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目的：通过构建RAW264.7细胞（小鼠巨噬细胞）的细胞脓毒症模型，探讨Hippo信号通路在脓毒症中的作用机制。 方法：1.运用脂多糖（内毒素（lipopolysaccharide，LPS））刺激RAW264.7细胞构建细胞脓毒症模型，将未用LPS刺激的RAW264.7细胞分为正常组(normal)，将LPS刺激的RAW264.7细胞分为脓毒症组（sepsis）。通过细胞计数检测normal组与sepsis组细胞增殖情况，免疫荧光染色(Immunofluorescence technique，IF)后，运用共聚焦显微镜对Yes相关蛋白(Yes-associated protein，YAP)及磷酸化的Yes相关蛋白(Phosphorylated Yes-associated protein，p-YAP)进行定位观察，蛋白印迹法(Western blot)检测normal组与sepsis组YAP及p-YAP的表达情况。用逆转录荧光定量聚合酶链锁反应(RT-qPCR)法检测normal组与sepsis组TAZ、CD206、NOS2、IL-6、IL-1β及TNF-α基因的表达情况。2.用慢病毒构建YAP蛋白RNA干扰载体，慢病毒转染RAW264.7细胞，将转染后的细胞分为干扰组25(RNAi25)、干扰组26(RNAi26)、干扰组27(RANi27)及空载组(negaive)组，通过荧光显微镜观察，判断细胞转染效率。用western blot检测转染后YAP蛋白的表达情况，筛选出有效的转染组，然后用western blot检测有效转染组、空载组、正常组中YAP蛋白表达情况。3.用LPS刺激慢病毒转染后RAW264.7细胞，并将其分为YAP干扰组(RNAi)，用LPS刺激未转染的RAW264.7细胞，将其分脓毒症组(sepsis)。用免疫荧光染色检测YAP蛋白的表达情况，用RT-qPCR检测sepsis组与RNAi组NOS2、TAZ、CD206、LI-6、IL-1β及TNF-α基因的表达情况，运用CCK-8检测sepsis组与RNAi组细胞的增殖情况，运用流式细胞仪中的Annexin V/7-AAD染色检测sepsis组与RNAi组细胞的凋亡指数。 结果：1.LPS能刺激RAW264.7细胞增殖，YAP蛋白主要表达于细胞核中，p-YAP主要表达于细胞质中，且YAP蛋白在sepsis组中表达高于normal组，p-YAP在sepsis组中表达低于normal组，TAZ和CD206基因在sepsis组表达低于normal组，NOS2、LI-6、IL-1β和TNF-α在sepsis组表达高于normal组。2.慢病毒干扰载体能转染RAW264.7细胞，转染效率能达80％以上，RAW264.7细胞被慢病毒转染后能抑制YAP蛋白的表达，空载的慢病毒转染后的RAW264.7细胞与未被转染RAW264.7细胞中YAP蛋白表达无明显差异。3.TAZ、CD206、NOS2及LI-6基因在RNAi组表达高于sepsis组，IL-1β和TNF-α基因在RNAi组表达低于sepsis组。通过流式细胞仪检测发现RAW264.7细胞在RNAi组中凋亡指数比sepsis组低。通过CCK-8法发现RNAi组与sepsis组中细胞增殖无影响。 结论：1.LPS能刺激RAW264.7细胞构建细胞脓毒症模型，YAP蛋白主要表达于细胞核中，而p-YAP表达于细胞质中，YAP可能是通过去磷酸化参与脓毒症的发生。脓毒症时，促炎细胞因子基因IL-6、IL-1β及TNF-α高表达，hippo通路中的TAZ基因低表达，M1型巨噬细胞标志物NOS2基因高表达，M2型巨噬细胞标志物CD206基因低表达。2.慢病毒介导的YAP干扰载体能抑制RAW264.7细胞中YAP的表达，慢病毒载体不能影响YAP的表达。3.YAP经RNAi的干扰后，在脓毒症是促进细胞凋亡，而不是促进细胞增殖，能抑制M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞转化，参与促炎因子IL-1β、TNF-α的释放，可能参与IL-6的释放。