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猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)又称猪蓝耳病,是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)所引起的以妊娠母猪早产、流产、死胎、木乃伊胎,仔猪咳嗽、呼吸困难、呼吸急促为临床症状,发病率和死亡率都极高的一种急性、接触性传染病。PRRS传播迅速,给我国养猪业带来了巨大的经济损失。PRRSV存在抗体依赖性增强作用(ADE)及中和抗体延迟的特点,故PRRS疫苗免疫机体所产生的抗体在PRRS的保护性免疫中发挥一定的作用,但是这种保护作用并不完全,即PRRSV疫苗免疫抗体水平的高低与免疫保护不具有完全的相关性,所以PRRSV疫苗免疫抗体水平的高低不是衡量机体抗PRRSV感染能力的唯一标准。PRRSV中和抗体具有保护性作用,但由于其主要检测方法中和试验费时费力,而其他检测方法又价格昂贵,因此有必要结合PRRSV细胞免疫的特点筛选与机体中和抗体产生相关的免疫因子,为更简便的评价PRRS疫苗的临床免疫保护效果提供理论依据。miRNA是一类小分子非编码单链RNA,成熟的miRNA在细胞内和靶基因的3’端非编码区互补,相关研究表明,宿主细胞miRNA是机体先天性/获得性免疫中重要的调节因子。本研究从某种猪场筛选PRRSV抗原抗体阴性、CSFV抗原抗体阴性、PRV抗原抗体阴性和PCV抗原抗体阴性的相对洁净的雌性仔猪5头。将试验动物单独饲养在一个经过灭菌的猪舍中,饲喂的饲料和所用工具都符合规定,经过消毒后饲养人员才能进出猪舍。在试验第1天,将试验动物分别颈部肌肉注射CH-1R株弱毒疫苗,2头份/头,并于接种疫苗前、接种疫苗后第14天、第21天、第28天、第35天、第42天、第49天、第56天、第63天、第70天、第77天采集血液样品,采用ELISA和血清中和试验分别检测PRRSV疫苗免疫抗体和中和抗体的产生情况,并采用Real-time PCR检测与细胞免疫相关的miRNA和与抗体产生具有相关性的黏附因子的转录水平。5头猪免疫前、免疫后2-11周ELISA抗体平均值分别为0.20、0.54、1.43、2.46、2.25、1.54、1.71、2.11、2.51、2.80、2.14,表明实验猪接种CH-1R株弱毒疫苗后均产生了PRRSV抗体,抗体值在第2-4周开始呈逐渐上升趋势,4-6周有一个小幅度的降低,第7-10周免疫抗体值逐渐上升,11周后抗体值降低,说明PRRSV免疫血清抗体值呈梯度性的变化,体现了抗体消长规律。抗体产生相关的黏附因子检测结果显示,IL-4、CD19和CCR4的转录水平在第0-6周整体上呈上升趋势,在7-10周呈下降趋势,第11周除IL-4外均开始升高。黏附因子CXCR5的转录水平在0-7周整体呈下降趋势,8-11周整体呈上升趋势。中和抗体检测结果显示,所有实验动物在0-4周均未产生中和抗体,从第5周开始产生中和抗体,中和抗体效价逐渐上升,第8-9周中和抗体效价达到最高值为1:32,10-11周中和抗体效价开始降低为1:16。microRNA检测结果显示,2-8周miR-26a和miR-155的转录水平逐渐上升,且显著高于let-7f和miR-181a,在第8周达到最高值,此后从第9-11周逐渐下降,表明miR-155和miR-26a与中和抗体的产生变化趋势基本一致。综上,miR-155、miR-26a与PRRSV中和抗体产生具有基本相同的变化趋势,可以初步作为评价PRRSV中和抗体产生相关的免疫因子,为PRRS的免疫保护性抗体监测提供更为简便的评价指标,对PRRS中和抗体的监测具有重要的临床指导意义。