硫酸右旋糖酐通过影响Hif-1α、VEGF的表达抑制人胃癌细胞腹腔种植转移的研究

来源 :宁夏医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dorothyhe
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目的:探讨硫酸右旋糖酐(dextran sulfate,DS)对缺氧诱导因子(Hif-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、微血管密度(MVD)的影响,观察腹腔内瘤结节种植情况,进而研究DS对人胃癌细胞腹腔种植的抑制作用及其机制。方法:将72只裸鼠分为实验组与对照组,实验组40只腹腔注射浓度为1×107/m L的BGC-823人胃癌细胞0.2 m L,24h后腹腔注射0.3%DS1m L;对照组32只于注射相同浓度细胞0.2 m L 24h后,腹腔注射生理盐水1m L。分别于1、3、7、14d时颈椎脱位法将其处死,剖腹观察腹腔内瘤结节的转移情况,应用免疫组化法检测Hif-1α、VEGF、CD34的表达,RT-PCR及Western-blot检测Hif-1α、VEGF m RNA及蛋白的表达。结果:1.人胃癌细胞种植后1天对照组与实验组均未观察到肿瘤结节,随着时间的推移,两组瘤结节数均增多,对照组增加的幅度明显高于实验组,对照组与实验组之间结节个数有显著差异(P<0.001)。2.免疫组化结果显示:1天时两组之间Hif-1α的表达无差异(P>0.05),3、7、14天时两组Hif-1α的表达均增加且有明显差异(P<0.01);对照组与实验组VEGF的表达均增加,两组之间的表达有明显差异(P<0.001),实验组明显低于对照组;早期随着时间的推移MVD值明显增高,但在后期,MVD值反而下降,总体来看,对照组与实验组之间在不同时间点上MVD值有显著差异(P<0.01),实验组的MVD值明显低于对照组。3.RT-PCR结果显示:随着时间的推移,对照组与实验组Hif-1αm RNA、VEGF m RNA的表达均增加,两组之间的表达均有明显差异(P<0.001),实验组明显低于对照组。4.western-blot结果显示:人胃癌细胞种植后1天对照组与实验组均未检测到Hif-1α及VEGF的表达,随着时间的推移表达增加,Hif-1α及VEGF的表达均在两组之间均有明显差异(P<0.001),对照组明显高于实验组。5.随着时间的推移,对照组和实验组Hif-1α、VEGF的表达均增加,且两者之间的表达呈正相关。结论:1.DS可以抑制人胃癌细胞在腹腔内的种植转移。2.随着人胃癌细胞种植后时间的推移,DS可以下调Hif-1α、VEGF的表达及MVD值。3.大网膜肿瘤组织内,Hif-1α与VEGF、VEGF及MVD值呈正相关。4.DS可能是通过下调Hif-1α、VEGF的表达,并影响MVD值从而抑制人胃癌细胞的腹腔种植转移。
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