论文部分内容阅读
本文建立了可视化的免疫亲和凝胶检测柱法快速检测食品中的伏马毒素、黄曲霉毒素、赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮等真菌毒素。实现了快捷、高效、灵敏的检测食品中的真菌毒素。溴化氢琼活化的脂糖凝胶偶联真菌毒素抗体制备检测层;偶联HRP抗体制备控制层:用HRP催化TMB底物溶液的显色反应作为检测柱的显色系统。本研制的伏马毒素免疫亲和凝胶检测柱、黄曲霉毒素疫亲亲和凝胶检测柱、赭曲霉毒素疫亲亲和凝胶检测柱和玉米赤霉烯酮免疫亲和凝胶检测柱检测的检测限分别为10 μg/L,5 μg/L,2 μg/L,5 μg/L。免疫亲和凝胶检测柱的特异性实验表明,伏马毒素免疫亲和凝胶检测柱对检测伏马毒素具有良好的特异性,可以同时检测FB1、FB2、FB3;黄曲霉毒素免疫亲和凝胶检测柱对检测黄曲霉毒素具有良好的特异性,可以同时检测AFB1、AFB2、AFG1;赭曲霉毒素A免疫亲和凝胶检测柱对检测赭曲霉毒素A具有良好的特异性;玉米赤霉烯酮免疫亲和凝胶检测柱对检测玉米赤霉烯酮具有良好的特异性,其他常见的真菌毒素对实验建立的方法检测相应的目标物没有影响。在实际样品检测中,针对不同的样品和检测目标物建立了 C-18硅胶和NH2硅胶净化柱净化样品提取液和简单稀释的方法消除样品的基质影响。对赭曲霉毒素A免疫亲和凝胶检测柱和玉米赤霉烯酮免疫亲和凝胶检测柱,建立起了稀释样品提取液的方法消除基质影响。对于液体样品,经过简单稀释即可用于实验。建立的伏马毒素免疫亲凝胶检测柱对谷物样品中伏马毒素B1的检测限为20 μg/kg,对于啤酒样品和白酒样品中伏马毒素B1检测限为30 μg/L;黄曲霉毒素免疫亲凝胶检测柱法对谷物样品中黄曲霉毒素B1的检测限为20 μg/kg,对于啤酒样品和白酒样品检测限中黄曲霉毒素B1为15 μg/L;赭曲霉毒素A免疫亲凝胶检测柱法对谷物样品中赭曲霉毒素A的检测限为12 μg/kg,对于啤酒样品和白酒样品中赭曲霉毒素A检测限为6 μg/L;玉米赤霉烯酮免疫亲凝胶检测柱法对谷物样品中玉米赤霉烯酮的检测限为50 μg/kg,对于啤酒样品和白酒样品中玉米赤霉烯酮检测限为15 μg/L。