【摘 要】
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目的:探讨BMP-7基因转染骨髓间充质干细胞（Bone mesenchymal stem cells,BMSCs）移植治疗大鼠脊髓损伤的作用。方法:采用密度梯度离心法结合全骨髓贴壁法分离、培养BMSCs。在体外培养至第3代后,流式细胞仪检测所得到细胞表面标志物CD44和CD29,成脂诱导及成骨诱导检测细胞是否具有干细胞分化能力。用LV-BMP7-GFP结合体对BMSCs进行转染,评估绿色荧光蛋白G
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目的:探讨BMP-7基因转染骨髓间充质干细胞（Bone mesenchymal stem cells,BMSCs）移植治疗大鼠脊髓损伤的作用。方法:采用密度梯度离心法结合全骨髓贴壁法分离、培养BMSCs。在体外培养至第3代后,流式细胞仪检测所得到细胞表面标志物CD44和CD29,成脂诱导及成骨诱导检测细胞是否具有干细胞分化能力。用LV-BMP7-GFP结合体对BMSCs进行转染,评估绿色荧光蛋白GFP的表达情况。造模后随机分为假手术组（A组）、对照组（B组）、BMSCs组（C组）、LV-BMP7-BMSCs组（D组）,于术后第3天进行治疗,治疗后1d、3d、7d、14d、21d、28d,采用BBB评分标准,对治疗后大鼠双下肢运动功能恢复情况进行评估。治疗28d后,采用免疫组化、免疫荧光检测NF-200、GFAP的表达情况,采用辣根过氧化物酶逆行示踪法检测神经元回路的重塑情况。结果:脊髓损伤治疗后第14d、21d、28d,D组BBB评分高于B组、C组（P<0.05）。免疫组化检测D组NF200表达水平高于A组、B组、C组（P<0.05）。与A组相比,B组、C组、D组GFAP表达水平升高（P<0.05）;三组间进行比较,GFAP表达水平无差异（P>0.05）。免疫荧光检测D组NF-200红色荧光面积百分比高于A组、B组及C组（P<0.05）;与A组相比,B组、C组及D组GFAP绿色荧光面积百分比较高（P<0.05）,但B组、C组及D组之间进行比较,GFAP绿色荧光面积百分比无统计学差异（P>0.05）。D组被目辣根过氧化物酶阳性标记的神经细胞数高于B组和C组（P<0.05）。结论:BMP-7基因转染BMSCs后移植治疗大鼠脊髓损伤,可促进大鼠脊髓损伤神经元修复以及神经元回路重塑,有利于大鼠脊髓损伤后神经功能的恢复,为BMSCs移植治疗SCI最终应用于临床提供理论基础。
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