【摘 要】
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HD-Zip转录因子是包含同源域(HD)和亮氨酸拉链(LZ)基序的一个植物特异性蛋白质的大家族,是一类与生长发育有关的转录因子,为高等植物所特有,在光信号转导、非生物胁迫及器官
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HD-Zip转录因子是包含同源域(HD)和亮氨酸拉链(LZ)基序的一个植物特异性蛋白质的大家族,是一类与生长发育有关的转录因子,为高等植物所特有,在光信号转导、非生物胁迫及器官发育等生命活动中发挥重要作用。本文克隆了小黑杨PsnHB22基因,并对其进行了生物信息学分析,研究了 PsnHB22蛋白与PsnCYCD1;1蛋白的相互作用情况,以及转PsnHB22基因的烟草的生物学特性。主要结果如下:(1)小黑杨PsnHB22基因CDS序列全长为549 bp,编码一个由182个氨基酸残基组成的蛋白序列,蛋白是不含信号肽和跨膜螺旋区的不稳定亲水性蛋白,核苷酸区域内有ZF-HD-dimer结构域和homeo-ZF-HD结构域;分析系统进化树发现,PsnHB22蛋白与同属的毛果杨(Populus trichocfarpa)和不同属的小垫柳(Salix brachista)同源性较高。(2)构建pGBKT7-PsnHB22酵母表达载体,通过实验证明PsnHB22蛋白无自激活活性且对Y2Hgold菌株不存在毒性影响;通过酵母双杂交实验证明PsnHB22蛋白与PsnCYCD1;1蛋白存在相互作用,推测PsnHB22基因可能参与PsnCYCD1;1基因调控植物细胞分裂及生长发育的过程。(3)构建pROKⅡ-PsnHB22植物过表达载体,农杆菌介导法遗传转化烟草,PCR检测结果显示PsnHB22基因已整合到烟草基因组中。转基因烟草株高明显低于野生型;部分转基因烟草叶片狭窄,叶宽相较野生型具有显著差异,且叶片表皮细胞变小;由此推测PsnHB22基因可能在植株高生长和叶片的形态建成过程中发挥重要作用。(4)测定转基因烟草和野生型烟草相同部位叶片的叶绿素含量,结果表明,转基因烟草叶绿素含量明显高于野生型,推测PsnHB22基因可能参与光合作用的过程。
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