵敏度高、特异性好的针对主要过敏原小清蛋白的检测方法.本研究以纯化的淡水鲢鱼小清蛋白免疫Balb/c小鼠，取小鼠B细胞与骨髓瘤细胞融合后，经筛选获得抗鲢鱼小清蛋白单克隆抗体.ELISA和Western blot结果表明，制备的抗小清蛋白单克隆抗体的效价高，特异性好.利用该单克隆抗体建立了对鱼类小清蛋白进行定量检测的竞争性ELISA法.该方法检测限可达0.04 mg/kg食物，定量限为0.3 mg/kg食物；组内差异系数和组间差异系数分别为4.4％和8.4％，表明建立的检测方法重复性较好.将建立的竞争性ELISA法用于检测不同鱼类肌肉中小清蛋白的含量，结果显示，白色肉中小清蛋白的含量约为红色肉的4～20倍.采用本方法以鲢鱼丸为样品研究漂洗次数对鱼肉制品中小清蛋白含量的影响，发现漂洗可有效降低小清蛋白含量.但是，即使经过10次漂洗后的鱼丸中仍然含有少量小清蛋白.本研究建立的检测方法有望用于水产品加工过程及制品中痕量鱼类过敏原小清蛋白的监测.
其他文献
本实验以糯米为原料,采用酶解法对其淀粉进行水解,对糯米粉溶液的酶解动力学进行研究,结果表明：在温度60℃酶解速率最快,酶解活化能为4.60 kJ/mol,底物浓度对酶解速率的影响遵循米氏方程,并得出α-淀粉酶水解糯米淀粉的动力学方程,该方程可以用于确定不同温度下,糯米的酶解速率,从而确定某一水解时间下还原糖的生成量.
目的：抗冻蛋白具有抑制冰晶生长、减少细胞损伤及保持产品原有组织结构、质地和品质的特点，本研究旨在利用多种分离手段获得一种天然、安全、高活性的抗冻多肽并对其细菌低温保护活性进行研究.方法：利用热水抽提法提取鲨鱼皮胶原蛋白，酶法水解后以细菌低温保护活性为指标筛选最适宜蛋白水解酶及酶解时间，利用Sephadex G-50凝胶过滤色谱、SP-Sephadex C-25强阳离子交换色谱等分离手段进行分离，得
以山药为试验原料，对其进行不同处理，得到整个不切分、饼状切片(2cm×2cm×2.5cm)、薄片(2cm×2cm×1cm)、碎片(0.5cm×0.5cm×0.5cm)四种样品，将这四种样品在4℃下贮藏，每2d进行各项生理指标的测定.所测生理指标包括：失重率、Vc含量、总酚含量、类黄酮含量、过氧化氢酶活性、还原型谷胱甘肽含量、过氧化物酶活性及多酚氧化酶活性.研究结果表明：与不切割的山药相比，切割会导
本文通过硫酸铵沉淀、DEAE-Cellulose离子交换层析、Sepharose CL-6B凝胶过滤层析和制备型电泳等分离纯化技术,从Aspergillus ficuum JNSP5-06菌株发酵液中分离得到三种外切菊粉酶(分别定义为Exo-Ⅰ、Exo-Ⅱ和Exo-Ⅲ)和两种内切菊粉酶(分别定义为Endo-Ⅰ和Endo-Ⅱ).SDS-PAGE分析表明：纯化的这五种菊粉酶均为单一谱带.这五种菊粉酶E
非发酵剂乳酸菌可用于加速干酪成熟，其氨肽酶活性和自溶度是影响干酪成熟的重要因素，本研究的目的是利用基因组改组方法筛选出促进干酪成熟的非发酵剂乳酸菌.采用紫外线和亚硝基胍两种传统的诱变方法对植物乳杆菌进行诱变，通过检测自溶度、氨肽酶、产酸能力指标获得6株氨肽酶活性和自溶度均有所提高的突变菌株.以获得的突变菌株为出发菌株，应用灭火双亲原生质体融合后致死损伤得到的互补获得活性融合子的方法，对其进行基因组
以蓝金蓝莓品种为实验原料,将采后的鲜果分成两组并分别贮藏在0℃和10℃的恒温冷库内,贮藏期间进行呼吸强度、颜色变化、腐烂率、可溶性固形物含量的测定并研究各指标的变化趋势,旨在为蓝莓保鲜技术的进一步研究提供可靠基础数据。试验结果表明：两组蓝莓的呼吸强度、腐烂率、可溶性固性物含量均随着贮藏时间的延长而升高,其中10℃条件下贮藏的蓝莓呼吸强度和腐烂率均明显高于0℃,而0℃的可溶性固形物含量略高于10℃的
为探讨壳聚糖涂膜冷藏保鲜美国红鱼片的保鲜效果，本实验采用不同浓度壳聚糖(0、1％、1.5％、2％、3％)对美国红鱼片涂膜后于4℃冷藏，实验每隔4天取样品分析微生物(细菌总数)和理化(pH值、TBA、TVB-N和K值)、感官特性(质构、感官评分)等指标，并与未经过涂膜样品相对比，研究壳聚糖涂膜对美国红鱼片品质变化的规律及货架期的影响.结果表明，利用壳聚糖涂膜的处理组保鲜效果明显优于对照组，其中壳聚糖
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在淀粉酯化改性的研究中,无论是采用传统的化学法还是酶法,酯化产物的分析是至关重要的.为了更准确、更真实的测定长链脂肪酸淀粉酯的取代度,本文建立起甲醇醇解-气相色谱分析测定取代度的方法.首先,对长链脂肪酸淀粉酯(30mg)进行甲醇醇解获得相应的长链脂肪酸甲酯,然后将此脂肪酸甲酯进行气相色谱分析测定含量,最后通过公式计算出长链脂肪酸淀粉酯的取代度.在此方法中,长链脂肪酸淀粉酯甲醇醇解的程度对取代度测定
本实验旨在建立一种将环介导等温扩增(LAMP)与荧光染料Propidium Monoazide (PMA)相结合的检测方法,能够有效的区分乳中沙门氏菌的死活菌.通过优化PMA孵育温度、曝光时间以及PMA浓度来确定PMA最佳处理条件.以PMA-LAMP法和PMA-PCR法分别检测乳中的沙门氏菌考察本方法的灵敏度.最后分别以四株沙门氏菌和其他23株致病菌的DNA提取物为模板,进行LAMP特异性实验.结