【摘 要】
:
维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)是一种重要的水产病原菌,对水产养殖业造成巨大经济损失,因此研制水产疫苗是必需的,由于其接种受限因素较多,开发新型口服疫苗并选择合适抗原对水
论文部分内容阅读
维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)是一种重要的水产病原菌,对水产养殖业造成巨大经济损失,因此研制水产疫苗是必需的,由于其接种受限因素较多,开发新型口服疫苗并选择合适抗原对水产疫苗的研制具有重要意义,麦芽糖孔蛋白作为一种特殊的外膜蛋白进行特异性结合,从而诱导机体释放细胞因子,因此可以作为候选抗原应用于基因口服疫苗的研究。 本试验通过克隆A.veronii TH0426株Malt基因,并构建原核表达系统和细胞表面表达型重组干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)Lc-MCS-Malt和分泌表达型Lc-pPG-Malt,通过Western blotting验证蛋白表达。结果显示:经过PCR能扩增得到1314 bp Malt基因片段,Western blotting 条带清晰,蛋白大小45 kDa;通过荧光显微镜可见明显荧光信号的是Lc-MCS-Malt。 为评估重组 L.casei 的免疫保护效果,本试验以鲫鱼作为试验动物,将重组L.casei经过乳糖诱导后混合海藻酸钠包被颗粒饲料投喂鲫鱼,在免疫前0 d、免疫后7、16、25和34 d采组织和血液,检测免疫相关指标;检测重组L.casei定植情况,单独设定试验组,连续投喂7 d,空腹28 d后无菌采集前、中和后肠,利用抗性平板进行计数;攻毒检测免疫保护率。采用ELISA方法检测血清中IgM、ACP、AKP、SOD、IL-10、IL-1β、TNF-α、IFN-γ指标。结果表明:各项指标经过口服免疫后都有所提升并差异明显,通过口服免疫方式鲫鱼能够诱导鲫鱼体液免疫分泌 IgM 和各项免疫指标;同时白细胞吞噬活性与分化能力都有所加强;利用qRT-PCR检测各组织IL-10、IL-1β、TNF-α和IFN-γ细胞因子的转录水平,结果表明:重组 L.casei 通过定植肠道刺激黏膜,使细胞因子的转录水平呈上调趋势,从而提升鲫鱼免疫力,定植情况也表明经过28 d的空腹,肠道内仍存在重组L.casei,表明其定植能力良好;攻毒后观察28 d,发现重组L.casei能有效缓解A.veronii造成的急性感染,在一定程度上起到保护作用。 综上所述,本试验成功构建2种不同表达类型的重组L.casei,Lc-MCS-Malt和Lc-pPG-Malt,经过口服免疫的方式可诱导机体产生体液免疫应答,IgM含量上调并影响相关酶活性,同时促进白细胞分化和加强其吞噬活性,增强机体体液免疫应答,各组织细胞因子的转录水平也呈上调趋势,重组 L.casei 能有效保护鲫鱼并提高机体免疫力,试验结果为水产口服乳酸菌疫苗的研制提供理论基础。
其他文献
【摘要】结合当前语言教学领域内的最新理论和方法,与对外汉语教学实践相结合,提出了以行动研究为动力,以任务型教学为核心,以培养学生的研究性学习能力为目标,以网络为技术支持的对外汉语教学模式,试图建立一个发展的,互动的,民主的,开放的对外汉语课堂。 【关键词】任务型教学 行动研究 研究性学习 对外汉语教学模式 【中图分类号】G64 【文献标识码】A 【文章编号】2095-3089(2013)11-
该实验旨在研究DES与仓鼠附睾细胞凋亡的诱导效应及其对附睾多胺代谢途径的体外调控作用,探讨DES影响附睾功能的作用机制.实验以仓鼠为研究对象,采用皮下注射方式将一定剂量
【摘要】综合实践活动课程自2001年在全国中小学实施以来,一直成为教改关注的热点。我市实施的现状却是:部分语文教师实施综合实践活动的意识不强,认为开展语文综合实践活动花费时间太多,影响学生学习课本知识,同时,许多家长对语文综合实践活动的作用认识不够,认为学生学习课本知识就够了。因而我市大部分学校语文综合实践活动不能有效地开展。 【关键词】综合实践 活动课 能力 【中图分类号】G633.3 【文
【摘要】在中职语文散文教学中,引导学生品味和体悟文章中的情感:品悟语言、品悟情感、品悟意境。 【关键词】中职语文 散文教学 研究 【中图分类号】G71 【文献标识码】A 【文章编号】2095-3089(2013)11-0053-01 在中职语文教学中,散文类教材量较大,学生的阅读兴趣也相对较高,散文教学注重鉴赏,以美读和研讨的教学方式帮助学生更加理解作者的思想情感,在品味散文语言魅力的同时领
选修的意义就是拓宽学生的知识面,不断提高学生对文学的兴趣,因为本身学习语言类的东西就比较乏味的,选修课就是为了提起学生的兴趣,培养学生的特长,《史记》作为我国记事较
机电安装施工企业为了企业的发展,为更多了揽到工程,多是以低价中标,但中标后如何在保证工程质量的前提下,在有限的空间内为企业赢得更大的利益,如何在机电安装工程中有效的
太阳能饮用热水系统利用太阳能集热器加热热水,将其作为饮用水的热源对饮用水进行预热,以达到节能减排的目的,为实现太阳能饮用热水系统的控制要求,以AT89S52单片机为控制中
树突状细胞(DC)是最强的抗原递呈细胞,可以激活幼稚T细胞,打破外周免疫耐受,进而诱导肿瘤免疫应答。对于复发或者进展性前列腺癌患者,以DC为基础的免疫治疗可延长患者生存期
【摘要】由于语文教学多年遗留下来的问题以及应试教育的影响,语文教学长期处于听说教学缺少的状态,笔者从口头表达能力对于现代初中生的重要性入手,分别从口头表达在课堂的系统科学性训练,在课后的加强巩固性训练,在生活的拓展延伸性训练三个方面,探讨了初中生口头表达能力的培养问题。 【关键词】口头表达能力 培养 课堂 课后 生活 【中图分类号】G633.3 【文献标识码】A 【文章编号】2095-3089
进入高三的总复习,要摆脱那种与高一上新课式的课堂教学,尝试着改变从第一单元第一课第一框到第四单元最后一框复习的顺序的模式,为此教师要认真深入模块的知识框架和考试说