西藏罗伦隐球酵母对水果采后病害的防治效果及相关机理研究

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利用拮抗酵母防治水果采后病害对于保证食品安全及生态环境具有重要意义。但由于其易受环境条件影响,对病害的防治效果与化学杀菌剂差距较大等原因,限制了其商业化推广使用。因而提高现有菌株的生防效力或筛选抗逆能力强、生防效力更好的拮抗微生物是果蔬采后病害生物防治领域的研究热点。本课题从西藏地区分离筛选获得两株在低温条件下对水晶梨青霉病和樱桃番茄灰霉病具有较好防治效果的拮抗酵母,经鉴定分别为胶红酵母(Rhodotorula mucilaginosa)和罗伦隐球酵母(Cryptococcus laurentii)。本文对其中的一株西藏罗伦隐球酵母的安全性、低温条件下对不同水果主要病害的生防效果进行了评价,初步探讨了其在低温条件下对水果采后病害防治的作用机理,利用比较转录组学方法分析了西藏罗伦隐球酵母在常温与低温生长条件下的分子调控机制,并研究了其对水果自然腐烂的抑制效果和果实品质的影响。主要研究结果如下:(1)从西藏地区获得两株在低温条件下具有较好生防效果的拮抗酵母,经鉴定分别为胶红酵母和罗伦隐球酵母,保藏于中国普通微生物菌种保藏中心,菌种编号为CGMCC 10223和CGMCC 10222。(2)西藏罗伦隐球酵母的安全性评价试验结果初步证明其为实际无毒类。(3)测定了西藏罗伦隐球酵母在低温条件下对水晶梨、苹果、樱桃番茄、柑橘和冬枣五种水果主要采后病害的防治效果。结果表明,其在低温条件下的生防效果与酵母悬浮液浓度大小呈正比,最佳生防浓度为1×108cells/ml。(4)初步探讨了西藏罗伦隐球酵母在低温条件下的生防作用机理,结果显示,其在低温条件下具有较好的生防效果可能与细胞具有较好的胁迫耐受能力有关。酵母细胞内含有较多抗逆物质(海藻糖与脯氨酸)可能对此起重要作用,但细胞膜流动性对抗逆性无明显影响。(5)利用比较转录组学方法研究了实验室罗伦隐球酵母ZJU10与西藏罗伦隐球酵母LB2在常温与低温生长条件下的基因表达差异。结果表明,常温条件下,与实验室罗伦隐球酵母相比,在西藏罗伦隐球酵母中共有430个显著差异表达基因,其中179个上调表达,251个下调表达;低温条件下则共有176个显著差异表达基因,其中126个上调表达,50个下调表达。常温条件下的差异表达基因多与两种酵母的固有组成及特性相关。低温条件下两种酵母的基因表达差异明显,西藏罗伦隐球酵母中上调表达基数量较多,说明其对低温胁迫的应答更加积极,其中8个基因可能与其低温耐受能力相关,这些基因主要参与了硫代谢、锌离子代谢、细胞防御机制、细胞壁完整性和糖类代谢。(6)西藏罗伦隐球酵母对果实储藏的自然腐烂具有较好抑制效果,而对果实品质无明显影响。
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