火针对脊髓损伤后BDNF、TrkB蛋白及基因表达的影响

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目的:  通过探讨火针对脊髓损伤后大鼠BDNF、TrkB蛋白及基因表达的影响,以期保护受损的脊髓神经元并促进脊髓神经的修复和再生,为火针疗法治疗脊髓损伤提供科学实验理论依据。  方法:  健康SD雌性大鼠120只,随机分为空白组、假手术组、模型组和火针组,其中模型组和火针组又各自分为1d,3d,7d,10d,14d五个时间段组,空白组、假手术组、模型组和火针组的每个时间段组各有10只大鼠。空白组不做任何处理,假手术组只做T9、Tl0椎板切除术,模型组和火针组采用改良Allen脊髓撞击法制备动物模型。模型组造模后不予干预,火针组使用火针快针法每天点刺大鼠T7-T8和T11-T12棘突下两侧的华佗夹脊穴。实验一采用Western Blot法观察火针对SCI后BDNF、TrkB蛋白表达的影响。实验二采用RT-PCR法观察火针对SCI后BDNF、TrkB基因表达的影响。  结果:  1.在脊髓损伤24h后,模型组与火针组大鼠BDNF、TrkB蛋白表达量较空白组与假手术组有所减少;模型组大鼠BDNF蛋白表达在1d,3d,7d,10d逐渐增多;火针组大鼠BDNF蛋白表达随时间变化有增长的趋势,7d时和10d时到达顶峰,14d时有所减少,且在7d,10d时的表达量显著高于模型组(P<0.05)。模型组大鼠TrkB蛋白表达在1d,3d,7d逐渐增多,后逐渐减少;火针组大鼠TrkB蛋白表达在1d,3d,7d逐渐升高,在10d,14d有所降低;且火针组大鼠在7d,10d时TrkB蛋白表达均明显高于模型组(P<0.05);在7d时,与3d时相比,火针组大鼠TrkB蛋白表达量也显著升高(P<0.05)。  2.在脊髓损伤24h后,模型组与火针组大鼠BDNF和TrkB基因表达量较空白组与假手术组相比明显减少;模型组大鼠BDNF基因表达在1d,3d,7d,10d逐渐增多;火针组大鼠BDNF基因表达随时间变化在1d,3d,7d有增长的趋势,10d、14d时逐渐减少,且在3d,7d的表达量显著高于模型组(P<0.05)。模型组大鼠TrkB基因表达量在1d,3d,7d逐渐增多,后略有减少;火针组大鼠TrkB基因表达在1d,3d,7d逐渐升高,在10d,14d逐渐降低;且火针组大鼠TrkB基因表达在7d,10d时均明显高于模型组(P<0.05);在3d时,与1d时相比,火针组大鼠TrkB基因表达量也显著升高(P<0.05)。  结论:  火针疗法可以促进脊髓损伤后大鼠BDNF、TrkB蛋白和基因的表达,表明火针对脊髓损伤具有一定的神经保护作用并且有可能启动一系列相关信号转导通路促进内源性神经干细胞增殖并向神经元分化,从而修复损伤的脊髓;同时火针在干预3d、7d或10d时相关蛋白及基因表达的增长趋势达到最大。
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