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目的:通过观察培美曲塞（P）与吉西他滨（G）/厄洛替尼（E）不同组合.先培美曲塞后吉西他滨（P→G）、先吉西他滨后培美曲塞（G→P）、培美曲塞同时联合厄洛替尼（P+E）、先培美曲塞后厄洛替尼（P→E）处理后诱导人肺腺癌细胞株A549凋亡的效果及其协同作用,探讨培美曲塞分别与吉西他滨和厄洛替尼组合的较佳方案。方法:以人肺腺癌细胞株A549为研究对象,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测P、G、E、P→G、G→P、P+E、P→E不同处理后对A549细胞增殖抑制的影响并计算半数抑制浓度(IC50)、联合指数（CI）。应用流式细胞术检测上述不同处理组对A549细胞周期的影响及细胞凋亡率的变化。用western blot法检测各组P-Akt蛋白表达的差异,并对P-Akt蛋白表达量和细胞凋亡率之间的关系进行直线相关分析。结果:（1）P、G、E、P→G、G→P、P+E、P→E不同处理后均可抑制A549细胞增殖,随药物浓度的增加,其抑制率增加（P<0.05）;P→G、G→P与P+E、P→E各组对A549细胞可产生协同作用,合用指数（CI）<1,且P→G组较G→P组协同作用更明显（P<O.05）,P+E组较P→E组在抑制率0.6至0.8时协同作用更明显（P<0.05）。（2）P、G、E、P→G、G→P、P+E、P→E各组均可引起细胞周期改变,P、G组主要使S期细胞所占比例增加,E主要使G0/G1期细胞所占比例增加,与对照组相比有统计学意义（P<0.05）。P→G组、G→P组与P+E组、P→E组S期细胞所占比例分别较对照组及药物单用时明显增多,差异有统计学意义（P<0.05）,且P→G组较G→P组S期细胞所占比例更多（P<O.05）,P+E组与P→E组无明显差异（P>0.05）。（3）P、G、E、P→G、G→P、P+E、P→E各组均可引起A549细胞凋亡率增加,与对照组相比有统计学意义（P<0.05）;P→G组、G→P组与P+E组、P→E组细胞凋亡率较药物单用时明显增多,且分别大于两者之和,差异有统计学意义（P<0.05）;P→G组较G→P组细胞凋亡更多（P<0.05）,P+E组与P→E组无明显差异（P>0.05）;（4）P、G、E、P→G、G→P、P+E、P→E不同处理后均可使A549细胞P-Akt蛋白表达减少,与对照组相比有统计学意义（P<0.05）;P→G组、G→P组与P+E组、P→E组P-Akt蛋白表达较药物单独作用时减少,且分别大于两者减少之和,差异有统计学意义（P<0.05）;P→G组较G→P组P-Akt蛋白表达量更少,差异有统计学意义（P<0.05）,P+E组似乎较P→E组P-Akt蛋白表达量更少,但差异无统计学意义（P>0.05）。直线相关分析发现A549细胞P-Akt蛋白表达量与细胞凋亡率呈负相关（P<0.05）。结论:多靶点抗叶酸药物培美曲塞分别与抗代谢药物吉西他滨及表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKIs）厄洛替尼不同组合P→G、G→P、P+E、P→E可协同诱导肺腺癌A549细胞的凋亡,可能与P13K-Akt信号传导途径有关。且P→G方案较G→P方案协同作用明显,P+E方案与P→E方案协同作用无明显差异。