本研究通过在体小肠推进实验、离体器官灌流技术、游离结肠平滑肌细胞测量技术和建立冷束缚应激引起的胃肠动力紊乱模型，并运用放射免疫分析方法以及比色法，以胃内色素残留率、小肠推进率、离体肠段肌张力变化、单个结肠平滑肌细胞长度变化以及SP、VIP、NO含量的变化等为观察指标，从在体、离体器官、细胞分子等不同水平观察银杏叶提取物（EGb）对肠平滑肌动力的影响并分析其机制，为探索因肠平滑肌运动机能障碍和胃肠动力紊乱所致疾病的发病机制提供基础依据，亦为充分利用银杏叶这一天然药物资源、开发研制一类用于调节、改善胃肠动力，防治因胃肠动力紊乱所致疾病（如肠易激综合症等）的药物提供科学的理论依据。 1 EGb对豚鼠单个结肠平滑肌细胞的影响 1．1不同浓度的EGb对结肠平滑肌细胞的影响用不同浓度的EGb(0.11～3.5g·L^-1)孵育细胞，可使单个结肠平滑肌细胞舒张，呈一定剂量-效应关系，最大反应浓度为1.75 g·L^-1。 1．2 EGb对ACh引起结肠平滑肌细胞收缩效应的影响 ACh(10^-6mol·L^-1)明显增强结肠平滑肌细胞的收缩，与对照组相比增强49.1％。用EGb预先孵育3 mjn，可明显抑制ACh收缩效应的44.1％。 1．3 Forskolin对EGb效应的影响腺苷酸环化酶激动剂Forskolin(10^-2mol·L^-1)可增强EGb的舒张效应，与单独应用EGb组相比较平滑肌细胞舒张百分数增加8.9％（P＜0.05）。观察了单独应用EGb组和Forskolin+EGb组，平滑肌细胞舒张百安徽医科大学硕士学位论文分数分别是12.8%（P<0.05）和22.7%（P<0.01）。2 EGb对豚鼠结肠平滑肌运动的影响及其机制的初步探讨2.1不同浓度的EGb对豚鼠离体结肠运动的影响EGb（0.5一50.Omg·L一‘），可使豚鼠离体结肠平滑肌运动出现抑制和兴奋两种不同反应，其中以抑制作用为主，浓度为10.Omg·IJ一’时作用最强。2.2不同浓度的银杏黄酮对豚鼠离体结肠运动的影响银杏黄酮（Flavon山〔15）（0.01一0.巧mg·L一，）可使豚鼠离体结肠运动受到抑制，当银杏黄酮为0.10 mg·L一，时，其运动的幅度和张力受抑制的程度最为明显，分别为一21.8士5.6、一14.7士6.3。EGb对ACh、5一HT引起的结肠平滑肌强直性收缩的抑制作用ACh（10一6·L一‘）和5一Hr（10一魂mol·L一，）0.ml可引起离体结肠强直性收缩，其收缩幅Odl万1 O9︺m度和张力较给药前明显增强，于3 min后再加入EGb（10.Omg·部分拮抗ACh、5一HT增强肠平滑肌收缩的效应。L一‘）0 .lml2.4 EGb对V工P、GABA、阿托品、肾上腺素引起的结肠运动抑制效应的影响，则可 在平滑肌浴槽内分别加入血管活性肠肤（vIP）（10一魂mol·L一，）、Y一氨基丁酸（GABA）(10一‘mol、阿托品（Atropine）（10一6 mol·L一，）、’肾上腺素（Adr）(10一5 mol·L一，离体结肠运动受到抑制，再加入EGb（10mg·L一，）0.lml后，vIP组收一，rLI止.用缩幅度和张力进一步降低，其幅度和张力分别由一10.9士8.3、一10.7士5.3下降到一18.6士7.3、一25.1士8.7（P<0.05）;而Atropine、GABA、Adr组与未加E〔;b组比较变化无显著性。2.5钙对EGb作用的影响用无钙Krebs液替代普通KrebS液灌流结肠标本，待肠管运动稳定后，加入EGb（10 mg·L一‘）0.lml，发现EGb可进一步抑制结肠运动，其运动幅度和张力分别由一23.5士12.6、一21.7士12.3下降到一52.2士6.8（P<O.GI）、一38.7士16.4（P<0.05），与用普通KrebS液灌流相比有显著性差异（P>安徽医科大学硕士学位论文0 .05）。3 EGb对BALB/c小鼠小肠推进速度的影响 E（3b（2 .0 mg·L一，）0.lml/109可使BALB/c小鼠小肠推进率明显降低，与对照组相比具有显著性差异（P<0.01）。4肠功能紊乱模型的建立4.1 EGb对胃肠动力的影响EGb（2 .Omg·L一，）10ml/kg体重可明显抑制大鼠的小肠推进率（P<0.05），对胃排空速度无显著性影响（P>.05）。4.2 EGb对冷束缚应激引起的大鼠胃肠动力改变的影响冷束缚应激可明显增加大鼠胃排空速度〔P<0.05），并显著抑制大鼠小肠推进率（P<0.01）。EGb干预可明显拮抗应激引起的胃排空增快和小肠推进率降低（P<0.05）。4.3 EGb对大鼠结肠组织、血浆中SP、VIP和N0含量的影响EGb组中远端结肠组织和血浆中SP含量均显著高于对照组（P<0.05或P<0.01），且血浆中SP含量增高幅度（148.9%）较结肠组织中（25.sryo）更为显著;EGb组远端结肠组织中VIP的含量明显增加（P<0.05），但血浆中VIP、NO含量及远端结肠组织中的N0含量一没有显著变化（p>0.05）。4.4冷束缚应激对大鼠结肠组织、血浆SP、VIP和N0含量的影响冷束缚应激组中，远端结肠中SP、VIP含量显著下降（P<0.05），血浆中SP、N0含量显著增加（P<0.05或P<0.01），血浆中VIP含量、远端结肠中NO含量无显著性下降 （P>.05）。应用EGb千预的应激组中，血浆中SP含量进一步升高，远端结肠组织中SP、VIP含量进一步下降，血浆中N0含量显著下降，其值接近于正常对照组值，而血浆中VIP，结肠中NO含量无显著性变化。结论1.EGb对豚鼠游离结肠平滑肌细胞具有舒张作用，这种作用可能与cAMP信号转导安徽医科大学硕士学位论文通路相关。2.D北对豚鼠离体结肠运